第一篇：胎儿血细胞

目前对遗传性疾病的产前诊断有数种方法。根据采样途径或诊断方法是否构成对胎儿的影响可分为侵入性产前诊断和非侵入性产前诊断。前者包括羊膜腔穿刺术、绒毛细胞吸取术及胎儿脐血穿刺等，虽然诊断精确度较高，但易导致流产等并发症，只能在高危孕妇中实施；后者的优点是既能行产前诊断又无危险性，适用于低风险的孕妇大群体筛选，尽早发现和杜绝异常胎儿，达到优生目的。利用孕妇外周血的胎儿细胞进行产前基因诊断即是最具潜力的非侵入性产前诊断方法之一，近年来研究十分活跃，临床医师应注意这一领域的进展。

一、孕妇外周血胎儿细胞的类型

1893年已证明孕妇的肺循环中有滋养叶细胞存在，以后陆续有报道孕妇外周血中其他类型的胎儿细胞的存在。孕妇血中胎儿细胞的主要类型包括滋养叶细胞、淋巴细胞、粒细胞、单核细胞、有核红细胞(NRBC)等。直到1969年才考虑到将孕妇血中胎儿细胞作为产前遗传病诊断的材料［1］。

滋养叶细胞虽因其形态大易于鉴别，但在早孕母血中含量极少且迅速陷于肺组织中更使其在孕妇周围血含量更微，再者其所含染色体并非总是与胎儿相符，是因其多核特点及其与胎盘的嵌合现象所致，所以滋养叶细胞不是理想的产前诊断细胞。胎儿淋巴细胞用作产前诊断有相当的潜力，因其表达HLA抗原，故当父母的HLA不同时，更易分离、鉴别与富集，但当父母HLA相同时则无特异性的鉴别与分类、富集方法；但胎儿淋巴细胞产生太迟(孕中期)，失去早期诊断意义；另外胎儿淋巴细胞在孕妇血中生存期长，达数年或更长，易造成误诊(多次妊娠者)，因此胎儿淋巴细胞也不是最理想的产前诊断材料。其他的白细胞如粒细胞、单核细胞等研究得不多，特异性也不高。目前认为最合适作产前诊断的胎儿细胞类型当首推胎儿有核红细胞，理由是：(1)胎儿有核红细胞是单核的，孕早期胎儿血中含量丰富但孕妇外周血中罕见；(2)其表达几种特异的抗原如运铁蛋白受体和特异的胎儿血红蛋白肽链如δ链和γ链，作为细胞标记而利于细胞的分类、鉴定和富集；(3)其在孕妇外周血中的生存期短，不会持续到下一次妊娠。但值得注意的是早孕期孕妇外周血的有核红细胞大都是孕妇本身产生的［2，3］。

二、胎儿细胞的富集、鉴别及分析技术

由于孕妇血中胎儿细胞的数量太少，大约是孕母血细胞的1/10～1/10，必须进行分离纯化才能利于进一步分析、作产前诊断。目前，分离胎儿细胞有多种手段，主要包括密度梯度离心、流式细胞分类计、磁激活细胞分类(MACS)、荧光激活细胞分类(FACS)、选择性细胞培养技术、尼龙毛柱分离法、单独溶解红细胞法等。

［5］

Johansen等分别采用5种不同的方法对滋养叶细胞进行分离的研究表明，单独溶解红细胞法是获得滋养叶细胞的最好途径，当与Ficoll密度梯度离心法联用时则获得的纯度低且费时。FACS尽管富集力强(3250倍)且纯度高，但收获率低(8%)。外包裹有抗CD16抗体的免疫滋珠法是进行滋养叶细胞免疫细胞化学

59［4］特征研究的最好方法。包裹有CD45抗体的IO珠法是分离用于产前诊断的滋养叶细胞最常用的方法，因其纯度高，富集能力强(32倍)且收获率高(78%)。Wachter等［6］用电荷流式分类(CFS)法对16例孕妇(怀男婴13例、Downs氏综合征2例、18三体死婴1例)外周血样进行初步分离，发现每20ml血样中平均有2000个胎儿NRBC，均经与染色体的荧光原位杂交(FISH)证实。Bianchi等［7］应用针对胎儿红细胞抗原即运铁蛋白受体(CD 71)、thromfospondin受体(CD 36)和血型糖蛋白A(GPA)的三种不同的单克隆抗体方法作为荧光激活细胞流式分类。结果表明用抗CD 71或CD 36鉴别出胎儿性别的精确度分别为57%和88%，而用抗GPA分离的细胞预报胎儿性别的正确率为100%。Steel等［2］开发了一种快速、价廉的简易技术从孕妇周围血中富集红细胞，其原理是在初步消除孕妇血中的单核细胞后接着进行阳性选择。其程序为收集早期或中期孕妇周围血，通过Ficollhypaque密度梯度离心分离得单核细胞(包括有胎儿有核红细胞)混悬液，然后用抗CD 45/抗CD 14的混合剂(与孕妇血中的大部分单核细胞起免疫反应)处理，接着加入粘附于含铁胶粒的山羊抗鼠IgG，并形成含铁的非有核红细胞及单核细胞，在磁场的作用下这些细胞被吸引住并将其弃除，余下有核红细胞。最后一步是有核红细胞的阳性选择。首先加入CD 71抗体，然后象上述一样加含铁溶液，再次混合并放置于磁场中，此时，粘附于磁极大多是有核红细胞，洗净后将其从磁极中移开即可进行FISH分析。Simpson等［8］在研究持续流式方法及其敏感性、特异性时发现，五种血型糖蛋白A的抗体均产生凝集作用，故不将其作为胎儿细胞的阳性选择标记，而以CD 71+细胞或γ球蛋白阳性细胞作为阳性选择是成功的，分别发现10/18例和12/14例46，XY的男性胎儿细胞。为去除孕妇血本身的有核红细胞污染及更有效地富集胎儿细胞，一般地使用MACS法，此法(通过使用 CD 45-阴性选择)导致的血细胞降低范围是7～34倍，但能富集有［9］核红细胞达1000倍，而应用“双MACS”法则使孕妇血单核细胞CD 45+和CD 14+的平均清除率为780倍，CD 71+有核红细胞的平均富集率为500倍，回收率为40%～55%［10］。Van Wijk等［11］报告了他们有效富集胎儿滋养叶细胞的两步骤方法。首先从早孕孕妇外周血中分离、富集滋养叶细胞，然后用高度特异性的巢式X/Y PCR进行分析鉴定，敏感到足以探测单个细胞特异性X和Y染色体序列以及100000个雌性细胞间鉴别出一个雄性细胞，通过本技术预报性别与传统核型分析比较，成功率为91.7%。

如上所述，用Y染色体探针对男性胎儿细胞进行鉴别和预报是可行的，但如用胎儿细胞进行遗传病产前诊断则必须鉴别出分离富集到的有核红细胞是否是胎儿来源的，识别胎儿细胞的标记必须是与性别无关的。只有这样才能作出准确的产前诊断。目前用于识别胎儿细胞的标记包括胎儿血红蛋白、HLA-G、HLA-DQ、2，3-二磷酸甘油酸(BPG)及胸腺嘧啶核苷激酶法等。Von Koskull等［12］发现含有血红蛋白的胎儿幼红细胞用BPG处理后，再用过氧化酶反应即呈可见的红色阳性反应。用本方法研究发现13/14例正常孕妇(胎龄6～19周)有胎儿幼红细胞。Geifman-Holtzman等［13］利用与父方的HLA-DQαAl等位基因互补的特异性引物对从母血中分离到的胎儿细胞作PCR扩增，结果发现6/12例样本有扩增带，提示父传的HLA-DQαAl基因型的存在，而6/12例样本无扩增带，胎儿基因型预报率100%后均经羊膜腔穿刺术等方法来验证。最近发现有可能成为识别胎儿细胞的新的标记是细胞内DNA前体途径酶即腺苷嘧啶核苷激酶活性增加［14］。用已分离和鉴别的胎儿细胞进行产前诊断的技术方法主要有PCR及FISH。PCR着重于母体所缺的父传基因突变或多态性的诊断，FISH则依赖于特异的染色体探针(如X、Y、21、18染色体探针等)对染色体疾病进行产前诊断［4］。

