第一篇：微生物第六七章总结（推荐）

微生物的生长和控制

第一节：测定生长繁殖的方法

一.测生长量

(一)直接法：有粗放的测体积法和精确的称干重法。(二)间接法：1.比浊法2.生理指标法 二.计繁殖数

(一)直接法：指用计数板(例如血球计数板)在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。此法十分常用,但得到的数目是包括死细胞在内的总菌数。可以采用特殊的染色法计算活细胞。

(二)间接法：

1.平板菌落计数法：可用浇注平板或涂布平板或滚管法等方法进行。2.厌氧菌的菌落计数法：亨盖特滚管培养法。

第二节微生物的生长规律

一.单细胞微生物的典型生长曲线

它只适合单细胞微生物如细菌和酵母菌,非典型的丝状菌生长曲线缺乏指数生长期, 与此期相当的只是培养时间与菌丝体干重的立方根成直线关系的一段快速生长时期。根据微生物的生长速率常数, 即每小时分裂次数(的不同, 一般可把典型生长曲线粗分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期等4个时期。(一)延滞期：

延滞期又称停滞期、调整期或适应期。

影响延滞期长短的因素：菌种类型，接种龄，接种量，培养基成分。(二)指数期：

指数期又称对数期

在指数期中,有 3 个重要参数,其相互关系及计算方法在书P155 影响对数期的因素：菌种，营养成分，营养物质浓度，培养温度(三)稳定期：

细胞内开始积聚糖原、异染颗粒和脂肪等内含物;芽孢杆菌一般在这时开始形成芽孢;在这时开始以初生代谢物作前体,合成抗生素等对人类有用的各种次生代谢物。

稳定期到来的原因是:①营养物尤其是生长限制因子的耗尽;②营养物的比例失调;③有害代谢产物的累积;④物理化学条件越来越不适宜等等。(四)衰亡期：

有的微生物在这期会进一步合成或释放对人类有益的抗生素等次生代谢物;而在芽孢杆菌中, 往往在此期释放芽孢;等等。第三节影响微生物生长的主要因素

其中最主要的温度、pH和氧气。一.温度：

生长温度三基点:最低生长温度、最适生长温度和最高生长温度。在不同温度下，微生物的代谢产物可能会发生改变。二.PH：除不同种类微生物有其最适生长PH外, 即使同一种微生物在其不同的生长阶段和不同的生理、生化过程, 也有不同的最适PH要求。三.氧气：

按照微生物与氧的关系,可把它们粗分成好氧微生物和厌氧微生物两大类。细分为专性好氧菌，兼性厌氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厌氧菌。关于厌氧菌不能存活于氧气环境中的解释，现在普遍认为是因为厌氧菌中不存在过氧化氢酶和SOD（超氧化物歧化酶）

第四节微生物培养法概论

一.实验室培养法(一)固体培养法

1.好氧菌的固体培养：主要用试管斜面、培养皿琼脂平板。

2.厌氧菌的固体培养：高层琼脂柱，厌氧培养皿，亨盖特滚管技术(二)液体培养法

1.好氧菌的液体培养：(1)试管液体培养;(2)三角瓶浅层液体培养;(3)摇瓶培养

第五节有害微生物的控制

灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施,称为灭菌.消毒:是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌, 而对被消毒的对象基本无害的措施。

防腐:防腐就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖, 即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。例如：低温，缺氧，干燥，高渗，高酸，高醇，防腐剂。

一.物理灭菌因素的代表——高温 1.干热灭菌法

把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内, 在150～170℃下维持1～2 h后, 可达到彻底灭菌(包括细菌的芽孢)的目的。2.湿热灭菌法(1)常压法

①巴氏消毒法：此法可杀灭物料中的无芽孢病原菌(如牛奶中的结核分枝杆菌或沙门氏菌), 又不影响其原有风味。

具体方法可分两类: 第一类是经典的低温维持法(LTH),例如用于牛奶消毒只要在63℃下维持30 min即可;第二类是较现代的高温瞬时法（HTST）,用此法作牛奶消毒时只要在72℃下保持15 s。

③间歇灭菌法：适用于不耐热培养基的灭菌，将待灭菌的培养基放在80～100℃下蒸煮 15～60min,以杀灭其中所有的微生物营养体, 然后放至室温或 37℃下保温过夜, 诱使其中残存的芽孢发芽,第二天再以同法蒸煮和保温过夜, 如此连续重复 3 天即可在较低的灭菌温度下同样达到彻底灭菌的良好效果。(2)加压法

①常规加压蒸气灭菌法：一般称作“高压蒸气灭菌法”，一般要求为121℃，时间维持15-20min ②连续加压蒸气灭菌法:在发酵行业里也称“连消法”。此法仅用于大型发酵厂的大批培养基灭菌。

利用温度杀菌时几个关键的数值：

①D值是指在一定的致死温度下，90％的活菌被杀死所需的时间（min),即为D值。

②Z值是指如果在加热致时间曲线中，加热时间缩短90％，所需升高的温度，这所需升高的温度即为z值，或者说杀菌时间变化10倍，相应的温度变化值。影响加压蒸气灭菌效果的因素： 1.灭菌物体含菌量

2.灭菌锅内空气排除程度 3.灭菌对象的 pH 4.灭菌对象的体积 5.加热与散热速度

微生物的遗传变异和育种

第一节遗传变异的物质基础 个基本概念:(1)遗传型：又称基因型, 指某一生物个体所含有的全部遗传因子即基因的总和。

(2)表型：指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和,是其遗传型在合适环境条件下通过代谢和发育而得到的具体体现。

(3)变异：指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变,亦即遗传型的改变。

(4)饰变：即一种不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。一.三个证明遗传物质是核酸的经典实验：(一)经典转化实验：肺炎双球菌的转化实验(二)噬菌体感染实验(三)植物病毒的重建实验 二.原核生物的质粒简介：

(1)F质粒：又称F因子、致育因子或性因子,是E.coli等细菌决定性别并有转移能力的质粒。(2)R质粒：又称R因子，为细菌提供抗药性。(3)Col质粒：编码细菌素的质粒。

(4)Ti质粒：即诱癌质粒或冠瘿质粒。Ri质粒与Ti质粒类似。

(5)mega质粒：即巨大质粒,存在于根瘤菌属中, 其上有一系列与共生固氮相关的基因。(6)降解性质粒：只在 Pseudomonas(假单胞菌属)中发现。这类质粒可为降解一系列复杂有机物的酶编码,从而使这类细菌在污水处理、环境保护等方面发挥特有的作用。(7)2μm质粒存在于酵母菌细胞中。

第二节基因突变和诱变育种

一.基因突变

（一）突变类型 1.营养缺陷型：某一野生型菌株因发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸的能力,因而无法再在基本培养基(MM)上正常生长繁殖的变异类型。

2.抗性突变型：指野生型菌株因发生基因突变,而产生的对某化学药物或致死物理因子的抗性变异类型。6.产量突变型：通过基因突变而产生的在代谢产物产量上明显有别于原始菌株的突变株, 称产量突变型。产量高则为正变株，产量低则为负变株。

（二）基因突变的特点

①自发性②不对应性③稀有性⑤可诱变性⑥稳定性⑦可逆性

（三）基因突变的机制

1.诱发突变：诱发突变简称诱变,是指通过人为的方法, 利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。凡具有诱变效应的任何因素, 都称诱变剂。(1)碱基的置换：因它只涉及一对碱基被另一对碱基所置换。

置换又可分两个亚类:一类称转换,即DNA链中一个嘌呤被另一个嘌呤或是一个嘧啶被另一个嘧啶所置换;另一类称颠换,即一个嘌呤被另一个嘧啶或是一个嘧啶被另一个嘌呤所置换。①直接引起置换的诱变剂: 例如亚硝酸、羟胺和各种烷化剂等 ②间接引起置换的诱变剂: 5-溴尿嘧啶等

(2)移码突变：指诱变剂会使 DNA 序列中的一个或少数几个核苷酸发生增添(插入)或缺失,从而使该处后面的全部遗传密码的阅读框架发生改变。能引起移码突变的因素是一些吖啶类染料。

(3)染色体畸变：包括染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和倒位,也包括染色体数目的变化。某些强烈理化因子, 如电离辐射(X射线等)和烷化剂、亚硝酸等会导致染色体畸变。2.自发突变：指生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变。

（四）紫外线对 DNA 的损伤及其修复

嘧啶对UV的敏感性比嘌呤强得多, 其光化学反应产物主要是嘧啶二聚体(TT, TC, CC)和水合物,相邻嘧啶形成二聚体后, 造成局部DNA分子无法配对。二.突变与育种

(一)自发突变与育种 1.从生产中育种 2.定向培育优良菌株(二)诱变育种

1.诱变育种是指利用物理、化学等诱变剂处理均匀而分散的微生物细胞群, 在促进其突变率显著提高的基础上,采用简便、快速和高效的筛选方法, 从中挑选出少数符合目的的突变株,以供科学实验或生产实践使用。2.艾姆斯试验

艾姆氏试验是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效方法。（三致作用：致癌致畸致突变）实验菌种：鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型

试验方法：是在含待测可疑“三致”物的试样中,加入鼠肝匀浆液, 经一段时间保温后,吸入滤纸片中, 然后将滤纸片放置于上述平板中央。经培养后,出现结果。有三种结果

①在平板上无大量菌落产生, 说明试样中不含诱变剂;②在纸片周围有一抑制圈, 其外周出现大量菌落, 说明试样中有某种高浓度的诱变剂存在;③在纸片周围长有大量菌落, 说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。加入鼠肝匀浆的作用：因许多化学物质原先并非诱变剂或致癌剂,只有在进入机体并在肝脏的解毒过程中, 受到肝细胞中一些加氧酶的作用,才形成有害的环氧化物或其他激活态化合物, 故试验中先要加入鼠肝匀浆液保温;3.营养缺陷型突变株的筛选方法

①与筛选营养缺陷型突变株有关的 3 类培养基: 基本培养基(MM,符号为[-]):仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需要的最低成分的组合培养基,称基本培养基。

完全培养基(CM,符号为[ + ]):凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基, 称完全培养基。

补充培养基(SM,符号为[ A]或[B]等):凡只能满足相应的营养缺陷型突变株生长需要的组合或半组合培养基, 称补充培养基。

②与营养缺陷型突变有关的 3 类遗传型个体: 野生型:指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷突变前的原始菌株。

营养缺陷型:野生型菌株经诱变剂处理后, 由于发生了丧失某酶合成能力的突变,因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长, 这类突变菌株称为营养缺陷型突变株。

原养型:一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株,其营养要求在表型上与野生型相同。

(3)营养缺陷型的筛选方法 ①诱变剂处理

②淘汰野生型：通过抗生素法或者菌丝过滤法即可 ③检出缺陷型：

夹层培养法: 先在培养皿底部倒一薄层不含菌的基本培养基（MM）,待凝,添加一层混有经诱变剂处理菌液的基本培养基（含菌MM）,其上再浇一薄层不含菌的基本培养基（MM）,遂成“三明治”状。经培养后,对首次出现的菌落用记号笔一一标在皿底。然后, 再向皿内倒上一薄层第四层培养基——完全培养基（CM）。再经培养后,全长出形态较小的新菌落, 它们多数都是营养缺陷型突变株。限量补充培养法 逐个检出法 影印平板法

④鉴定缺陷型:可借生长谱法进行。

第三节基因重组与杂交育种

真核微生物中的有性杂交、准性杂交、原生质体融合以及原核生物中的转化、转导、接合和原生质体融合等。

一.原核生物的基因重组

特点为: ①片段性,仅一小段DNA序列参与重组;②单向性,即从供体菌向受体菌(或从供体基因组向受体基因组)作单方向转移;③转移机制独特而多样,如接合、转化和转导等。(一)转化

1.定义：受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象,称为转化或转化作用。通过转化方式而形成的杂种后代,称转化子。

2.感受态：凡能发生转化, 其受体细胞必须处于感受态。感受态是指受体细胞最易接受外源 DNA 片段并能实现转化的一种生理状态。(二)转导 1.定义：通过缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞的小片段 DNA 携带到受体细胞中,通过交换与整合, 使后者获得前者部分遗传性状的现象, 称为转导。

2.普遍转导：通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小片段DNA进行“误包” , 而将其遗传性状传递给受体菌的现象,称为普遍转导。

3.局限转导：指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中, 并与后者的基因组整合、重组, 形成转导子的现象。(三)接合

1.定义：供体菌(“雄性”)通过性菌毛与受体菌(“雌性”)直接接触, 把 F 质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者, 使后者获得若干新遗传性状的现象, 称为接合。2.E.coli的4种接合型菌株

根据F质粒在细胞内的存在方式, 可把 E.coli 分成 4 种不同接合型菌株

(1)F+ 菌株即“雄性”菌株, 指细胞内存在一至几个F质粒, 并在细胞表面着生一至几条性菌毛的菌株。

(2)F-菌株即“雌性”菌株, 指细胞中无 F 质粒、细胞表面也无性菌毛的菌株。它可通过与F+菌株或F’菌株的接合而接受供体菌的F质粒或F’质粒, 从而使自己转变成“雄性”菌株;也可通过接合接受来自Hfr菌株的一部分或一整套核基因组 DNA(3)Hfr菌株:在Hfr菌株细胞中, 因F质粒已从游离态转变成在核染色体组特定位点上的整合态, 故Hfr菌株与F-菌株相接合后, 发生基因重组的频率要比单纯用F+与F-接合后的频率高出数百倍。

二.真核微生物的基因重组(一)有性杂交

有性杂交, 一般指不同遗传型的两性细胞间发生的接合和随之进行的染色体重组,进而产生新遗传型后代的一种育种技术。(二)准性杂交 1.定义：准性生殖是一种类似于有性生殖,但比它更为原始的两性生殖方式, 这是一种在同种而不同菌株的体细胞间发生的融合,它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子。2.准性生殖过程

(1)菌丝联结：它发生于一些形态上没有区别、但在遗传型上却有差别的同种不同菌株的体细胞(单倍体)间。发生菌丝联结的频率是极低的。

(2)形成异核体：两个遗传型有差异的体细胞经菌丝联结后,先发生质配,使两个单倍体核集中到同一细胞中, 于是形成了双相的异核体。异核体能独立生活。

(3)核融合：或称核配, 指在异核体中的两个细胞核在某种条件下,低频率地产生双倍体杂合子核的现象。

(4)体细胞交换和单倍体化：体细胞交换，即体细胞中染色体间的交换,也称有丝分裂交换。3.准性杂交育种

(1)选择亲本：即选择来自不同菌株的合适的营养缺陷型作为准性杂交的亲本。(2)强制异合：即用人为的方法强制两个营养缺陷型的亲本菌株形成互补的异核体。(3)移单菌落：将平板上长出的单菌落移种到基本培养基[-]的斜面上。

(4)验稳定性：指设法检验获得的菌株究竟是一种不稳定的异核体,还是稳定的杂合二倍体。(5)促进变异：把上述稳定菌株所产生的分生孢子处理,以促使其发生染色体交换、染色体在子细胞中分配不均、染色体缺失或畸变以及发生点突变等变化,从而使分离后的杂交子代(单倍体杂合子)进一步增加新性状变异的可能性。第四节菌种的衰退、复壮和保藏

一.菌种的衰退与复壮

衰退：是指由于自发突变的结果, 而使某物种原有一系列生物学性状发生量变或质变的现象。具体表现有: ①原有形态性状变得不典型了②生长速度变慢,产生的孢子变少③代谢产物生产能力下降,即出现负变④致病菌对宿主侵染力的下降,⑤对外界不良条件包括低温、高温或噬菌体侵染等抵抗能力的下降等等。狭义的复壮仅是一种消极的措施，指的是在菌种已发生衰退的情况下, 通过纯种分离和测定典型性状、生产性能等指标,从已衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体, 以达到恢复原菌株固有性状的相应措施。

广义的复壮则应是一项积极的措施, 即在菌种的典型特征或生产性状尚未衰退前,就经常有意识地采取纯种分离和生产性状的测定工作, 以期从中选择到自发的正变个体。(一)衰退的防止 1.控制传代次数

2.创造良好的培养条件

3.利用不易衰退的细胞传代 4.采用有效的菌种保藏方法(二)菌种的复壮 1.纯种分离法 2.通过宿主体复壮 3.淘汰已衰退的个体 二.菌种的保藏

1.定义：通过适当的方法使得微生物能够长期存活，并保持原种的微生物学性状稳定不变的一类措施。

2.原理：首先应挑选典型菌种或典型培养物的优良纯种, 最好保藏它们的分生孢子、芽孢等体眠体;其次,还要创造一个有利于它们长期休眠的良好环境条件。3.七种常用的方法： 冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固体）石蜡油封保藏法 甘油悬液保藏法 砂土保藏法

冷冻干燥保藏法：干燥，低温，无氧，有保护剂 液氮超低温保藏法：超低温（-196℃）

各大菌种保藏单位普遍使用冷冻干燥保藏法和液氮超低温保藏法

微生物的生态

1.土壤中微生物的数目：

尽管土壤的类型众多, 其中各种微生物的含量变化很大, 但一般来说, 在每克耕作层土壤中,各种微生物含量之比大体有一个 10 倍系列的递减规律: 细菌(～108)>放线菌(～107 , 孢子)>霉菌(～106 , 孢子)>酵母菌(～105)>藻类(～104)>原生动物(～103)2.微生物与生物环境间的关系：

①互生：两种可单独生活的生物, 当它们在一起时, 通过各自的代谢活动而有利于对方, 或偏利于一方的生活方式,称为互生。

②共生：是指两种生物共居在一起, 相互分工合作、相依为命, 甚至达到难分难解、合二为一的极其紧密的一种相互关系。

③寄生：一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内(包括细胞内)或体表, 从中夺取营养并进行生长繁殖,同时使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系。前者称为寄生物,后者则称作宿主或寄主。④拮抗：指由某种生物所产生的特定代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系。⑤捕食：一般指一种大型的生物直接捕捉、吞食另一种小型生物以满足其营养需要的相互关系。

习题：

一.填空题

1.证明核酸是遗传物质基础的是三个经典实验分别是：____、____和____。2.细菌的质粒种类很多，其中接合性质粒如____，抗药性质粒如____，产细菌素质粒如____，诱癌质粒如____等。

3.常见的“三致”是指____、____和____，目前检出某试样是否含有三致作用的减简便。高效的试验是____。

4.与营养缺陷突变有关的三类培养基是____、____和____。其符号分别是____，____和____。5.检出营养缺陷型一般有四种方法：____，____，____和____。

6.艾姆斯试验中用的菌株是____的____缺陷型菌株，通过____突变可以测定待测样品中“三致”物质的存在。

7.普遍转导与局限转导的区别在于：①普遍转导噬菌体是____噬菌体，而局限转导噬菌体是____噬菌体。②普遍转导噬菌体能够转移供体菌的____基因，而局限转导噬菌体只能转移供体菌的____基因。

8.在大肠杆菌接合过程中，有四种独特的菌株参与，他们是____、____、____和____。9.目前国际上代表性菌种保藏机构如美国的ATCC仅使用两种保藏方法，即____和____。二.判断题

1.原养型是野生型的别称，两者不仅表型相同，而且遗传型也一致。2.受体细胞实现DNA转化，必须先出现感受态。

3.5-尿溴吡啶是以碱基是以碱基颠换的方式引起基因突变的。

4.微生物菌种退化的问题在工业生产中有时会遇到，一旦菌种退化，生产效率下降，更重要的是：退化菌种群体中再也找不到生产能力正常的细胞。

5.准性杂交中能够导致低频率的基因重组是因为这些真菌的杂合二倍体细胞在进行减数分裂时，同源染色体进行配对而发生染色体之间交换的结果。

6.在筛选营养缺陷型时，在完全培养基中加入青霉素，可以有效杀死大量生长繁殖的野生型菌株，从而达到浓缩营养缺陷型的作用。7.普遍转导可将供体菌的任何基因转导，故可使受体菌成为获得全套供体菌基因组的转导子。8.转化和转导都不需要供体菌和受体菌的完整细胞直接接触而进行的。

9、当大肠杆菌的F+和F-菌株发生结合时，F因子由供体菌进入受体菌，从而使原F+变成了 F-，而原F-变成了F+。

10.粘质沙雷氏菌在25℃下形成血红色菌落，但置于37℃下则形成无色菌落，这说明该菌种发生了衰退。

11.C+G%值差别越远的两种生物，其亲缘关系必然十分疏远。12.亲缘关系越近的微生物，其碱基序列也越接近，故核酸分子杂交的同源性百分值就越高。13.微生物的数值分类法实际上是一种利用计算机进行的统计分类方法。三.选择题

1.2μm质粒存在于（）中 A.草履虫 B.酿酒酵母 C.大肠杆菌 D.粗糙脉胞菌

2.某微生物经诱变后，其DNA链上的A变成G,这种突变属于（）A.转换 B.颠换 C.移码 D.转座 3.最易引起移码突变的诱变剂是（）A.亚硝酸 B.烷化剂 C.5-尿溴吡啶

D.吖啶类染料

4.有一种检出营养缺陷型的夹层培养法，要在培养基中先加入3薄层片培养基，经过培养后再倒入第4层培养基，这四层加入的顺序是（）A.MM+含菌MM+SM+CM B.MM+含菌MM+MM+CM C.MM+含菌MM+MM+SM D.MM+含菌MM+CM+SM 5.有一种简便的，快速的鉴定营养缺陷型的方法是（）A.青霉素法 B.夹层平板法 C.影印平板法 D.生长谱法