三、临床应用

目前已有一些用孕妇外周血胎儿细胞进行产前诊断的成功报道，但很多尚处于起步阶段，有些临床应用研究尚在进行当中，大群体产前诊断的敏感性和特异性也有待于以后作出评价。除性别(男性)外，已进行过产前诊断的疾病包括染色体异常和单基因疾病等。

Camaschella等［15］研究怀有β-地中海贫血/血红蛋白Lepore胎儿可能的三名高风险孕妇，男方均携带有HbLepore突变基因。PCR的结果两名孕妇外周血样有Lepore基因的阳性讯号，另一名孕妇无阳性讯号，均经绒毛取样(CVS)分析证实。Geifman-Holtzman等［16］最近发表的研究结果表明Rh阴性的孕妇在早孕及中孕期取外周血通过FACS富集NRBC预报胎儿Rh状态的特异性为100%，敏感性为84%。Price等［17］研究一名10周孕龄的孕妇，其外周血进行流式分类，然后分别用Y、18染色体探针进行FISH，结果8.7%的细胞与Y探针有杂交信号，8.5%显示三个18染色体探针杂交信号，产前诊断为18三体男性胎儿，后经CVS和核型分析证实。Ganshirt-Ahlert等［18］的研究表明怀18三体胎儿的孕妇外周血经分离富集后至少有8%(平均12%)的细胞显示18染色体的三个杂交信号，而正常孕妇少于5%(平均2.5%)；除了21三体、18三体外，其它已进行产前诊断的非正倍体胎儿尚有13三体，69，XXX，45，X/46，XX，47，XXX，47，XXY等，而以21、18及13三体作出的产前预报较为准确［2］。Sekizawa等［19］最近成功地从8～10周孕龄的孕妇外周血中分离出单个NRBC进行Duchenne型肌营养不良的产前诊断。NRBC用Percoll非连续密度梯度进行分离，并在显微镜下用微操作器收集。单个细胞的全部基因组通过引物延伸预扩增(PEP)法进行扩增。以PEP反应的小部分产物可决定性别。一旦确认NRBC是男性胎儿来源的、肌营养不良外显子4、8、12、45、50和51即以同样的PEP反应中被鉴别。

需要注意的问题

一、首先是细胞类型的选择。虽然孕妇静脉血中的NRBC是产前诊断最有指望的细胞类型(因其生存期短，反映最近一次妊娠进入母体外周血的胎儿细胞且在非妊娠妇女中罕见)，但近年已有证据表明发现于孕妇外周血中的有核红细胞大部分是来源于孕妇本身，本质上妊娠可诱导孕妇体内产生NRBC。因此需要更有效更特异的富集技术以获得足够的来源于胎儿的NRBC，才能进行可靠的产前诊断［3］。

二、其次是在孕早期胎儿细胞是否进入孕妇外周血以及是否有前次妊娠造成的胎儿细胞污染。Thomas等［20］的研究发现，所有怀男婴的孕妇外周血用PCR方法均能扩增出特异性的Y染色体DNA，检测时间最早是4周零5天，最迟是7周零1天。分娩后8周，怀男婴的产妇外周血无一例能检测到特异的Y染色体序列。因此证实孕早期孕母血即出现胎儿DNA，一直到分娩后2个月才消失，在孕早期用孕妇外周血的胎儿细胞进行遗传病的产前诊断是可能的，且不必担心前次妊娠导致的污染。

三、伦理学的考虑。由于用孕妇外周血胎儿细胞进行产前基因诊断为非侵入性，许多夫妇是否不适当地用于性别选择是值得注意的［1］。

评价

正如上述，利用孕妇外周血胎儿细胞进行产前诊断的基础研究已取得很大进展，临床应用研究也取得了初步成功。在高风险孕妇，对染色体异常及单基因疾病胎儿已作了成功的产前诊断。这些技术的成熟将改变侵入性产前诊断的方式，而对低风险的孕妇群体，无论其年龄大小均能乐于接受检查，在此基础上结合侵入性的产前诊断使检测质量大大提高，并可降低或避免侵入性产前诊断带来的流产等并发症。但目前仍然存在的问题是胎儿细胞分离过程中的母血污染问题，以及影响孕妇周围血中胎儿细胞状态的因素如孕龄、血型及孕妇疾病等。随着单个细胞水平的分离技术及基因诊断技术的进步，孕妇血细胞的污染问题将最终得到解决。

第二篇：血细胞的选择

一．为什么选择新达启帆三分类血细胞？

1、仪器检测原理的区别

三分类的仪器大都采用电阻抗检测技术，由信号发生器、放大器、甄别器、阀值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成；五分类的产品大都采用光散射检测技术，主要由激光源（多采用氩离子激光器，以提供单色光）、检测区（主要由鞘流形式的装置构成，以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流）、检测器（散射光检测器系光电二极管，用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号；荧光检测器系光电倍增管，用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号）。

2、白细胞分类方法的区别

三分类产品是将白细胞分为淋巴细胞，单核细胞，粒细胞；五分类的仪器则是将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞（中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞）。

3、适用客户的区别

三分类血液细胞分析仪主要适用于三甲以下的医院、妇幼保健院、诊所以及社区服务中心等，价格相对要便宜很多；而五分类的产品主要用于三甲以上的医院，价格以及试剂方面要贵很多。

随着当前临床检测的需要，各种血液细胞分析仪不断涌现，其实产品没有好坏之分，主要是选择合适自己的，客户可根据临床检测样本量的多少以及检测标准来选择购买三分类的还是五分类的产品。

现在临床应用而言，三分类的仪器应用更为广泛，目前新达启帆的血液细胞分析仪均采用三分类的仪器，无论是在价格上、操作方法上，还是在检测结果上都不亚于五分类仪器。

二．为什么选择新达启帆全自动血细胞？

1、全自动血细胞在检测过程中无需人工操作，从检测前的清洗到检测结果打印均由仪器自动完成。半自动血细胞需人工参与，在测量血红蛋白时，需人工加入溶血素，其中，血红蛋白的测量和红细胞测量是分两次进行的。

2、全自动血细胞不易堵孔，因为添加试剂都是由仪器自动完成，试剂的比例和多少都是精准化的。半自动血细胞容易堵孔，这个堵孔主要是白细胞堵孔，主要原因有两点，第一是溶血剂的问题，人工添加溶血剂不足的话，这样显示出HGB的增高和白细胞上升，如果白细胞图形上淋巴峰出现不规则上升，时间久了就会发生严重堵孔。第二是稀释液的理化指标不合格，造成细胞无法正确稀释间隔，游离不好就会造成细胞聚集。

第三篇：血细胞分析作业指导书

血细胞分析检验程序 检验目的

检测血液中血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量、白细胞分类及相关参数(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。2 检测原理

血常规检查方法采用血细胞自动分析仪法，参见《全国临床检验操作规程》p7～11，部分白细胞分类计数采用显微镜检查法，参见《全国临床检验操作规程》p5～7。

2.1 电阻抗法血细胞计数（光电6318-K）：即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液(电解质溶液)稀释的血样(血细胞)在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲；脉冲的高低代表细胞体积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。