6.必须经过两性细胞如何而完成的高频率基因重组并产生杂种子代的杂交方法，称为（）A.准性杂交 B.接合 C.有性杂交 D.转导

7.发生低频率的染色体重组并产生杂种子代的方式，称为（）A.准性杂交 B.接合 C.有性杂交 D.转导

8.供体细胞和受体细胞通过缺陷噬菌体作为媒介，从供体细胞传递部分染色体至受体细胞的现象，称为（）

A.接合 B.转化 C.转导 D.性导

9.供体菌的游离DNA不通过细胞间的接触直接进入受体菌并实现部分染色体遗传重组的现象，称为（）

A.接合 B.转化 C.转导 D.转染

10.白喉棒杆菌被β噬菌体溶源化后，称为产毒株，此即（）A.转化 B.转导 C.转染 D.溶原性转变

11.在细菌接合实验中，不同菌株接合后的使受体菌获得较多供体菌性状的配对是（）A.F+和F-B.F和F-C.F+和Hfr D.Hfr和F-12.对于低温保藏菌种来说，以下四种温度中以（）为最好 A.0℃ B.-20℃

C.-70℃

D.-196℃ 13.人体正常菌群与人类的关系属于（）A.互生 B.共生 C.寄生 D.拮抗

14.下列微生物中，有一种非但不是条件致病菌，而且还可以制成优良益生菌制剂的是（）A.大肠杆菌

B.脆弱拟杆菌 C.白色假丝酵母

D.嗜酸乳杆菌 四.问答题

1.简述微生物遗传育种中常用的方法。2.微生物污染食品的途径有哪些？

3.菌种保藏原理是什么？简要介绍三种常用的方法？

第二篇：微生物总结

微生物：一类分布广泛、体积微小、结构简单、肉眼直接看不到，微小生物的总称。

细菌L型：细菌细胞壁的肽聚糖结构受理化或生物因素直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活，称细菌细胞壁缺陷型或L型。

质粒：是染色体外的遗传物质，控制某些特定的生物学性状，不是细菌生长所必需。

荚膜：是细菌合成分泌的包绕于细胞壁外的一层粘液性物质。界限清晰性质稳定结合牢固。培养基：由人工方法经灭菌后制成，专供微生物生长使用的混合营养制品。一般pH为7.2-7.6。

兼性厌氧菌：兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能，无论在有氧或无氧环境中都能生长，但以有氧时生长较好，大多数病原菌属于此。菌落：在固体培养基中，经过十八到24小时培养后，单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细红细胞吸附：流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素（HA），具有吸附脊椎动物红细胞的能力，这一现象称为红细胞吸附。抗毒素：通常是用细菌类毒素给马多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物来源的抗菌药物，以及人工化学修饰或半合成的衍生物

无菌：就是指没有活菌的意思。

1：细胞壁结构、化学组成及功能？答：化学组成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥②磷壁酸：粘附功能，与致病性有关；抗原性很强③其他成分：如A群链球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽侧链②外膜：脂蛋白；脂质双层；脂多糖：脂类A（毒性成分，无种属特异性）；核心多糖；特异多糖。功能：①维持细菌固有形态②保护细菌抵抗低渗环境③物质交换④决定菌体的抗原性。2：G-菌与G+菌细胞壁的异同点及其意义？答：兼性厌氧菌、专性厌氧菌。

11：与医学有关的合成代谢产物？答：① 毒素与侵袭性酶：外毒素和内毒素②热原质：G-菌细胞壁的脂多糖，耐高温，250℃干烤破坏。③抗生素：某些微生物代谢中产生的一类能抑制或杀死其他微生物或肿瘤细胞的物质。④维生素：如VitK、B族维生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥细菌素：无治疗应用价值。13：病毒的形态、结构与化学组成。答：多数病毒呈球形或近似球形，少数呈杆状（植物病毒）、丝状（初分离的流感病毒）、弹状（狂犬病毒）、砖块状（如痘类病毒）和蝌蚪状（噬菌体）。病毒的核心和衣壳，二者构成核衣壳，病毒包膜和其他辅助结构。化学组成：核心：主要为核酸，化学组成为DNA或RNA。衣壳：包绕在核心外面的一层蛋白质，由许多蛋白质亚单位（壳粒）组成。包膜：化学组成： 脂质蛋白质糖类。

答：单细胞真菌呈圆形或卵圆形。多细胞真菌

结构：菌丝和孢子，菌丝：分为营养菌丝、气中菌丝、生殖菌丝；孢子：是真菌的繁殖体。结构：细胞壁外成分；细胞壁；隔膜；其他结构。

25：真菌培养特性。答：最常用的培养:沙保弱培养基。温度:多数都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最适温度为37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生长缓慢，1~4周。

26：真菌繁殖方式。答：①无性生殖：①由菌丝断裂形成新个体②细胞直接分裂产生子细胞③产生芽生孢子④产生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指经过两性细胞配合产生新个体的繁殖方式。

27：真菌抵抗力答：①对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力②不耐热，菌丝与孢子60℃ 1小时均可杀死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌药物：菌集团。

纯培养基：挑取一个菌落，移种到另一培养基中，生长出来的细菌均为纯种。

毒性噬菌体：在宿主菌细胞内噬菌体增殖产生子代噬菌体，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。温和噬菌体：噬菌体基因与宿主菌染色体整合，成为前噬菌体，噬菌体DNA能随细菌DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传到子代细菌的基因组中，变成溶原性细菌，形成溶原性周期。前噬菌体：整合在细菌染色体上的噬菌体基因。转座子：细菌基因组中的一段DNA序列，可以在染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分，伴随转座子的移动，会出现插入突变。基因转移：遗传物质由供体菌转入受体菌的过程为基因转移。

重组：转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组，重组使受体菌获得供体菌的某些性状。转化：细菌通过性菌毛相互连接沟通，将质粒或染色体等遗传物质从供体菌转移给受体菌的过程。

接合：是受体菌直接摄取供体菌DNA片段，从而获得新的遗传性状的过程。

转导：以噬菌体为载体将供菌的DNA片段转移到受菌体内使受菌获得供菌的部分遗传性状。溶原性转换：某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变，例如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理，温和噬菌体感染细菌时，其基因可整合于宿主菌染色体中，使宿主菌获得噬菌体基因赋予的新的性状，称溶原性转换。原生质体融合：将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进行融合的过程。融合后的染色体之间发生重组。病毒的自我复制：以病毒核酸为模板，经过复杂的生化过程，复制子代病毒的核酸并通过转录翻译产生病毒蛋白质，装配成熟后释放到细胞外，这种增殖方式称为病毒的自我复制。顿挫感染：被病毒侵入的细胞如不能为病毒增殖提供必需成分，则病毒不能合成本身成分，或能合成但不能组装和释出有感染性的病毒颗粒。非容纳细胞与容纳细胞

缺陷病毒：病毒基因组不完整或某一基因位点改变，不能正常增殖，不能复制出完整有感染性的病毒颗粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+辅助病毒完成复制

干扰现象：当两种病毒感染同一宿主细胞时，发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象。某些病毒感染细胞时不出现CPE或其他易于测出的变化（如HAd），但能干扰其后感染的另一病毒的增殖，从而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些细菌在一定环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内部形成的一个圆形或卵圆形小体。

正常菌群：正常人的体表和与外界相通的眼结膜，口腔、鼻腔、肠道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同种类和数量及对人体无害而有益的微生物。正常微生物群通称为正常菌群

细菌群体：细菌附着在有生命或无生命的材料表面后，由细菌及其所分泌的胞外多聚物共同组成的呈膜状的细菌群体。机会性感染：由正常菌群在机体免疫功能低下、寄居部位改变、菌群失调等特定条件下引起的感染。

毒力：致病性的强弱程度。

侵袭素：某些细菌的基因编码一些具有侵袭功能的蛋白多肽，促进该病原菌向邻近组织扩散甚至介导进入邻近黏膜上皮细胞内。

包涵体：细胞浆或细胞核内出现光镜下可见的斑块状结构

G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽侧链,五肽交联桥,三维立体②磷壁酸:重要表面抗原，与粘附致病有关，加强稳定细胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽侧链组成二维结构, ②外膜（脂蛋白、脂质双层、脂多糖组成）功能:屏障结构LPS是G－菌的内毒素。细胞壁结构异同:G+菌/G－菌--强度:较坚韧/较疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖层数:多可达50层/少，1-2层--肽聚糖结构:聚糖骨架,四肽侧链,五肽交联桥,三维立体/聚糖骨架,四肽侧链,二维平面--脂类含量/少/多--磷壁酸:有/无--外膜:无/有,由脂蛋白、脂质双层、脂多糖组成3：细菌L型，特殊结构种类、化学组成、抗原性及意义？答：定义：细菌细胞壁的肽聚糖结构受理化或生物因素直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活，称细菌细胞壁缺陷型或L型。种类：G+菌细胞壁缺失后，仅有胞膜，称原生质体，G--菌肽聚糖层受损，尚有外膜，称原生质球。抗原性及意义：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高渗低琼脂含血清培养基—油煎蛋样菌落；去除诱因后，有些可回复为原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性药对L型感染治疗无效

4：细菌的特殊结构？答：①荚膜：多糖或多肽的多聚体。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物质的损伤d有抗原性，用于细菌的鉴定和分型②鞭毛：蛋白质，由基础小体丝状体钩状体组成，高度抗原性。功能a是细菌的运动器官b某些细菌的鞭毛与致病性有关c根据鞭毛的动力和鞭毛的抗原性可用以细菌的鉴别和分类③菌毛：由亚单位菌毛蛋白构成。功能a黏附作用b传递遗传物质④芽孢：生产芽孢的细菌都是革阳菌。功能：a增强抵抗力b不直接致病c鉴定。

5：细菌的遗传物质？答：细菌染色体，质粒，噬菌体：

6：基因转移与重组方式的种类及定义？答：定义：基因转移：遗传物质由供体菌转入受体菌的过程为基因转移。重组：转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组，重组使受体菌获得供体菌的某些性状。分类：转化,接合,转导,融合,转换.【表格】类型：基因来源/转移方式--转化：供菌游离的DNA片段/直接摄入--接合：供菌质粒DNA/ 性菌毛--转导：供菌任意DNA或噬菌体与供菌特定DNA/噬菌体--融合：两菌原生质体的DNA/融合--转换：温和噬菌体/吸附穿入

7：噬菌体及其相关概念。答：1）毒性噬菌体：在宿主菌细胞内噬菌体增殖产生子代噬菌体，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）温和噬菌体：噬菌体基因与宿主菌染色体整合，成为前噬菌体，噬菌体DNA能随细菌DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传到子代细菌的基因组中，变成溶原性细菌，形成溶原性周期。

8：细菌生长繁殖的条件？答:营养物质/酸碱度 多数病原菌最适pH为7.2~7.6/温度 多数病原菌生长最适温度为37℃/气体 据代谢时对分子氧的需要与否，专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌/渗透压。

9：细菌群体的生长繁殖？答：生长曲线：一定数量的细菌接种到定量的液体培养基中，连续定时取样测定活菌数量，以培养时间为横坐标，以活菌数的对数为纵坐标作图，得到的一条曲线。迟缓期：适应阶段。对数期：对抗生素敏感，细菌鉴定选此期。稳定期：代谢产物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌体细胞呈现多种形态。

10：按细菌对氧需要的分类？答：据代谢时对分子氧的需要与否，专性需氧菌、微需氧菌、14：双链DNA病毒的复制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻译）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA → mRNA→结构蛋白.→子代DNA+结构蛋白→子代病毒。简要过程：吸附，穿入，脱壳，生物合成，组装、成熟与释放。

15：顿挫病毒，缺陷病毒的概念？答：顿挫病毒：被病毒侵入的细胞如不能为病毒增殖提供必需成分，则病毒不能合成本身成分，或能合成但不能组装和释出有感染性的病毒颗粒。非容纳细胞与容纳细胞。缺陷病毒：病毒基因组不完整或某一基因位点改变，不能正常增殖，不能复制出完整有感染性的病毒颗粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+辅助病毒=完成复制 16：细菌的感染与致病。答：感染：在一定条件下，微生物与机体相互作用并导致机体产生不同程度的病理过程。★

17：细菌的毒力比较，外毒素与内毒素生物学特性。答：【表格】种类：内毒素★外毒素。来源：G-菌★G+菌部分G-菌。编码基因：染色体基因★质粒或前噬菌体或染色体基因。存在部位：细胞壁成分、细菌裂解后释出★活菌分泌或细菌溶解后散出。化学成分：脂多糖★蛋白质。稳定性：好(160℃2~4h才破坏）★差（60~80 ℃30m可破坏）。毒性作用：弱、各种内毒素作用大致相同★强、对机体组织器官有选择性。抗原性：弱，甲醛处理后不能形成类毒素★强，能刺激机体形成抗毒素，经甲醛脱毒后能形成类毒素。

18：细菌感染的类型答：①不感染②隐性感染③潜伏感染④显性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤带菌状态。

19：病毒感染类型。答：①隐性感染②显性感染：急性病毒感染：潜伏期短，发病急，数日或数周回复，病原消灭型感染。持续性病毒感染：慢性病毒感染；潜伏性病毒感染；慢发病毒感染。

20：细菌的致病机制。答：细菌的致病性强弱取决于毒力，细菌的毒力因子：①侵袭力：致病菌突破宿主生理屏障，进入机体并在体内定植、繁殖和扩散的能力包括黏附素、荚膜和微荚膜、侵袭性物质②毒素：细菌产生的损伤宿主引起生理功能紊乱的毒性物质，包括内毒素和外毒素。

21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：竞争粘附（占位性保护）作用；产生有害代谢物质；营养竞争②营养作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。

22：病毒分离鉴定方法及病毒在培养细胞中的增殖的指标。答：病毒的分离：①动物接种②鸡胚培养；流感病毒初次分离接种于羊膜腔；流感病毒的再培养接种于尿囊腔③组织培养④细胞培养 — 病毒分离鉴定中最常用的方法单层细胞培养；原代细胞培养；二倍体细胞培养；传代细胞培养。指标：1）细胞的变化①细胞病变效应：有些病毒在细胞内增殖时引起的特有的细胞病变，如细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落②多核巨细胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨细胞病毒等作用于细胞膜，使邻近的细胞融合，形成多核巨细胞③胞质或核内包涵体的形成狂犬病病毒、巨细胞病毒。2）红细胞吸附流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素，具有吸附脊椎动物红细胞的能力，这一现象称为红细胞吸附。常用来鉴定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.红细胞凝集检测含血凝素病毒的方法4）干扰现象5）空斑形成试验。

23：病毒成份的检测（抗原、核酸检测）答：1.病毒抗原的检测2.病毒核酸的检测

24：真菌的形态结构（单细胞和多细胞真菌）。

灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；对抗生素不敏感。

28：抗菌药物的种类与作用机制。答：杀菌药和抑菌药。机制：①抑制细菌细胞壁的合成②抑制细菌

细胞膜功③抑制细菌蛋白质合成④抑制细菌核酸合成。29：细菌耐药的机制。答：产生钝化酶；细胞通透性的改变；靶位结构的改变；建立代谢旁路；代谢酶分子的改变

30：医院感染的定义。答：由医院的病原生物或其毒素导致的局部或全身感染性疾病。

31：细菌分离培养和鉴定、生化试验、血清学试验？答：细菌分离培养和鉴定：原则上应对所有送检标本做分离培养，以便获得单个菌落后进行纯培养，从而对细菌做进一步的生物学、免疫学、致病性或细菌的药物敏感性等方面的检查，最终获得确切的报告。生化试验：得到细菌的纯培养物后，用糖发酵试验，吲哚试验，硝酸盐还原实验等对细菌的酶系统和其代谢产物的检查，是鉴别细菌的重要方法之一。血清学实验：利用含已知的特异性抗体的免疫血清，对细菌进行群和型的鉴别。

微生物种类名称★生物学性状★致病物质、致病机理及所致疾病

破伤风梭菌：菌体细长，芽胞正圆比菌体粗，位于菌体顶端菌体鼓槌状★不发酵糖类，不分解蛋白质。条件：局部伤口需形成厌氧微环境，伤口窄而深，有泥土或异物污染，大面积创伤，坏死组织多，局部组织缺血，同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口。防治原则：特异性预防：注射破伤风类毒素主动免疫；迅速对伤口清创扩创，防止形成厌氧微环境；紧急预防：TAT（精制破伤风抗毒素）；治疗： 早期足量使用TAT，抗生素。产气荚膜梭菌：G+粗大杆菌，芽胞位于次极端，椭圆形，直径小于菌体形成明显荚膜★血平板：双层溶血环，代谢十分活跃，牛奶培养基：“汹涌发酵”现象。增加血管通透性，组织坏死，气性坏疽，食物中毒，坏死性肠炎。

肉毒梭菌：G+粗短杆菌，芽胞位于次极端，椭圆形，菌体呈网球拍状，严格厌氧，分型多，生化反应复杂★肉毒毒素，抑制乙酰胆碱释放，引起运动神经末梢失调→肌肉麻痹；食物中毒，婴儿肉毒中毒。

支原体：菌落油煎蛋型，高度多形态型，细胞膜含高度固醇，无细胞壁，对青霉素有抵抗作用★支原体肺炎，病变为间质性肺炎，可合并支气管肺炎。称为原发性非典型性肺炎。不规则发热，刺激性咳嗽，头痛。婴幼儿病情严重，发病急，病程长，以呼吸困难为主。有些合并其他系统病变，如循环系统等。飞沫传播。立克次体：是一类体积微小，绝大多数为自身代谢不完善，严格细胞内寄生的原核细胞型微生物★流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病、Q热

衣原体：严格细胞内寄生，有独特发育周期，能通过细菌滤器，原核细胞型微生物★ 沙眼:感染眼结膜上皮细胞→增殖，包涵体→局部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害→影响视力或致盲包涵体结膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原体肺炎、性病淋巴肉芽肿

螺旋体：是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型微生物基本结构及生物学形状与细菌相似★梅毒，人是唯一传染源，致病物质为荚膜样物质，透明质酸酶；后天通过性接触传播或者先天经过母体传播。

第三篇：微生物总结

第一章、绪论

巴斯得的贡献：

1、彻底否定了“自生说”

2、免疫学—预防接种

3、证实发酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法

柯赫贡献：

1、证实炭疽病菌是炭疽病的病原菌

2、发现了肺结核病的病原菌

3、提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的病原菌——柯赫原则

4、固体培养基分离纯化微生物的技术

5、配制培养基

微生物的5大共性：

1、体积小、面积大

2、吸收多、转化快

3生长旺、繁殖快

4、分布广、种类多

5、适应性强、易变异 第二章、微生物的纯培养和显微技术

一、涂布平板法作用：用于纯种分离、筛选菌落、得到单菌落，对一些细菌进行计数 五区划线发作用：纯化菌种、得到单菌落

摇瓶实验作用：菌种筛选、发酵实验、种子培养等 穿刺法的作用：保藏厌氧菌种、研究微生物的动力 之字划线法的作用：保藏菌种、单菌落的获取

二、斜面菌种保藏法：保藏期限3个月以内，沙土管保藏法：保藏期限1~10年主要适用于产孢子的，如芽孢杆菌、放线菌 石蜡油封藏法：保藏期限1~2年

真空冷冻干燥法：保藏期限5~10年，液氮超低温病结法：保藏期限5~10年 第三章

一、细胞壁：根据细胞壁将原核生物分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两种。

1、革兰氏阳性菌细胞壁的特点：厚度大（20~80nm）和化学组分简单，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。

革兰氏阳性菌的机械阻拦与保护作用有肽聚糖完成。磷壁酸：是结合在革兰氏阳性菌细胞壁上的一种酸性多糖，主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。

磷壁酸为革兰氏阳性菌所特有。对于革兰氏阳性菌而言，抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能：1）、其磷酸分子上较多的负电荷可提高细胞周围镁离子的浓度进入细胞后就可以保证细胞膜上一些需镁离子的合成提高活性 2）储藏磷元素 3）、增强某些致病菌如A族链球菌对宿主细胞的黏连、避免被白细胞吞噬以及补抗体的作用 4）赋予革兰氏阳性菌以特异的表面抗原 5）可作为噬菌体的特异性吸附受体

6）调节细胞自溶素的活力，借以防止细胞自溶而死亡

2、革兰氏阴性菌：由肽聚糖和外膜组成，外膜中的脂多糖是革兰氏阴性菌所特有的 外壁层可分为3层：外层为脂多糖层，中层为磷脂层，内层为脂蛋白 革兰氏阴性菌外膜的作用：1）控制细胞透性

2）提高镁离子浓度 3）决定细胞的抗原性

4）类脂A是类毒素的主要成分

脂多糖：是位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖物质，由类脂A、核心多糖和O-特异侧链

脂多糖的功能：1）其中类脂A是革兰氏阴性菌致病物质——内毒素的物质基础 2）因其负电荷较强，有吸附镁离子、钙离子等阳离子以提高其在细胞表面的浓度作用 3)由于LPS结构多变，决定了革兰氏阴性菌细胞表面抗原决定族 4）是许多噬菌体在在细胞表面的吸附受体 5）具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能

3、革兰氏染色机制：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞膜内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故与乙醇与丙酮作脱色处理时因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其任呈紫色。反之革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层的类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出，因此，通过乙醇脱色后细胞退成无色。这时，再经沙黄等红色染料进行复染，就使革兰氏阴性菌呈现红色，而革兰氏阳性则保留紫色。

二、芽孢

芽孢：某些细胞在生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体

芽孢的特点：1）芽孢内新陈代谢几乎停止，处于休眠状态，但保持潜在萌发力

2）芽孢不具生殖能力，仅只是一种休眠体 3）抗逆性最强的生命体之一，有抗热、抗化学药物、抗辐射和抗静水压能力 4）含水量低，壁厚而致密，通透性差，不易着色，折光性强