2.2 细胞化学和光散射法白细胞计数(Ac.T 5-diff)：即将血液经过细胞化学试剂染色，不同的白细胞胞浆内部即可出现不同的酶化学反应。当这些细胞通过测量区时，由于酶反应强度不同和细胞体积大小差异，激光束射到细胞上的前向角和散射角不同，以X轴为吸光率，Y轴为光散射，每个细胞产生两个信号结合定位在细胞分布散点图上。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。

2.3 多角度激光法白细胞计数(XE-2100 XT-1800i)：在白细胞分类通道：全血加入溶血剂(FD-Ⅰ和FD-Ⅱ)作用后，嗜酸性粒细胞内颗粒被染色；其它白细胞略有皱缩。WBC/BASO通道：全血加入溶血剂(FB)溶血。除BASO外，其它白细胞均明显皱缩。仪器从低角度及高角度分析白细胞的内部结构。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出白细胞总数和分类计数结果。

2.4 光电比色法测量血红蛋白：在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成Hb衍生物，进入Hb测试系统，在特定波长(一般在530～550nm)下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成正比，仪器便可显示其浓度。不同型号的血细胞分析仪配套溶血剂配方不同，形成的Hb衍生物亦不同，其吸收光谱各异但最大吸收均接近540nm。2.5 光散射法红细胞和血小板计数(Ac.T 5-diff)：以二维激光散射法检测红细胞和血小板。红细胞测试原理是：在测试系统中，全血与红细胞/血小板稀释液混合，使自然状态下双凹盘状扁平圆形的红细胞成为球形并经戊二醛固定，此种处理并不影响MCV体积。红细胞无论以何种方位通过测量区时，被激光束照射后所得的信号是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同时测量一个红细胞，根据低角度光散射转换能量大小，测量单个红细胞体积与总数；根据高角度光散射得出单个红细胞内血红蛋白浓度。血小板与红细胞在一个系统中测量，其原理是：根据同质性球体光散射的Mie理论，当球形化的血小板单个通过激光照射区时，仪器在两个角度测定激光的散射强度：高角度主要测细胞的折射指数(RI)，它与细胞的密度有关；低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在1～30fl，RI在1.35～1.40之间。计算机对存储的测量信息进行分析处理，得出红细胞和血小板计数结果。

2.6 显微镜白细胞分类计数：把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，经瑞氏染料染色后，在显微镜下根据白细胞形态特征予以分类计数，得出相对比值(百分率)，并观察细胞形态的变化。3 设备性能参数

血细胞分析仪的操作性能因仪器的种类与型号不同而异。3.1 XE-2100 XT-1800i血细胞分析仪

3.1.1 本仪器检测血细胞的线性范围为：WBC：(0.0～100.0)×109/L，RBC：(0.0～8.00)×1012/L；HGB：0.0～250g/L，PLT：(0.0～1000)×109/L。3.1.2 本仪器检测血细胞的精密度为：WBC：±2.0%，RBC：±2.0%，HGB：±2.0%，PLT：±5.0%。

3.2 MEK-6108K MEK-6318K血细胞分析仪

3.2.1 本仪器检测血细胞的线性范围为：WBC：(0.0～99.99)×109/L，RBC：(0.00～9.99)×1012/L，HGB：0～299g/L，PLT：(10～999)×109/L。3.2.2 本仪器检测血细胞的精密度为：WBC：±3.0%，RBC：±2.0%，HGB：±2.0%和PLT：±5%。3.3 Ac.T 5diff 血细胞分析仪

3.3.1 本仪器检测血细胞的线性范围为：WBC：(0.4～90.0)×109/L，RBC：(0.23～7.70)×1012/L，HGB：0～229g/L，PLT：(4～1000)×109/L。

3.3.2 本仪器检测血细胞的精密度为：WBC：±3.0%，RBC：±2.0%，HGB：±2.0%和PLT：±6%。4 标本

4.1 临床护士抽取患者抗凝静脉血2～3ml。4.2 采血后立即送到临床检验科。

4.3 血量不够1ml或血液凝固、溶血或严重脂血标本不能作检测。5 设备和试剂

5.1 设备：XE-2100、XT-1800i、MEK-6108K、MEK-6318K 血细胞分析仪。5.2 试剂

5.2.1 稀释液、溶血剂和清洗液。

5.2.2 CBC试剂、DIFF试剂、消泡剂和鞘液冲洗液。5.2.3 瑞氏染液及缓冲液。

5.3 购买的试剂应放室温保存，注意防尘、防潮。

5.4 开封后的试剂应尽快用完，变质、超过有效期的试剂不能使用。6 容器及试剂添加剂

血液标本采集的容器是一次性含EDTA-K2抗凝剂的真空采血管；血液标本必需添加剂是EDTA-K2抗凝剂。7 校准步骤

血细胞分析仪的操作过程分别见XT-2100 XT-1800i血细胞分析仪标准操作程序、Ac.T 5-diff血细胞分析仪标准操作程序、和MEK6108-K MEK6318K血细胞分析仪标准操作程序中仪器校准程序。8 操作步骤

8.1 申请单及标本编号

整理血液常规检验申请单及血液标本，审核合格后，对检验申请单和血液标本进行编号。8.2 上机测试 操作过程分别见XE-2100血细胞分析仪标准操作程序、XT-1800i血细胞分析仪标准操作程序、Ac.T 5diff血细胞分析仪标准操作程序和MEK6108-K MEK-6318K血细胞分析仪标准操作程序标准操作程序。8.3 检验结果的输入

8.3.1 打开电脑，启动“检验程序”，输入用户名及口令后，进入检验程序。8.3.2 单击“检验”菜单，选择“检验结果录入修改”，进行检验结果的录入及修改。通过申请序号进行结果的输入，选择“工作单号”(XE-2100 XT-1800i自动传输：扫入当前检验标识序号；Ac.T 5diff自动传输:扫入当前检验标识序号；MEK-6108K MEK-6318K测定结果和其它非自动传输标本：输入病人姓名)，仪器会自动传输入检测结果；同时输入当前患者的样品“采集时间”和“接收时间”。

8.3.3 仪器检测结果必要进一步镜检标准

8.3.3.1MEK-6318K和MEK6108-K血细胞分析仪等三分类仪器检测的标本全部需要镜检血涂片。

8.3.3.2XE-2100 XT-1800i和Ac.T 5diff血细胞分析仪等五分类仪器检测结果根据本程序第18款[白细胞五分类血细胞分析仪的白细胞分类筛选原则]选出需要做血涂片检查的血标本。

8.3.3.3 临床医生要求做红细胞、白细胞、血小板等形态检查的血标本。8.4 显微镜检查操作步骤

8.4.1 制片:静脉抗凝血标本混匀或末梢血标本，采血后推成厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。推好的血膜在空气中晃动，以促使快干，以免细胞变形缩小。

8.4.2 染色:平置玻片于染色架上，滴加瑞氏染色液3～5滴，使其迅速盖满血膜，约1分钟后，滴加缓冲液5～10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5～10分钟后用水冲去染液，待干。

8.4.3 镜检:先用低倍镜或高倍镜阅览全片，注意观察血片染色情况：如有无血小板或红细胞聚集，片尾有无巨大异常细胞，再结合仪器警告的内容，分别重点从白细胞分类、红细胞参数和血小板参数等方面进行观察，记录各类细胞结果。8.5 镜检结果的输入及报告确认 单击“结果处理”菜单，选择“报告确认”进入结果确认，通过选择“工作单元”、“报告日期”、“单张”或“批量”后，按“提取”键提取检测结果，对检验结果进行逐一确认。8.6 检测过标本及废物的处理

检测过的血液标本、废液及经血液标本污染的各种废物按血液常规标本的采集与处理程序(文件编号：PLA301-LJK–CJ-001)中4.14进行处理。9 质量控制

9.1 室内质控：周一～五每天做室内质控(厂家提供的质控物)。测定过程是：从4～8℃冰箱取出全血质控物置室温，血细胞分析仪开机后预热20min，分别将质控物混匀后上机检测，打印结果并与允许值范围对比，质控合格后才能检测病人血标本。对于失控应按质量控制程序处理，仪器质量控制当天的情况进行逐一登记。

9.2 室间质控：每月参加科内的室间质控考评2次。每年参加卫生部和WHO室间质控。

9.3 细胞分类计数的质量控制 9.3.1 影响分类计数准确性的因素 9.3.1.1 细胞分布不均

在一般涂片的尾部中性粒细胞较多，淋巴细胞较少。涂片越薄细胞分布越差，粗糙的推片所制成的血涂片，细胞分布明显不均。当白细胞有聚集现象时，细胞分布极不规则，以致无法准确地进行分类。胞体在的细胞和幼稚细胞分布在涂片的尾部和边缘，相反，淋巴细胞和嗜碱性粒细胞则位于涂片的头部和体部。因此，在日常操作中，应尽量注意这些问题，减少 10 干扰因素

10.1 严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高。

10.2 红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低，白细胞假性增高(电阻抗法)或假性减低(激光法)和MCV假性增高。

10.3 冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高。10.4 有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低。11 结果计算及测量不确定度 按仪器设计原理，只对红细胞常数(红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度)进行计算，可根据RBC、HGB及HCT结果求出。11.1 红细胞平均体积(MCV)MCV(fl) 每升血液中红细胞比积每升血液中红细胞个数 HCTRBC根据RBC及HCT，由下式求出。11.2 红细胞平均血红蛋白量(MCH)根据RBC及HGB，由下式来求出。

MCH(pg) 每升血液中血红蛋白含每升血液中红细胞个数量 HGBRBC11.3 红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)根据HCT及HGB，由下式来求出。

MCHC(g/L) 每升血液中血红蛋白含每升血液中红细胞比积量 HGBHCT11.4 RDW由血细胞分析仪测量获得，是反映周围血红细胞体积异质性的参数。当红细胞通过小孔的一瞬间，计数电路得到一个相应大小的脉冲，不同大小的脉冲信号分别贮存在仪器内装计算机的不同通道，计算出相应当体积及细胞数，统计处理而得RDW。11.5 测量不确定度

11.5.1 SF-3000血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为：WBC：±0.22×109/L(均值=3.87)、±0.46×109/L(均值=6.07)和±0.80×109/L(均值=13.27)；RBC：±0.22×1012/L(均值=2.39)、±0.24×1012/L(均值=4.18)和±0.36×1012/L(均值=6.02)；HGB：±2.60g/L(均值=82.60)、±3.66g/L(均值=129.53)和±5.48g/L(均值=168.07)；PLT：±15.66×109/L(均值=64.60)、±25.80×109/L(均值=200.40)和±40.82×109/L(均值=340.93)。11.5.2 BC-2000血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为：WBC：±0.22×109/L(均值=3.87)、±0.46×109/L(均值=6.07)和±0.80×109/L(均值=13.27)；RBC：±0.22×1012/L(均值=2.39)、±0.24×1012/L(均值=4.18)和±0.36×1012/L(均值=6.02)；HGB：±2.60g/L(均值=82.60)、±3.66g/L(均值=129.53)和±5.48g/L(均值=168.07)；PLT：±15.66×109/L(均值=64.60)、±25.80×109/L(均值=200.40)和±40.82×109/L(均值=340.93)。

小11.5.3 MEK 6108K血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为：WBC：±0.28×109/L(均值=3.20)、±0.62×109/L(均值=8.56)和±0.94×109/L(均值=15.09)；RBC：±0.22×1012/L(均值=2.30)、±0.24×1012/L(均值=4.03)和±0.42×1012/L(均值=6.03)；HGB：±2.06g/L(均值=62.80)、±4.08g/L(均值=132.70)和±6.00g/L(均值=162.23)；PLT：±20.56×109/L(均值=80.63)、±32.00×109/L(均值=203.50)和±43.67×109/L(均值=334.67)。

11.5.4 ADVIA 120血液分析仪仪器检测血细胞测量不确定度为：WBC：±0.26×109/L(均值=3.69)、±0.32×109/L(均值=5.36)和±0.74×109/L(均值=13.32)；RBC：±0.20×1012/L(均值=2.41)、±0.22×1012/L(均值=4.13)和±0.30×1012/L(均值=5.19)；HGB：±2.90g/L(均值=82.90)、±3.66g/L(均值=130.63)和±4.38g/L(均值=1625.10)；PLT：±10.32×109/L(均值=50.17)、±24.02×109/L(均值=201.13)和±30.54×109/L(均值=329.10)。12 生物参考区间 12.1 白细胞

成年人静脉血：3.5～10.0×109/L；手指血：4.0～10.0×109/L；新生儿：15.0～20.0×109/L；6个月～2岁：11.0～12.0×109/L。12.2 红细胞

成年男性：4.3～5.86×1012/L；成年女性：3.77～5.17×1012/L；新生儿：6.0～7.0×1012/L。12.3 血红蛋白

成年男性：135～180g/L；成年女性：115～155g/L；新生儿：170～200g/。的一12.4 红细胞压积

成年男性：0.400～0.517； 成年女性：0.367～0.467。12.5 血小板 100～300×109/L。12.6 其它参数

MCV：80 ～ 100fL；MCH：27.2～34.3pg；MCHC：320～360g/L；RDW：<0.145；PCT：男性 0.183±0.041；女性 0.198±0.042；MPV：男性 10.07±1.78fL；女性 10.24±1.58fl；PDW：16.8%±0.63%；瞬13 患者检验结果可报告区间 13.1 阻抗法仪器：WBC：(0.2～99.99)×109/L，RBC：(0.50～9.99)×1012/L，HGB：0～299g/L，PLT：(10～999)×109/L。

13.2 激光法仪器：WBC：(0.02～400)×109/L，RBC：(0.05～7.00)×1012/L，HGB：0～225g/L，PLT：(5～3500)×109/L。14 警告/危急值

白细胞<0.5×109/L；红细胞<1.0×1012/L；血红蛋白<30g/L；血小板<20×109/L。15 实验室解释 15.1 白细胞计数 15.1.1 白细胞生理变化

15.1.1.1 年龄：初生儿白细胞较高，一般在15×109/L左右，个别可高达30×109/L以上。通常在3～4天后降至10×109/L左右，约保持3个月，然后逐渐降低至成人水平。初生儿外周血白细胞主要为中性粒细胞，到第6～9天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等。以后淋巴细胞逐渐增多，整个婴儿期淋巴细胞数均较高，可达70%。到2～3岁后，淋巴细胞逐渐下降，中性粒细胞逐渐上升，到4～5岁二者又基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青春期时与成人基本相同。

15.1.1.2 日间变化：白细胞数在静息状态时较低，活动和进食后较高；早晨较低，下午较高；一日之间最高值与最低值之间可相差1倍。运动、疼痛和情绪变化、一般的体力劳动、冷热水浴、日光或紫外线照射等，均可使白细胞轻度增高；而剧烈运动、剧痛和激动可使白细胞显著增高。如剧烈运动，可于短时间内使白细胞高达35×109/L，以中性粒细胞为主；当运动结束后迅即恢复原有水平。这种短暂的变化，主要是由于循环池和边缘池的粒细胞重新分配所致。