5）一个孢子萌发只产生一个营养状态的细胞 芽孢的耐热机制：芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差和皮层的离子强度很高，从而是皮层产生极高的渗透压去夺取芽孢核心中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀，而核心部分的细胞质却变得高度失水，因此，导致核心具极强的耐热性。第四章微生物的营养要求

一、营养物质：能够满足微生物机体生长、繁殖和完成各种生理条件所需的物质 营养：微生物获得U和利用营养物质的过程

二、1、碳源：是在微生物生长过程中为微生物提供碳素来源的物质。为微生物提供碳元素与能量

2、氮源：为微生物提供氮元素来源，只有少数自养微生物能利用铵盐、硝酸盐同时作为氮源与能源（是构成细胞中核酸和蛋白质的重要元素）氮源的类型：无机氮、有机氮、气体氮

3、无机盐：作用：作为酶活性中心的组成部分、维持生物大分子和细胞结构的稳定性、调节并维持细胞的渗透压、控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质。

4、生长因子：通常是指那些微生物生长所必需的的且需量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物

5、水：生理功能：1)起到溶剂与运输介质的作用

2）参与细胞内一系列的化学反应

3）维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象

4）是良好的导热体，调节细胞温度 微生物的营养类型分类（P84表格）

三、1、培养基的配制原则：1）目标明确

2）营养协调

3）物理化学条件适宜

4）原料来源的选择

2、C多有助于次生物质分泌，N多有助于个体生长发育

3、PH：细菌：7.0~8.0

酵母菌：4.0~6.0

放线菌：8.0~9.0

霉菌：4.0~5.8

4、维持培养基PH的方法：1）加缓冲剂一氢和二氢磷酸盐的混合物

2）备用碱：CaCO3、CaHCO3 3）弱酸盐：柠檬酸盐、乳酸盐

4）液氨或盐酸

5、原料来源：1）经济节约原则：以粗代精、以废代好、以简代繁

2）原料来源要广泛

3）原料药易处理、处理成本要低

4）原料处理后废物、废液、废气要少

6、选择和配制培养基的方法四种：生态模拟、查阅文献、精心设计、实验比较

四、培养基的分类

1、按成分不同划分：天然培养基：优点为取材方便，营养丰富，种了多样，配制方便合成培养基：优点：组分精确，重复性好确定：较昂贵，一般用于研究

2、根据物料状态划分：固体培养基：一般用于进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏半固体培养基：用于观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定液体培养基：用于大量培养微生物，研究生理代谢

3、按用途划分：基础培养基：用于培养野生型微生物和原养型微生物 加富培养基（营养培养基）：在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基作用一般为分离某种微生物而专门设计或培养营养要求严谨的异样微生物 鉴别培养基：在培养可中加入某种特殊化学物质 选择培养基：根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需要微生物的生长，有利于所需微生物的生长 第五章、微生物代谢

微生物发酵过程的三个阶段：脱氢（电子）、递氢（或电子）和受氢（或电子）发酵：是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某些中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物

代谢：生命存在的基本特征，是微生物体内所进行的全部生化反应的总称。主要由分解代谢和合成代谢两个过程组成。分解代谢：是指将大分子物质降解成小分子物质，并在这个过程中产生能量（都是氧化反应）合成代谢：是指细胞利用简单的小分子物质合成复杂大分子，在这个过程要消耗能量（都是还原反应）

代谢途径都是有一系列连续的酶促反应构成的

P102~P105EMP HM ED途径的特点功能以及途径路线

根据氧化还原反应电子受体的不同可将发酵和呼吸分为有氧和无氧呼吸两种 P108 TCA途径图

TCA循环特点：1）氧虽然不直接参与其中反应，但必需在有氧条件下运行

2）每个丙酮酸产生15个ATP 3）位于一切分解代谢与合成代谢的枢纽地位，可为生物合成提供各种碳价原料

TCA的生理意义：1）为细胞提供能量

2）各种能源物质彻底氧化的共同代谢途径（对于微生物来说）3）物质转化枢纽

无氧呼吸：电子受体不是氧气而是外源无机物与部分简单小分子有机物

发酵作用：没有外源电子受体，底物具有的能量只释放一小部分，合成少量ATP 三种磷酸化：底物水平磷酸化，高能磷酸化，氧化磷酸化

光合磷酸化的特点：1）光驱使下电子自菌绿素上逐出后经类似呼吸链又回到菌绿素

2）产还原力[H]和产ATP分别进行，还原力来自于H2O等无机物

3）不产生氧气 合成代谢：微生物利用能量代谢所产生的能量、中间代谢产物以及从外界吸收的小分子合成复杂细胞物质的过程

P118~P119 CO2固定路线图

蓝细菌孤单的抗氧化保护机制：1）分化出特殊的还原性异形胞

2）非异形胞蓝细菌固氮酶的保护将固氮与光合进行时间上分隔

微生物固氮反应6要素：1）ATP的供应

2)还原力[H]及传递氢载体

3）固氮酶

4）还原底物——氮气

5）镁离子

6）严格厌氧微环境

联合固氮菌：指必需生活在植物根茎叶，动物肠道等处才能进行固氮的微生物，不形成类似根瘤的共生结构 微生物的代谢调节主要有两种类型：一是酶活性的调节，即调节已经存在的酶分子的活性，是酶在化学水平的变化。另一类是酶合成的调节，即调节酶分子的合成量，是遗传水平发生的变化 第六章

一、生长曲线延滞期

特点：1）生长速率常数为零，细胞数目不增加或增加很小

2）细胞形态变大或 增长许多杆菌可长成丝状

3）合成代谢十分活跃，核糖体、酶类和ATP 的合成加速产生各种诱导酶

4）对外界不良条件如NaCl溶液，温度和抗 生素等理化因素反应敏感

出现原因：1）微生物接种到一个新的环境，暂缺乏足够的能量和必需的生长因子

2）“种子”老化即处于未对数期或种子未活化

3）接种时损伤

影响其长短的因素与实践意义：1）接种龄：对数期种子延滞期短，延滞期或衰亡期的种子延滞期较长

2）接种量：接种量大，延滞期较短，接种量小，延滞期较长

3）培养基成分：培养基成分丰富的延滞期较短，培养基成分与种子培养基一致的延滞期较短

二、生长曲线指数期

特点：1）生长速率最快，细胞呈指数增长

2）生长速率恒定

3）代谢旺盛，细胞组分平衡发展

4）群体的生理特性一致

影响指数期的意义：1）菌种：不同菌种代时差异极大

2）营养成分：营养越丰富代时越短

3）营养物浓度：影响微生物的生长速率和生长总量

4）培养温度：影响微生物的生长速率和生长总量

指数期的实践意义：1）是代谢、生理研究的良好材料

2)是增殖噬菌体的最适宿主菌龄

4）革兰氏染色是采用此期微生物

生长曲线稳定期特点：1）活细胞总数维持不变即新增殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，菌体总数达到最高点

2）细胞生长速率为零

3）细胞生理上处于衰老，代谢活力钝化，细胞成分合成缓慢，革兰氏染色发生变化

三、生长曲线衰亡期

特点：细胞以指数速率死亡，有时细胞速率的降低是由于抗性细胞的积累，细胞变形退化，有的发生自溶，革兰氏染色发生变化

影响衰亡期的因素及实践意义：1）与菌种的遗传特性有关：有些细菌的培养经历所有的各个生长时期，几天以后死亡，有细菌培养基个月乃至几年以后任然有一些货细胞

2）与是否产芽孢有关：产芽孢的细菌更易幸存下来

3）与营养物质和有毒物质有关：补充营养和能源，以及中和环境毒性，可以减缓死亡细胞的死亡速率，延长细菌培养物的存货时间

四、分批培养：是指将微生物置于一定容积的的培养基中，经过生长培养，最后一次收获培养方式 连续培养：在一个恒定容积的的流动系统中培养微生物，一方面以一定速率加入新的培养基，另一方面又以相同的速率流出培养物（菌体和代谢产物）

连续发酵的优点：1）高效

2）产品质量较稳定

3）节约了大量动力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、电的负荷均衡合理

连续发酵的缺点：1）菌种易退化

2）易污染杂菌 3）营养物质的利用率一般 同步生长：就是指在培养物中所有微生物细胞都同一生长阶段，并都能同时分裂的生长方式 同步培养法包括诱导法与选择法

诱导法：是采用物理、化学一男子使微生物生长到某一阶段而停下来，使所有细菌都达到这个阶段时再使其生长 恒浊器：根据培养器内微生物的生长密度并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高，生长速度恒定的微生物细胞的连续培养

恒化器：与恒浊器相反，是一种设法使培养液流速保持不变 最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置 装置

控制对象

培养基

培养基流速

生长速率

产物

应用范围

恒浊器

菌体密度(内控制)

无限制生长因子

不恒定

最高速率

大量菌体或与菌体平行的代谢产物

生产为主

恒化器

培养基流速（外控制）

有限制生长因子

恒定

低于最高速率

不同生长速率的菌体、并使微生物始终在低于其

实验室为主

五、防腐：是在某些化学物质或物理因子作用下防止或抑制微生物生长的一种措施，它能防止食物腐败或防止其他物质霉变 消毒：利用某种杀死或灭活物质或物体中所有微生物的一种措施，它可以起到防止感染或传播的作用

灭菌：利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施 第七章

1、病毒的特点:1)形态及其微小，一般能通过细菌滤器必须自电镜下才能观察

2）没有细胞构造，主要成分仅为核酸与蛋白质

3）每一种病毒致含有一种核酸

DNA和RNA 4）依靠自身的核酸进行复制，一病毒的核酸和蛋白质等原件实现装配，实现繁殖

5）严格细胞内寄生，缺乏完整的酶和产能系统，只能利用宿主细胞的现成的代谢系统合成病毒自身的核酸和蛋白质

6）在离体条件下，能以无生命力的大分子状态存在，并可长期保持器侵染力

7）对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感

8）有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去

2、病毒与活细胞的区别：1）结构简单，没有细胞结构

2）几乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一种类型的核酸

3）在细胞外不能增殖

3、得到一步生长曲线的实验：二院培养系统：1）低浓度病毒宿主细胞(给几分钟时间侵染)2）高倍稀释病毒与细胞的培养物

3）保湿培养

4）不同时间取样，涂布平板，得到效价

5）以时间为横坐标，病毒浓度为纵坐标绘图

4、烈性噬菌体：感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌体（温和性细菌）：感染后大多数可整合到宿主基因中少数以染色体外独立存在

5、病毒分为真病毒和亚病毒，亚病毒又分为类病毒、卫星病毒、卫星RNA、朊病毒 类病毒：是一种只包含RNA的病毒，只在植物中出现，分质量极小，不能编码蛋白质 卫星病毒：寄生于与之无关的辅助病毒的基因产物的病毒 卫星RNA：是指必需依赖一些辅助病毒进行复制的小分子单链RNA，他们被包藏在辅助病毒的壳体中

朊病毒：是一类能引起哺乳动物亚急性海绵样脑病的病原因子 第八章

P204页Griffith转化实验等3个实验

基因组：是指位于细菌或细胞中的所有基因 大肠杆菌基因组的特点：1）遗传信息的连续性

2）功能相关的结构基因组成操纵子结构

3）结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝

4）基因组重复序列少而短

质粒：是一种独立于染色体外，能进行自主复制的细胞质遗传因子，主要存在于各种微生物中

转座子：是位于染色体或质粒上的一种能改变自身位置的DNA序列，广泛分布于原核和真核细胞中

质粒的主要类型：致育因子、抗性因子、Col质粒、毒性质粒、代谢质粒、隐秘质粒

致育因子：又称F质粒，其大小约100kb，这是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象（结合作用）有关的质粒

抗性因子：是另一类普遍而重要的质粒，主要包括抗药性和抗重金属两大类，简称R质粒 Col质粒：该质粒含有编码大肠菌素的基因，大肠菌素是一种细菌蛋白，只杀死近缘且不含Col质粒的菌株，而宿主不受其产生的细菌素的影响

毒性质粒：致病菌中携带的能引起致病性的质粒，这些质粒具有编码毒素的基因 代谢质粒：携带有能降解某些基质的酶的基因的质粒

隐秘质粒：不显示任何表型效应，它们的存在只有通过物理方法检测出来 原核生物中对的转座因子有3种类型：插入顺序（IS）、转座子（Tn）、病毒（Mu）转座的遗传学效应：插入突变、产生染色体畸变、基因的移动和重排

基因突变：一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变包括一对或几对碱基的缺失、插入或置换，而导致的遗传变化

碱基变化对遗传信息改变的四种类型：同义突变，错义突变，无义突变，移码突变 同义突变：是指某个碱基的变化没有改变产物氨基酸序列的密码子变化

错义突变：是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸的改变（可能为致死突变）无义突变：是指某个碱基的改变，使代表某种氨基酸的密码子变为蛋白质的合成的终止密码子，蛋白质的合成提前终止，产生短截的蛋白质

移码突变：由于DNA序列中发生1~2个核苷酸的缺失或插入，使翻译的阅读框发生改变，从而导致改变位置以后的氨基酸序列的完全变化（一般为致死突变）

表型变化的突变型：营养缺陷型，抗药性突变型，条件致死突变型，形态突变型 营养缺陷型：缺乏合成其生存所必需的营养物的突变型，只有从周围环境或培养基中获得这些营养或前体物才能生长 影印平板P218 抗药性突变型：是由于基因突变使菌株对某种或某几种药物，特别是抗生素产生抗性的一种突变型

条件致死突变型：是指在某一条件下具有致死效应，而在另一条件下没有致死效应的突变型 形态突变型：是指造成形态改变的突变型（包括菌落形态、颜色一件噬菌斑形态）

自发突变的缘由：1）NDA复制过程产生的错误

2）碱基互变异构体的相互转变

3）转座子的随机插入基因

自发突变的特性：1）非对应性

2）稀有性

3）规律性

4）独立性

5）遗传和回复

6）可诱变性

诱发突变：碱基类似物、插入染料、直接与DNA其化学反应的诱变剂、辐射和热、生物诱变因子

DNA损伤修复：光复活作用、切除修复、重组修复、SOS修复 光复活：由phr基因编码的光解酶进行

切除修复：又称暗修复，该修复系统除了碱基错误配对和单核苷酸插入不能修复外，几乎其他DNA损伤均可修复，是细胞内主要修复系统

重组修复：是一种越过损伤而进行的修复，这种修复不将损伤碱基除去

SOS修复：是DNA分子受到较大范围的重大损伤时诱导产生的一种应急反应 P226~227 高频重组菌等

转导：是由病毒介导的细胞间进行遗传交换的一种方式

供体DNA进入受体的命运：1）发生稳定的转导子

2）流产转导：即不被降解，又不被整合，也不被复制

3）外源DNA被降解，转导失败

遗传转化：是指同源或异源的游离DNA分子被自然或人工感受态细胞摄取，并得到表达的水平方向的基因转移过程

4个影响供体DNA与受体细胞间的最初相互作用：1）转化片段的大小

2）形态：双链DNA 3）浓度：在在临界值出现之前成正比

4）生理状态：感受器——刚停止DNA合成 微生物育种：诱变育种、代谢育种、体内基因组育种 代谢育种：改变代谢途径、扩展代谢途径、构建新的代谢途径 体内基因组育种：原生质体融合，杂交育种

融合子的判别：1）亲本遗传标记的互补的2）亲本灭活后性状的恢复

3）具有双亲本的荧光标记 第九章

顺式作用元件：位于基因的旁侧，可以调控影响基因表达的核酸序列。其本身并不编码蛋白质

反式作用因子：通常为蛋白质或RNA，其特征是可以合成并扩散到目标场所发挥作用 正调控：控制因子通过与启动子原件结合来激活基因的表达 负调控：抑制物与操纵基因结合起来阻止基因表达 P248 操纵子的结构

P249图

P250 图

启动子：是RNA聚合酶和CAP的结合位点，控制着转录的起始，一个启动子可以启动多个基因的表达

操纵基因：DNA上的一个结合位点，阻抑物能与之结合抑制相邻启动子的起始转录，操纵基因不表达任何东西 终止子：控制转录结束

转录因子：转录起始过程中RNA聚合酶所需要的辅助因子

转录水平的调控:1）DNA的结构

2）RNA聚合酶的功能

3）蛋白质因子及其他小分子配基的相互作用

第四篇：微生物重点总结

微生物重点总结

一．名词解释

（1）益生菌（probiotics）:某些细菌或真菌有利于宿主胃肠道微生物区系的平衡，能抑制对宿主有害的微生物的生长。

（2）无特定病原体动物（SPF）：是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原微生物的动物。

（3）灭菌（sterilization）:杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽孢、霉菌孢子在内的全部微生物和非病原微生物。

（4）消毒（disinfection）:杀灭病原微生物的方法，仅要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。

（5）消毒剂（disinfectant）:用于杀灭病原微生物的化学药品。（6）半数致死量（LD50）：是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量。

（7）半数感染量（ID50）：某些病原微生物只能感染实验动物、鸡胚或细胞，但不引致死亡，可用ID50来表示其毒力。

（8）毒力因子（virulence factor）:构成细菌毒力的物质称为毒力因子，主要有侵袭力和毒素。

（9）机会致病菌（oppotunistic pathogene）:是指某些细菌通常并不主动入侵宿主，但当宿主的免疫屏障被打开或免疫功能异常时，这类细菌就会进入机体的血液或组织，造成感染并治病。

（10）质粒（plasmid）:是细菌染色体外的遗传物质，多为环状双螺旋DNA分子。质粒可以自身复制，随宿主菌分裂传到子代菌体。（11）毒力岛（pathogenicity island）:PAI是指病原菌的某个或某些毒力基因群，分子结构和功能有别于细菌基因组，但位于细菌基因组之内，因此称之为“岛”。

（12）转化（transformation）:供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得新的遗传性状的过程称为转化。

（13）转导（transduction）:以温和噬菌体为媒介，把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中，通过交换与整合，使受体菌获得供体菌的部分遗传性状称为转导。

（14）微生物：（micro live）：是一类肉眼看不见，有一定形态结构，能在适宜环境中生长繁殖的细小生物的总称。

（15）菌落（colony）：细菌在适合生长的固体培养基或内部生长，形成一个肉眼可见的，有一定形态的独立群体称为菌落。

（16）培养基（culture medium）：是人工配制的基质，含有细菌生长繁殖必须的营养物质。

（17）虑过除菌（sterilization by filtration）：是通过机械、物理组留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、支原体以及细菌L型等颗粒。

（18）感染（infection）：是指病原微生物在宿主内持续存在或增殖。（19）接合（conjugation）：是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触，由供体菌将质粒DNA转移给受体细菌的过程。

（20）侵袭力（invasiveness）:病原菌在机体内定殖，突破机体的防御屏障，内化作用，繁殖和扩散，这种能力称为侵袭力。二 填空题

（1）1683年荷兰人吕文虎克用自制的放大200倍的显微镜首次观察到微生物。

（2）八大类微生物：细菌 真菌 放线菌 支原体 螺旋体 立克次氏体 衣原体 病毒。

（3）巴斯德用曲颈瓶实验证明了自然发生论是谬论。

（4）细菌的大小以生长在适宜的温度和培养基的幼龄对数期培养物为标准。

（5）细菌的基本形态分为球状 杆状 螺旋状。（6）细菌的繁殖方式都是简单的裂殖。

（7）磷壁酸是革兰氏阳性菌特有的成分，肽聚糖是细胞壁所特有的物质。

（8）细菌的特殊结构有：荚膜 S层 鞭毛 菌毛 芽孢等

（9）细菌菌体的形成是一个复杂的过程，涉及物质摄取

生物合成 聚合作用

组装4个步骤。

（10）热力灭菌法分为干热灭菌法和湿热灭菌法两大类。

（11）在干热的情况下，由于热空气的穿透力低，需要160摄氏度维持2小时，才能达到杀死所有微生物及其芽孢 孢子的目的。（12）最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，于121·3摄氏度维持15-20分钟可杀死包括芽孢之内的所有微生物。

（13）遗传变异一般包括基因突变和基因转移两个方面，基因突变一般包括点突变和染色体畸变。染色体畸变是指染色体的一大段发生了变化，包括染色体结构上的缺失 重复 插入 易位和倒置。（14）2005我国曾有猪链球菌2型大范围感染人和猪的报到。（15）大肠杆菌抗原主要有O K H 三种。（16）粘附素包括菌毛 外模蛋白

紧密素等

（17）病毒的核酸分为两大类，DNA 和RNA,二者不同时出现，把MRNA的碱基序列作为标准，凡与此相同的核酸称为正链，与其互补的称为负链。

（18）真菌从形态上分为酵母菌 霉菌及担子菌三大类。

（19）支原体是一类无细胞壁的细菌，具多形性，可通过细菌滤器。（20）能形成芽孢的杆菌有：

三

简答题 革兰氏染色的步骤有哪些？

2细菌的生长曲线如何确定？有何意义？ 3大肠杆菌与沙门氏杆菌的生长特性有何区别？ 4细菌芽孢有何作用？

5确定某种细菌是否致病性的依据主要有哪些？

6近年来随着分子生物学的发展，基因水平的科赫法则取得了那几点共识？

7内毒素与外毒素的生长特性有哪些区别？ 8鸡霍乱与鸡新城疫的区别有哪些？ 9溶血分为哪几种？主要特点有哪些？ 10如何鉴别支原体菌落 细菌菌落及细菌L型菌落？ 11抗原性漂移与抗原性转移有何显著特点？ 12病毒的一般特征？