15.1.1.3 妊娠与分娩：妊娠期常见白细胞增多，特别是最后1个月，常波动于(12～17)×109/L之间，分娩时可高达34×109/L。分娩后2～5日内恢复正常。由于白细胞的生理波动很大，只有通过定时和反复观察才有意义。15.1.2 白细胞病理变化 15.1.2.1 白细胞增高

15.1.2.1.1 急性感染：急性化脓性感染时，白细胞增高程度取决于感染微生物的种类、感染灶的范围、感染的严重程度、患者的反应能力。如感染很局限且轻微，白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见中性粒细胞有所增高；中度感染时，白细胞总数常增高大于10×109/L，并伴有轻度核左移；严重感染时，白细胞总数常明显增高，可达20.0×109/L以上，且伴有明显的核左移。

15.1.2.1.2 严重的组织损伤或大量血细胞破坏：在较大手术后12～36小时，白细胞常达10.0×109/L以上，其增多的细胞成分以中性分叶核粒细胞为主。急性心肌梗塞后1～2天内，常见白细胞数明显增高，借此可与心绞痛相区别。急性溶血反应时，也可见白细胞增高。

15.1.2.1.3 急性大出血：在脾破裂或宫外孕输卵管破裂后，白细胞迅速增高，常达(20～30)×109/L。其增多的细胞也主要是中性粒细胞。

15.1.2.1.4 急性中毒：化学药物如安眠药、敌敌畏等中毒时，常见白细胞数增高，甚至可达20×109/L或更高，代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒及慢性肾炎尿毒症时，也常见白细胞增高，均以中性粒细胞为主。15.1.2.1.5 肿瘤性增高：白细胞呈长期持续增高，最常见于粒细胞性白血病，其次也可见于各种恶性肿瘤的晚期。此时不但总数常达(10～20)×109/L或更高，且可有较明显的核左移现象，呈所谓类白血病反应。15.1.2.2 白细胞减低

15.1.2.2.1 某些感染：某些革兰氏阴性杆菌如伤寒杆菌感染时，如无并发症，白细胞数均减少甚至可低到2×109/L以下。一些病毒感染如流感时白细胞亦减少，可能是由于在细菌内毒素及病毒作用下使贴壁的即边缘池粒细胞增多而导致循环池中粒细胞减少所致，也可能与内毒素抑制骨髓释放粒细胞有关。15.1.2.2.2 某些血液病：如典型的再生障碍性贫血时，呈“三少”表现。此时白细胞可少到1×109/L以下，分类时几乎均为淋巴细胞，乃因中性粒细胞严重减少所致的淋巴细胞相对增多。小部分急性白血病其白细胞总数不高反而减低，称非白血性白血病(aleukenic leuemia)，其白细胞可<1×109/L，分类时也呈淋巴细胞相对增多，此时只有骨髓检查才能明确诊断。

15.1.2.2.3 慢性理、化损伤：电离辐射(如X线等)、长期服用氯霉素后，可因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致白细胞减少，故于接触和应用期间每周应作一次白细胞计数。

15.1.2.2.4 自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮等，由于自身免疫性抗核抗体导致白细胞破坏而减少。

15.1.2.2.5 脾功能亢进：各种原因所致的脾肿大，如门脉肝硬化、班替综合征等均可见白细胞减少。其机制为肿大的脾中的单核-巨噬细胞系统破坏了过多的白细胞；肿大的脾分泌了过多的脾素，而此种体液因子能来活促进粒细胞生长的某些因素。

15.2 白细胞分类结果异常 15.2.1 中性粒细胞

15.2.1.1 中性粒细胞增加：急性感染性化脓性炎症，中毒(尿毒症、糖尿病酸中毒)急性出血、急性溶血及手术后等。

15.2.1.2 中性粒细胞减少：某些传染病(伤寒、疟疾等)化学药物及放射损害，某些血液病、过敏性休克、恶病质、脾功能亢进及自身免疫性疾病等。15.2.2 淋巴细胞

15.2.2.1 淋巴细胞增加：淋巴细胞性白血病，百日咳，传染性单核细胞增多症、水痘、麻疹、结核病、狭窄排斥反应前期，传染病恢复期等。

15.2.2.2 淋巴细胞减少：免疫缺陷病，丙种球蛋白缺乏症，淋巴细胞减少症，应用肾上腺皮质激素后，放射病等。15.2.3 单核细胞

单核细胞增多：常见于亚急性细菌心内膜炎、伤寒、疟疾、黑热病、活动性结核、单核细胞性白血病，急性感染恢复期等。15.2.4 嗜酸性粒细胞

15.2.4.1 嗜酸性粒细胞增多：见于过敏性疾病、皮肤病、寄生虫、血液病、猩红热、溃疡性结肠炎、X线照射后，脾切除、传染病恢复期等。

15.2.4.2 嗜酸性粒细胞减少：多见于伤寒、副伤寒，以及应用肾上腺皮质素或促肾上腺皮质素后。15.2.5 嗜碱性粒细胞

嗜碱性粒细胞增多：见于慢性粒细胞白血病、淋巴网细胞瘤、脾切除后等，恶性肿瘤、严重传染病、败血病、中毒(药物或重金属)大面积烧伤等。严重感染中性粒可出现毒性颗粒、空泡、Dohle氏体，核棘突，退行性变及细胞大小不均等变化。

15.3 红细胞结果异常 15.3.1生理性变化

年龄与性别的差异：初生儿由于出生前以弥散方式从母体血液获得氧气，通常处于生理性缺氧状态，故红细胞明显增高，但在出生2周后就逐渐下降。小儿生长发育时铁供应不足亦可引起贫血。男性儿童在6～7岁时最低，随着年龄增大而逐渐上升，到25～30岁时达高峰，30岁后随着年龄增高而逐渐下降，直到60岁尚未停止。在女性儿童也随年龄逐渐增高，到13～15岁时达最高值，而后受到月经、内分泌等因素影响逐渐下降，到21～35岁维持最低水平后又逐渐增高与男性水平相近。男女两性的红细胞计数在15～40岁期间差异明显，主要可能与在此期间，男性雄激素水平较高，而睾酮有促进红细胞造血作用有关。精神因素：感情冲动、兴奋、恐惧、冷水浴刺激均可使肾上腺素增多，导致红细胞暂时增加。

剧烈体力运动和劳动：主要由于氧需要量增加，引起相对缺氧。一般成人在安静时全身每分钟耗氧0.3～0.4L，肌肉运动时可增加到2～2.5L，最高可达到4～4.5L，此时由于红细胞生成素生成增加而骨髓加速释放红细胞，导致红细胞增多。气压降低：因缺氧刺激，红细胞可代偿性增生。高山地区居民和登山运动员红细胞数均高于正常，此因大气稀薄、氧分压低，机体红细胞生成素水平增高，引起骨髓产生更多的红细胞所致。

妊娠中、后期：为适合胎盘循环的需要，通过神经、体液调节，孕妇的血浆容量明显增加而引起血液稀释。15.3.2 红细胞增高

15.3.2.1 相对性增高：常见于剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、大量出汗、多尿和水的摄入量显著不足的患者。

15.3.2.2 绝对性增高：与组织缺氧有关。可引起继发性红细胞增多，如慢性肺源性心脏病、发绀性先天性心脏病，慢性一氧化碳中毒，登山病等。15.3.2.3 真性红细胞增多症，红细胞可达(7～10)×1012/L 15.3.3 红细胞减少

15.3.3.1 生理性贫血：妊娠期因血浆量相对增多，故红细胞相对减少。3个月的婴儿至15岁的儿童，因生长发育迅速而致造血原料相对不足，红细胞和血红蛋白可较正常人低10%~20%。老年人由于骨髓造血功能逐渐减低，均可导致红细胞和血红蛋白含量减少。

15.3.3.2 病理性减少：①红细胞减少所致的贫血：一是因骨髓造血功能衰竭，如再生障碍贫血、骨髓纤维化等伴发的贫血；二是因造血物质缺乏或利用障碍引起的贫血，如缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血、叶酸及维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血。②因红细胞膜、酶遗传性的缺陷或外来因素造成红细胞破坏过多导致的贫血，如遗传性球型红细胞增多症、地中海性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、异常血红蛋白病、免疫性溶血性贫血、心脏体外循环的大手术及一些化学、生物因素等引起的溶血性贫血。③失血：急性失血或消化道溃疡、钩虫病等慢性失血所致贫血。红细胞计数医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取相应的治疗措施；低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限，应继续寻找病因；低于1.5×1012/L应考虑输血。15.4 红细胞形态 红细胞形态变化见于： 红细胞大小不一

小红细胞：提示血红蛋白合成障碍，见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血和遗传性球形红细胞增多症。

大红细胞：常见于巨幼红细胞性贫血，也可见于溶血性贫血、恶性贫血等。巨红细胞：最常见于叶酸及维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血。红细胞大小不均：常见于严重的增生性贫血、巨幼细胞性贫血。红细胞内血红蛋白含量改变

正常色素性：除见于正常人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和白血病等。低色素性：常见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁粒幼细胞性贫血、某些血红蛋白病。

高色素性：最常见于巨幼细胞性贫血。

多色性：多色性红细胞增多提示骨髓造血功能活跃，尤见于溶血性或急性失血性贫血。

细胞着色不一：多见于铁粒幼红细胞性贫血。红细胞形状改变

球形细胞：主要见于遗传性和获得性球形红细胞增多症(如自身免疫性贫血或直接理化损伤如烧伤等)。

椭圆形细胞：见于遗传性椭圆形红细胞增多症。

靶形红细胞：常见于各种低色素性贫血，尤见于珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病，也见于阻塞性黄疸、脾切除后状态。

口形细胞：常见于口形红细胞增多症，小儿消化系统疾患引起的贫血，也可见于乙醇中毒，某些溶血性贫血及肝病患者等。镰形细胞：主要见于镰状细胞性贫血。

棘形细胞：多见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症，可高达70%～80%；也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病及尿毒症等。新月形红细胞：见于某些溶血性贫血，其意义不明。

泪滴形细胞：多见于贫血、骨髓纤维化症时，偶见于正常人。

裂红细胞：见于弥散性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤。正常人血涂片中裂片细胞小于2%。红细胞形态不整：此种细胞在某些感染或严重贫血时多见，最常见于巨幼细胞性贫血。异形红细胞产生的原因尚未明，有人认为是物理因素所致。

有核红细胞：最常见于严重的溶血性贫血、新生儿溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血；各种急、慢性白血病及红白血病和慢性骨髓增生性疾病如骨髓纤维化。红细胞内出现异常结构

嗜碱性点彩红细胞：见于中毒患者(如铅、汞等金属中毒)及各种增生活跃性贫血如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血等。

豪乔小体：见于脾切除术后、无脾症、脾萎缩、脾功能低下、红白血病和某些贫血患者；在巨幼细胞贫血时，更易见到。

卡波氏环：可见于白血病、巨幼细胞性贫血、增生性贫血、铅中毒或脾切除后。寄生虫：当疟原虫等感染时，可见红细胞胞质内相应的病原体。15.5 血红蛋白异常

血红蛋白的增减临床意义大致与红细胞的增减意义相似，但血红蛋白更准确反映贫血的程度。血红蛋白的减少与红细胞的减少程度不一定呈正比例，一是在小红细胞贫血时，由于单个红细胞血红蛋白的含量少于正常，所以血红蛋白减少的程度较红细胞减少的程度更为明显，如缺铁性贫血、消化性溃疡、肠息肉、痔疮、月经过多、钩虫病等慢性反复出血等；二是在大红细胞性贫血减少的程度较

血红蛋白更为严重，如缺乏维生素B12或叶酸引起的营养不良性贫血及肝硬化性贫血等；三是在大出血时，血红蛋白减少的程度基本上与红细胞减少相一致，如消化道、肺部大出血及其他原因引起的大出血，再生障碍性贫血、纯红细胞再生障碍性贫血。15.6 红细胞比积

红细胞比积是用于计算红细胞3个平均指标的参数的要素之一，有助于贫血诊断和分类；可以评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度，有助于某些疾病治疗中补液量的控制，以及了解体液平衡情况。15.6.1 红细胞比积增高

见于各种原因所致的血液浓缩，如大量呕吐、大手术后、腹泻、失血、大面积烧伤以及真性红细胞增多症(可达0.80)和继发性红细胞增多症等。15.6.2 红细胞比积减低

见于各种贫血。由于贫血种类不同，红细胞比积减少的程度并不与红细胞计数值完全一致。

15.7 红细胞平均指标

临床上将红细胞3个平均测定的指标作为贫血的形态学分类依据(表1)。表1 贫血的红细胞形态学分类

贫血类型 MC正细胞贫血 正增减减

MCH MCHV

C

常见原因或疾病

正常 正常 MM、急性失血性贫血、某些溶增高 正常 各种造血物质缺乏或利用不减低 正常 慢性感染、慢性肝肾疾病性贫减低 减低 缺铁性贫血及铁利用不良贫 大细胞贫血

单纯小细胞 小细胞低色15.8 红细胞体积分布宽度

红细胞体积分布宽度(red blood cell volume distribution width，RDW)是一个较新的红细胞参数，由血液分析仪根据红细胞体积分布的直方图导出，反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数(CV)表示。

进行贫血形态学新的分类：1983年Bessman提出用MCV和RDW两项参数作为贫血的形态学分类的新指标。根据不同病因引起贫血的红细胞形态特点的不同，可将贫血分成6类(表2)，新的分类法较传统分类法可能更全面，对贫血的病因分析和鉴别诊断具有更大意义。

贫血类型 MCV/RDW

特征 MCV减少，常见原因或疾病

小细胞均小细胞不正细胞均

轻型珠蛋白生成障碍性贫血、某缺铁性贫血、β-珠蛋白生成障

MCVMCV、再障、白血病、某些慢性肝病、缺铁性贫血(IDA)的筛选诊断和疗效观察：RDW增高对缺铁性贫血诊断的灵敏度达95%，但特异性不强，可作为缺铁性贫血的筛选指标。缺铁性贫血时RDW增高，尤其是MCV尚处于参考值范围时，RDW增高更是诊断缺铁性贫血的指征；当MCV减小时，RDW增高更为显著；给予铁剂治疗有效时，RDW将比给药前更大。这是因为患者补铁后，网织红细胞增多并释放入血，与给药前的小红细胞并存的缘故，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减小，RDW逐渐降至参考范围。

鉴别缺铁性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血：Bessman曾分析了两类贫血患者RDW变化，缺铁性贫血患者100%RDW增高，而88%轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的RDW正常，提示RDW可作为两类贫血的鉴别诊断指标。15.9 血小板 15.9.1 生理性变化