第五篇：微生物大题总结

球菌

1,何谓SPA？简述其作用。

答: 葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)：90％以上金黄色葡萄球菌细胞壁表面的蛋白质；

可与人及多种哺乳动物的IgG分子的Fc段非特异性结合，结合后的IgG分子Fab段仍能与抗原特异结合。

体内作用： SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。

体外作用： 协同凝集试验，广泛应用于多种微生物抗原检测。

2，金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起化脓性炎症的特点有何不同，为什么? 答：金黄色葡萄球菌临床特点：脓汁黄而黏稠、病灶界限清晰、感染局限化。乙型链球菌临床特点：脓液稀薄、病灶界限不清、易扩散。

原因：金黄色葡萄球菌含有凝固酶，可以抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏;感染局限化和形成血栓。

而乙型链球菌含有侵袭性酶，均是扩散因子，包括：（1）透明质酸酶：分解间质内透明质酸，利于病菌扩散。

（2）链激酶（SK）：溶解纤维蛋白、阻止血浆凝固，利于病菌扩散。（3）链道酶（SD）：降解脓液中DNA，使脓液稀薄，促进病菌扩散。

3.对脑膜炎奈氏菌应如何进行分离培养（为何需要床边接种）

答：营养要求较高，常用巧克力（色）培养基，专性需氧。对理化因素抵抗力很弱。4.根据涂片染色镜检可作出微生物学初步诊断的病原性球菌有哪些? 4.金黄色葡萄球菌的致病物质和所致疾病？ 答：(1)凝固酶：抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏,感染局限化和形成血栓。(2)葡萄球菌溶素。损伤细胞膜的毒素(3)杀白细胞素攻击中性粒细胞和巨噬细胞,抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力(4)肠毒素引起急性肠胃炎（食物中毒）(5)表皮剥脱毒素引起金黄色烫伤样皮肤综合征,又称剥脱性皮炎(6)毒性休克综合征毒素-1引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征 肠道杆菌

5.引起胃肠炎的大肠埃希菌有哪几种？简述ETEC的致病机制.答: 肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）;肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC);肠致病型大肠埃希菌（EPEC）;肠出血型大肠埃希菌（EHEC）;肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）

ETEC致病机制：不耐热肠毒素(LT)

耐热肠毒素(ST)

激活腺苷酸环化酶

激活鸟苷酸环化酶

cAMP浓度升高

cGMP浓度升高

过度分泌小肠液

腹泻

6.大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？ 以化脓性感染和泌尿道感染最为常见

（1）化脓性感染：腹膜炎、手术创口感染、败血症（死亡 率高）、新生儿脑膜炎

（2）泌尿道感染：尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎常见上行性感染，女性患病率高于男性，由尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）引起 3.归纳志贺菌致病的主要特点。

答：包括侵袭力和内毒素，有的菌株（痢疾志贺菌）产生外毒素（志贺毒素）(1).致病物质 侵袭力--黏附于回肠末端和结肠的黏膜上皮细胞，通过Ⅲ型分泌系统导致细菌内吞，继而进入上皮细胞内生长繁殖。然后侵入相邻细胞，细菌扩散。

特征：肠壁完整性破坏，形成溃疡面(2).内毒素

使肠壁通透性增高, 促进内毒素吸收，引起发热、甚至中毒性休克等一系列症状。破坏肠粘膜,形成炎症、里急后重等症状。

(3).外毒素： 志贺毒素，具细胞溃疡,呈现典型的脓血黏液便。作用于肠壁神经系统, 直肠括约肌痉挛, 发生腹痛、里毒性 作用后果: 上皮细胞损伤；溶血性尿毒综合症(HUS）

感染几乎只局限于肠道，一般不侵入血液。类型: 急性细菌性痢疾；慢性细菌性痢疾：病程在两个月以上。

急性细菌性痢疾：突然发病，发热、腹痛、脓血粘液便，伴有里急后重等症状。若治疗不彻底, 可转为慢性。

急性中毒性菌痢：以小儿为多见, 无明显的消化道症状, 主要表现为全身性中毒症状，死亡率高。

内毒素致使微血管缺血和缺氧, 重要器官功能衰竭。临床主要以高热、休克、中毒性脑病为表现。

弧菌

9.霍乱弧菌的主要致病物质是什么？简述其作用机理。

答（1）.霍乱肠毒素：

A亚单位：使腺苷酸环化酶活性增高，使细胞内cAMP水平升高，主动分泌Na+、K+、HCO3－和水，导致严重的米泔水样腹泻与呕吐。B亚单位：与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞。

（2.）鞭毛、菌毛

鞭毛运动有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近肠壁上皮细胞。普通菌毛是细菌定居于小肠所必须的因子

2.霍乱是如何传播的？如何快速做出病原学诊断？ 答：霍乱：烈性肠道传染病, 传播途径：粪-口途径，通过污染的水源或食物

临床表现：剧烈的腹泻和呕吐（米泔水样腹泻），大量水分和电解质丧失，引起低容量性休克和肾衰竭。分支杆菌

10,试述结核杆菌的染色、培养、致病物质及感染特点。答：（1）齐-尼抗酸性染色，呈红色；（2）.培养特性：专性需氧菌

营养要求高：在含有蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬酰胺等的固体培养基上才能生长。

生长缓慢：3～4周可见菌落。乳白色或黄色，不透明，表面粗糙常呈颗粒、结节状，形似菜花样。在液体培养基中呈菌膜生长。

(3),无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌体成分，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量愈高结核分枝杆菌的毒力愈强。脂质：主要是磷脂、脂肪酸和蜡质D

①磷脂：刺激单核细胞增生，形成结核结节；

抑制蛋白酶的水解作用，病灶组织溶解不完全，形成干酪样坏死。

②脂肪酸：与分枝杆菌抗酸性有关。其中6,6-双分枝菌酸海藻糖(索状因子)，破坏细胞线粒体膜、影响细胞呼吸，抑制中性粒细胞游走和吞噬，引起慢性肉芽肿。③蜡质D:与结核菌素结合，引起迟发型超敏反应，具有佐剂作用。

④硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖： 抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合，使结核分枝杆菌在细胞内存活。

蛋白质:结核菌素（tuberculin）与蜡质D结合，引起较强的迟发型超敏反应。核酸:核糖体RNA(rRNA)是本菌的免疫原之一，刺激机体产生特异性细胞免疫。(一)肺部感染

1.原发感染：首次感染结核分枝杆菌，多见于儿童。外源性感染,少数免疫力低下者，经淋巴、血流扩散至全身，导致全身粟粒性结核或结核性脑膜炎。

2.原发后感染：多见于成年人。大多内源性感染，少数为外源性感染所致。

由于机体已形成对结核杆菌的特异性细胞免疫，对再次侵入的结核菌有较强的局限能力，故原发后感染的特点是病灶局限，主要表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节，发生纤维化或干酪样坏死。病变常发生在肺尖部位。

（二）肺外感染

艾滋病等免疫力极度低下者，可造成全身播散性结核。

11.何谓结核菌素试验？解释其原理与应用。

答：将一定量结核菌素注入皮内，如受试者曾感染结核杆菌，则在注射部位出现迟发型超敏反应炎症，判为阳性，未感染者则为阴性。

结核菌素试剂：旧结核菌素（OT）纯蛋白衍生物（PPD）方法：PPD5个单位，前臂皮内注射，48～72h后红肿、硬结

实验结果分析（1）阳性--注射部位硬结、红肿直径5-15mm之间。

表明机体已感染过结核或BCG接种成功，对结核分枝杆菌有迟发型超敏反应，说明有特异性免疫力；（2）强阳性--硬结直径超过15mm以上；表明可能有活动性结核病，应进一步检查；（3）阴性--注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于5mm。说明未感染结核分枝杆菌或未接种BCG，细胞免疫功能低下者，或者于原发感染的早期。应用：a作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的诊断b测定卡介苗接种后的免疫效果。c在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感率d测定肿瘤患者的细胞免疫功能 放线菌 14．试述致病性放线菌的感染及致病特点。

答：放线菌为人体正常菌群。当机体抵抗力下降，口腔卫生不良、拔牙或口腔黏膜受损时，可致内源性感染，引起放线菌病。放线菌病是软组织的化脓性炎症，若无继发感染多呈慢性无痛性过程，常伴有多发性瘘管形成，脓汁中可找到特征性的硫磺样颗粒，可引起不同器官和组织感染。放线菌与龋齿和牙周炎有关 3.试述放线菌感染的实验室诊断方法。

答：在脓液、痰液和组织切片中寻找硫磺样颗粒将可疑颗粒制成压片，在镜下观察特征性的放射状排列的 菊花状菌丝。

综合：

1． 简述机体抗细菌感染的特点？ 答：分为天然免疫和获得性免疫。

天然免疫：包括屏障结构及其分泌物,体液因素和吞噬细胞等。获得性免疫：

（一）抗胞外菌感染

胞外菌：人类的多数致病菌属胞外菌，如葡萄球菌、链球菌等。抗胞外菌感染免疫的特点是以体液免疫为主 主要目的是---杀灭细菌，中和毒素

(1).吞噬细胞的作用(2).抗体和补体的调节作用(3).细胞免疫的作用

(二)抗胞内菌感染

少数致病菌主要寄生于细胞内，称为胞内菌（intracelllular bacteria）兼性胞内菌（facultative intracelllular bacteria）: 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、伤寒沙门菌、布鲁菌、肺炎军团菌和李斯特菌等。专性胞内菌（obligate intracelllular bacteria）: 只能在细胞内生存, 如立克次体和衣原体。

抗胞内菌感染的主要目的是: 杀灭细胞内细菌

主要是以Th1细胞和 CTL 细胞为主的细胞免疫。(1).吞噬细胞作用：单核巨噬细胞(2).细胞免疫作用： Th1 和 CTL(3).局部黏膜免疫：

sIg A

2，医院感染的基本特点？从医学微生物学角度，怎样预防和控制医院感染？

医院感染中的微生物特点(1).主要为条件致病性微生物(2).常具有耐药性(3).常发生种类的变迁(4).适应性强

医院感染的预防和控制(1).消毒与灭菌(2).隔离预防(3).合理使用抗生素 **3.细菌的致病机制？

答：可能是答侵袭力+内外毒素，侵袭力包括粘附素，荚膜，侵袭性物质和生物被膜。**4，内毒素外毒素的主要区别？

答：1.外毒素：主要由G＋和少数G－菌合成及分泌。主要特点： 蛋白质，绝大多数不耐热； 毒性强，对组织器官有高度的选择作用； 抗原性强，可刺激机体产生抗毒素；可脱毒为类毒素； 为A-B型分子结构，A亚单位（为毒性部位），B亚单位(介导A单位进入)2.内毒素（endotoxin）：G－菌细胞壁脂多糖（LPS）组成：O特异多糖，非特异核心多糖，脂质A，主要特点：毒性较弱。耐热，160 C