正常人血小板数随时间和生理状态变化：如一天之内可增减6～10%，午后略高于早晨；春季较冬季低；平原居民较高原居民低；月经前减低，月经后增高；妊娠中晚期增高，分娩后即减低；运动、饱餐后增高，休息后恢复。

15.9.2 血小板数增高：①一过性增高，见于急性大出血及溶血之后。②持续性增高，见于真性红细胞增多症、出血性血小板增多症。③慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤及许多恶性肿瘤的早期常可见血小板增多。

15.9.3 血小板数减少：①血小板产生减少，见于造血功能受到损害，如再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病。②血小板破坏亢进，见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进和进行体外循环时。③血小板消耗过多，如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等。16 安全性预警措施

血液标本的运输必须保证运送过程中的生物安全，防止溢出。血液标本溢出后，应该立即对污染的环境和设备进行消毒处理。对标明有传染性疾病的血液标本应特别防护，以不污染环境或保护工作安全为前提。

在进行血液分析的一切操作活动中，应按《实验室安全管理》程序执行。在进行操作前，首先应采取必要的保护性措施如穿戴保护性外套、手套等。

与血液标本接触的一切器皿、仪器组装/拆卸组合零件都应视为污染源，因此操作人员不小心接触了这种污染源时，应立即用清水冲洗被污染区域并进行消毒处理。

如果操作人员的皮肤或衣物上沾到了血液及废液，应立刻用清水冲洗并进行消毒处理。如果眼睛被溅入血液及废液，用大量的清水冲洗并采取必要的医疗措施。

如血液标本采用开盖程序测试，开盖时应防止气雾胶污染环境。

所有检查过的血液样本及有关的废弃物，都会给您带来潜在的危险或生物污染。所有废弃样本及废弃物的处理方法同血液标本的处理程序。17 变异潜在来源

严重的黄疸或脂血标本可使血红蛋白结果假性增高；

标本溶血可使红细胞结果假性减低、血小板计数结果假性增高；

红细胞冷凝集可使红细胞和血小板计数结果假性减低，白细胞假性增高(电阻抗法)或假性减低(激光法法)和MCV假性增高；

冷凝球蛋白或冷纤维蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高 有血小板凝集者可使血小板计数结果假性减低； 试剂的温度；

检测器微孔不完全堵塞；

标本采集后放置的环境温度过高、时间过长； 试剂变质或过了有效期而未发现等。白细胞五分类血细胞分析仪的白细胞分类筛选原则 18.1 血液病病人，无论血细胞计数结果和细胞分布图是否正常，一律做血涂片镜检。

18.2 无论初诊或复诊病人，只要白细胞、红细胞/血红蛋白和血小板计数结果正常，白细胞散射图、红细胞和血小板直方图均正常且无报警者，可不做血涂片镜检。

18.3 初诊病人，其白细胞、红细胞/血红蛋白、血小板计数结果，白细胞散射图、红细胞和血小板直方图中有一项异常或报警时，均需做血涂片镜检。

18.4 复诊病人，其血细胞计数结果与前一次结果无明显变化，但白细胞散射图异常且有报警时，需做血涂片镜检。

18.5 复诊病人，其血细胞计数结果与前一次检测结果相比有变化，但与临床诊断或治疗相符；而且白细胞散射图正常无报警时，可不做血涂片镜检。19 异常结果处理

血细胞分析仪测试的血常规结果异常需与临床诊断相符，不符合的结果应复查。20 报告时间与标本保存

20.1 病房患者的血常规检验结果报告单应于当日下午4点前由卫生员发回病房科室。

20.2 检验后的血常规标本应放置室温保存至次日上午8点丢弃。21 实验方法的溯源

见XT-2100、MEK-6108K、XT-1800i和5-diff血细胞分析仪使用说明书。22 参考文献

①XT-2100、XT-1800i、MEK-6108K和5-diff血细胞分析仪使用说明书。②“2013例北京市正常成年人静脉血血细胞正常参考范围调查”《中华医学检验杂志》 1996年第3期。

③叶应妩，王毓三主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司.南京.第二版.1997。

第四篇：关于血细胞分析仪的几个问题

关于血细胞分析仪的几个问题

一． 发展简史

1947年美国科学家库尔特(W.H.Coulter)发明了用电阻法计数粒子的专利技术。1956年他又将这一技术应用于血细胞计数获得成功，其原理是根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定，这种方法称为电阻法或库尔特原理。1962年，我国第一台血细胞计数仪在上海研制成功。到了60年代未血细胞分析仪除可进行血细胞计数外，还可以同时测定HGB血红蛋白。70年代，血小板计数仪问世。80年代，开发了白细胞分类(3分类及5分类)。90年代，开发出了可对网状红细胞进行计数的血细胞分析仪，同时5分类及幼稚细胞检测更成熟，并发展成为血细胞分析流水线。

二． 如何选购血细胞分析仪

当前，在我国境内销售的的血细胞分析仪品牌很多，给医院的选购造成了一定的麻烦。如日本SYSMEX公司(东亚医用电子株式会社)的血细胞分析仪系列、美国库尔特公司(现已被贝克曼收购)的血细胞分析仪系列、日本光电公司的血细胞分析仪系列、美国丹能公司以及瑞典博尔医疗公司的血细胞分析仪系列。因此建议医院购买时从以下几个角度考虑：

1.实用性。医院应该根据自身的能力和标本量来决定购买何种档次的机器，不要盲目攀比，争相购买高档机器，从而造成仪器购置的浪费。

2.仪器性能。这是最关键的一个因素。不能完全相信厂家的宣传，要多听取专家意见和到友邻单位了解。

3.价格比。衡量同档次机器的价格。

4.售后服务。俗话说：救人如救火。对机器也是一样，机器损坏待修时间过长会造成病人对医院的信誉度下降，久而久之就会造成病人的流失。所以，机器的售后服务也是一个必须考虑的因素。

5.辅助设备、试剂、消耗品和零配件价格。要建立请专家进行论证的制度，纠正过去由院长一人说了算的错误做法。

三． 如何验收血细胞分析仪

１.验收前准备工作：仔细阅读说明书；按说明书要求准备仪器的工作环境和相关的外部设备；成立验收小组；拟定验收计划。

2.开箱：必要时请商检局派人参加；开箱后按照装箱单清点物品是否和装箱单一致。

3.安装：应该对安装过程进行详细的记录。

4.验收仪器的技术性能指标

(1)测定仪器试剂的本底；

(2)检测仪器的精密度：用高、中、低值新鲜血标本各测10次，计算X－S、CV值，取20～30个标本随机排列，各测3次，求出总重复性CV%，它代表批内精度、仪器稳定性、互染等因素的总和；

(3)互染率：取高、低两个浓度全血(高、低值相差4～5倍)，先测定高浓度3次，接着测低浓度3次，再测高浓度3次，计算高对低、低对高的互染率；

(4)线性：取全血标本，用盐水稀释相当于全血的90%、80%、70%……，测得RBC、WBC、HGB结果做y=a+bx,a接近于0，b接近于1；

(5)校准：应由厂家提供全血校准物(低档仪器用校准颗粒及HGB校准液)进行校准；

(6)上述指标必须符合该仪器的出厂指标，才算验收合格。由验收小组成员、安装工程师及设备科同志签字后存档。

四． 如何对血细胞分析仪进行校准

仪器经使用一个阶段后应该作一次全面的校准，因为仪器本身是个比较器。一旦仪器产生漂移将带来分析误差及不精密度，所以仪器应该经常定期校准。

1． 仪器校准前准备：彻底清洗管道，去除管道中的残留血液、吸附的蛋白和纤维等，然后测定试剂空白，本底必须符合要求。

2． 校准物准备：检查校准物是否在有效期内，外观有无变质。从冰箱中取出后，必须平衡至室温，轻轻混匀，小心打开瓶盖，勿使血液溅出，分装成两瓶。

3． 在仪器上测定校准物，连续测定11次。第1次结果弃置不用，将2至11次结果计算S，绝对误差，相对误差。

4． 核对实测结果与校准物所示结果，检查实测结果有无升高或下降的趋向性。

5． 判断校准结果：校准标准要求如下表1。(1)如果各参数的绝对值误差和相对误差小于一级要求，属合格范围，不须作任何校准。(2)如果参数大于一级要求，小于二级要求，可按说明书要求调整系数。当调整后，可再测定另一瓶全血标准物，理应达到小于一级要求水平。(3)如果结果大于二级要求，则需通知厂家派工程师修理或调整，为保证病人标本测试质量，该仪器应暂停使用。