2-4 h才被破坏。抗原性弱，不能脱毒为类毒素。引起的毒性作用大致相同： 发热反应； 白细胞反应； 内毒素血症与内毒素休克

**5，细菌耐药性的遗传机制 答：分为固有耐药性和获得耐药性。(一)固有耐药：指细菌对某些抗菌药物的天然不敏感。如 肠道杆菌对青霉素的耐药。

（二）获得耐药

指细菌DNA的改变导致其获得耐药性表型。耐药菌的耐药基因来源于基因突变或获得新基因,作用方式为 接合、转导或转化。

获得耐药性基因突变类型

1)染色体突变：自发的随机突变，频率很低。2)可传递的耐药性：

① R质粒介导的耐药性：可携带数种耐药基因，通过接合、转化在不同细菌间转移。在临床上占有重要的地位。②转座子（Tn）介导的耐药性：可在染色体中跳跃，实现菌间基因转移或交换。③整合子（integron）与多重耐药：同一类整合子可携带不同的耐药基因盒，介导多重耐药。呼吸道病毒

1.流感病毒生物学性状，微生物学检查法？

答：生物学形状包括(1)形态与结构(2)复制周期(3)分型与变异(4)培养特征(5)抵抗力 球形或者椭圆形，80～120nm，有包膜，包膜上有放射状突起糖蛋白，主要是血凝素和神经氨酸酶分子

主要抗原结构：* 核糖核蛋白，血凝素，神经氨酸酶

* HA的主要功能：凝聚红细胞，吸附宿主细胞，主要中和抗原* HA抗原结构易发生变异* NA能水解细胞表面的神经氨酸分子，是弱中和抗原*NA功能 ：参与病毒释放，促进病毒扩散

2.病毒在组织细胞中增殖的指标是什么？

答：(1)细胞病变效应（cytopathic effect, CPE）①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）； ②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；

③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。

(2)红细胞吸附

病毒囊膜表面血凝素(HA)＋红细胞表面HA受体(3)干扰现象

(4)细胞代谢改变:细胞代谢变慢,pH变化减慢

3急性病毒性胃肠炎可由那些病毒引起？临床上有何特点？.答：大多数的急性胃肠炎由病毒引起。

主要包括：*轮状病毒*杯状病毒*肠道腺病毒*星状病毒

轮状病毒：引起6个月～2岁婴幼儿严重胃肠炎，常称为秋季腹泻。

临床表现：*突然发病*发热、水样腹泻、伴呕吐 *一般为自限性*重者脱水和酸中毒，导致婴儿死亡

1.试述流行性乙型脑炎病毒的致病机制及防治措施

答：过程：病毒先在皮肤毛细血管内皮细胞和局部淋巴结增殖，然后进入血流，引起第一次病毒血症； 病毒随血流播散到肝、脾等处的单核巨噬细胞中大量增殖，再次入血，引起第二次病毒血症； 病毒突破血脑屏障侵犯中枢神经系统，在脑组织神经细胞内增殖，引起脑实质和脑膜炎症

机制：血－脑屏障通透性增加：病毒诱导单核巨噬细胞分泌某些细胞因子，使血-脑屏障通透性增加，易于侵入中枢神经系统 ；细胞因子释放增加：病毒感染刺激免疫细胞释放TNF-α、IL、IFN等炎症细胞因子，引起炎症反应和细胞损伤； 免疫复合物介导的免疫损伤

**4.HIV的传染源、传播途径及致病机制？ 答: 传染源：HIV感染者和AIDS患者

* 主要的传播途径：

(1).性传播：是HIV的主要传播方式，性活跃人群（包含同性恋和异性恋者）是高危人群。(2).血液传播：输血、血制品、器官移植、注射等方式传播，静脉毒品成瘾者是高危人群。(3).母婴传播：通过胎盘、产道或哺乳等方式传播，其中胎儿经胎盘感染最多见。

致病机制：（1）主要感染细胞：CD4＋ T淋巴细胞、单核-巨噬细胞、树突状细胞、神经细胞等。引起机体免疫系统的进行性损伤。HIV借助于gp120与上述细胞受体结合，gp41融合肽暴露，介导膜融合，使病毒侵入细胞。受感染的CD4 T细胞被溶解破坏，T细胞数量的进行性减少和功能丧失，导致免疫功能缺陷。

HIV损伤CD4 T细胞的机制：①导致CD4 T细胞融合，最终导致细胞的溶解；

②CTL对CD4 T细胞的直接杀伤作用，抗体介导的ADCC作用，NK细胞的杀伤作用； ③诱导CD4 T细胞细胞凋亡；④HIV复制产生大量未整合的病毒DNA，抑制细胞正常的生物合成；⑤HIV可作为超抗原激活大量CD4 T细胞。

**6.IFN是什么，其抗病毒的特点？

答：干扰素是由病毒或其他干扰素诱生剂诱使人或动物细胞产生的一类糖蛋白，作用于机体细胞，可表现出抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等多方面的生物活性。干扰素抑制病毒蛋白翻译的两种途径示意图（下页）

**7，试述血清中能查出的乙肝的相关成分有哪些？其意义何在？

答：HBsAg ： HBV感染的重要指标，感染早期出现。急性肝炎恢复后1～4个月内消失。持续6个月以上提示为慢性肝炎或HBV携带者

HBsAb：中和抗体。见于恢复期、既往感染、疫苗接种后。阳性提示机体对乙肝有免疫力

PreS1、PreS2：与HBV-DNA成正比。是病毒复制的指标

PreS1-Ab、PreS2-Ab：在恢复期的早期出现。阳性提示病毒正在或已经被清除。是预后良好的指标

HBcAg ：不易检出。阳性提示病毒颗粒存在，血液具有传染性 HBcAb-IgM：阳性提示HBV处于复制状态，具有强的传染性 HBcAb-IgG ：低滴度提示既往感染，高滴度高提示急性感染 HBeAg：阳性提示病毒在体内复制，具有传染性 HBeAb ：机体获得免疫力，病毒复制减弱，传染性降低 **7，乙肝抗原组成及意义

（1）HBsAg（表面抗原）：在血液中大量存在。诱导产生保护性抗体--抗HBs。不同亚型间有交叉免疫保护作用。诱导细胞免疫反应

（2）PreS1、PreS2：抗原性强与肝细胞表面受体结合。特异性抗体有免疫保护作用。抗PreS1持续时间长。抗PreS2持续时间短（2～3个月）

（3）HBcAg（核心抗原）：存在于病毒的核心及被感染的肝细胞表面。一般不游离于血循环中。具有很强的抗原性。抗HBc没有免疫保护作用。抗HBc-IgM是病毒复制的指标。具有T细胞表位，可刺激产生细胞免疫反应

HBeAg ：游离存在于血中。与病毒的复制成正比。是病毒复制的指标之一。抗HBe具有免疫保护作用。Pre-C区突变。免疫逃逸

**8 何为prion？可传导人和动物的哪些疾病？

答：朊粒（prion）：正常宿主细胞基因编码的、构象异常的朊蛋白（无核酸成分）。是人和动物传染性海绵状脑病（TSE）的病原体。

传染性海绵状脑病包括：动物TSE，如：羊瘙痒病，牛海绵状脑病——疯牛病。人类TSE，如：库鲁病。克－雅病变种。**9，病毒感染的致病机制？

答：

（一）对宿主细胞的致病作用：杀细胞效应，稳定状态感染，包涵体形成，细胞凋亡，基因整合与细胞转化

细胞病变作用(CPE)：病毒大量复制过程中可损伤细胞核、细胞膜、内质网、线粒体，导致细胞裂解死亡。在体外实验中，通过细胞培养和接种杀细胞性病毒后，可用显微镜观察到细胞变圆、坏死，从瓶壁脱落等现象。

包涵体的形成：某些受病毒感染的细胞内，用普通光镜可看到与正常细胞结构和着色不同的圆形或椭圆形斑块，称为包涵体(inclusion body)。有的位于胞质内(痘病毒)，有的位于胞核中(疱疹病毒)；或两者都有(麻疹病毒)；有嗜酸性的或嗜碱性的，因病毒种类而异。基因整合与细胞转化: 某些DNA病毒和逆转录病毒在感染中可将基因整合于宿主细胞基因组中，导致细胞转化，增殖变快，失去细胞间接触抑制，细胞转化也可由病毒蛋白诱导发生。基因整合或其他机制引起的细胞转化与肿瘤形成密切相关。

二）病毒感染的免疫病理作用：抗体介导的免疫病理作用，细胞介导的免疫病理作用，致炎性细胞因子的病理作用，免疫抑制作用

三）病毒的免疫逃逸机制：病毒的免疫逃逸是反映病毒毒力的另一重要因素。病毒通过逃避免疫监视、防止免疫激活或阻止免疫反应发生等方式来逃脱免疫应答。有些病毒通过编码特异性抑制免疫反应蛋白质实现免疫逃逸。有些病毒形成合胞体让病毒在细胞间传播逃避抗体作用。

10，比较PrPC与PrPSC 的主要区别。

答：正常情况下，细胞PrP基因编码产生细胞朊蛋白（cellular prion protein, PrPC），PrPC以α螺旋为主，对蛋白酶K敏感，无致病性。某些条件下，PrPC构型发生异常变化（以 β折叠为主）形成致病的PrPSc（羊瘙痒病朊蛋白，scrapie prion protein），对蛋白酶K有抗性，具有致病性与传染性。

PrPC与PrPSc的主要区别

11，肠道病毒的共同特征？

答：小RNA病毒（24~30 nm），单股正链RNA（感染性核酸），衣壳二十面体对称。多能在易感细胞中增殖，迅速产生CPE对理化因素的抵抗力较强。*主要经粪—口途径传播。*病毒在肠道中增殖，却引起多种肠道外感染性疾病；如脊髓灰质炎病毒（引起脊髓灰质炎）；柯萨奇病毒（引起无菌性脑膜炎、心肌炎等）12,dsDNA病毒的复制周期

答：复制周期依次包括：吸附。穿入。脱壳。生物合成。组装、成熟和释放。

双链DNA病毒进入宿主细胞脱壳后，首先利用宿主核内的依赖DNA的RNA聚合酶，转录出早期的mRNA，在于胞质内的核糖体翻译成早期蛋白。早期蛋白主要是合成子代DNA分子，主要包括依赖DNA的DNA聚合酶及脱氧胸腺嘧啶激酶。然后以子代DNA分子为模版，大量转录晚期mRNA，继而在胞质核糖体上翻译出病毒的结构蛋白，主要为衣壳蛋白。双链DNA分子以半保留复制形式，即亲代DNA的双链在解螺旋酶的作用下，打开成为正负两个DNA单链，在DNA聚合酶的作用下，分别合成互补的DNA，形成新的双链DNA，通过这个过程，大量合成与亲代结构完全相同的子代DNA.病毒核酸与蛋白质合成后，DNA病毒均在核内组装，出芽方式释放到细胞外。