6． 表1校准标准 要求

绝对误差 相对误差

一级要求 二级要求 一级要求 二级要求

WBC 0.1×109/l 0.4×109/l 1.25% 5%

RBC 0.03×1012/l 0.08×1012/l 0.7% 8.0%

HGB 1g/l 8g/1 0.78% 3.0%

HCT 0.8% 1.7% 2.0% 4.5%

MCV 1.0fl 8.0fl 1.18% 2.5%

PLT 6.0×109/l 20.0×109/l 2.7% 9.0%

MPV 0.50fl 8.0fl 5% 20%

五．使用血细胞分析仪的注意事项

为了保证使用血细胞分析仪得出的结果能够尽量反映病人的真实情况，在使用时必须注意以下几方面：

1． 血样：由于静脉血受外界因素影响较小，成份比较稳定，检测结果准确度高重复性好，因此除婴儿外，建议取血者均应采用静脉血。如果采集未梢血时，注意不可局部过度挤压，避免血液中混入大量的组织液，而且易激活凝血系统产生局部凝血，导致检测结果的误差；第一滴血由于细胞成分不稳定应弃掉，用第二滴血进行检测。

2． 抗凝：使用拘橼酸盐抗凝剂时间过长易结晶，细胞形态易发生变化，影响计数结果的准确性；草酸盐易使血小板产生凝集，并可使白细胞形态发生变化，影响计数结果及分类；而肝素抗凝过量易引起白细胞凝集和血小板减少；EDTA-2Na较EDTA-2K的可溶性低，血小板凝集的可能性大。因此国际血液学标准委员会(ICSH)1993年发表的文件中建议使用EDTA-2K作为血细胞分析仪的抗凝剂，用量为1.5～2.2mg/ml血。

3． 采血后用塞子密闭，室温保存不超过6小时。

4． 稀释：稀释器、吸样管要经过校准。吸血后吸样管外的血液要完全擦干净。血液稀释后要尽快测定，否则易引起“稀释性溶血”。

5． 混匀：检测前混匀很重要，如果无旋转式混匀器应颠倒混匀至少8次。

6． 试剂：血细胞分析仪对试剂的要求非常严格，要求有严格的渗透压标准、稳定的导电率、高标准的纯净度以及对仪器管道和阀路无腐蚀作用。因此溶血剂、稀释液及清洗剂等最好选用原厂配套产品。

7． 白细胞分类：首先必须明确，迄今为止，世界上无论多先进的血细胞分析仪，进行的白细胞分类都只是一种过筛手段，并不能完全取代人工镜检分类。要坚决纠正有些单位用了血细胞分析仪就丢掉镜检的错误思想。

8． 质量控制：血液分析必须建立严格的质量控制制度，才能保证结果的可靠性。

六．现代血细胞分析仪的主要进展

随着高科技的引用和基础医学的发展，各种先进的血细胞分析测试技术被应用到血细胞分析仪上。1987年Coulter公司发明的VCS(Volume，V，体积；Conductivity，C，电导性；

Scatter，S，光散射)技术可使血细胞未经任何处理，在与体内形态完全相同的自然状态下得出检测结果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血细胞分析仪中采用了阻抗和射频技术联合的白细胞分类法。进入90年代后，仪器的自动化程度增高(达到120份/小时)；可进行多参数分析(高达30余项)；精密度高(重复计数；保证微孔管清洁；取中段血；运动流式细胞计数原理；鞘流原理……)；向5分类及鉴别幼稚细胞发展；准确度好，全面质量管理，保证仪器检测可靠性；具有智能化，可对同一病人诊断的前后进行对比，提出综合意见，确定诊断方向；更加注意保护操作人员的安全(SLS-Hb、自动混匀、进样、吸样针内外清洗等)；向流水线发展，将血细胞分析仪、网织红细胞计数仪、推片、染色机联成流水操作线。最后，再强调一下，坚决反对用了血细胞分析仪后就不进行镜下复检和分类的错误倾向。

第五篇：自动血细胞分析仪操作规程

4．操作程序 4.1开机启动

首先开启仪器主机侧面板的电源开关，然后开电脑主机，仪器主机前面板状态指示灯变为橙绿闪烁，仪器主机初始化后开始自检，自检时仪器会自动灌注稀释液、清洗液及溶血剂，并清洗液路。自检完成后，仪器进入血液细胞分析窗口。

4.2本底测试

4.2.1放置洁净的空试管于采样针下，应确保采样针轻挨试管底部。在血液细胞分析窗口，点击“排液”图标，仪器通过采样针排出稀释液到试管中。

4.2.2在血液细胞分析窗口，点击“编号”图标，进入下一个编号操作，输入“0”，再点击“确定”按钮返回血液细胞分析窗口。（注意：仪器系统软件将本底测试的顺序号设定为0，试测试数据将不存储在仪器中，但禁止将血液样本的顺序号设定为0）。

4.2.3将盛有稀释液的试管放在采样针下，按仪器前面板的“RUN”键，待听到“滴”的一声后，方可移走试管。仪器开始自动计数、测量。

4.2.4计数过程中，在窗口的右下方有WBC、RBC的计数计时器，显示WBC、RBC的计数时间。当计数时间过长或过短时，仪器会发出故障报警，并给出报警提示。若出现报警提示，即参照说明第9章《故障处理》进行处理。

4.3质量控制

首次装机或在每天进行血液样本测试之前必须对仪器进行质控，具体参照说明第5章《质量控制》进行处理。

4．4标定

若本底测试，质控结果达不至要求，且某些参数漂移变化较大，则必须对仪器进行重新标定，具体参照说明第6章《标定》进行处理。

4．5血液样本的采集

4．5．1由于所有的临床样本、质控物、标定物均可能含有人血或人的血清，具有潜在的传染性，因此在处理这些物品时必须遵守已建立的实验室或临床操作规程，穿好工作服，戴好医用手套及安全眼镜。

4．5．2采血过程避孕必须干净、无污染，必须使用合格的抗凝剂。严禁剧烈摇动采血管。在室温下，静脉血只能保存4个小时，若在短时间内不能将血样处

理完毕，须将血样存放于2℃～8℃的冷藏室内保存。

4．5．3静脉血（全血）的采集

利用静脉穿刺采取静脉血，放于含有抗凝剂（EDTA-K2·2H2O）的干净试管内，抗凝剂能够保持红细胞、白细胞的形态不变，同时可抑制血小板聚集。轻轻摇动试管5-10次，将试管内的血液彻底摇匀。

4．5．4末梢血（预稀释）的采集

末梢血的采集一般采用局部穿刺法，典型的采集方法是从指端穿刺采集，采血管用20μL定容采血管。指端穿刺采集血液样本时，不能过分挤压穿刺部位，避免组织液混入血液，造成测试分析结果不准确。

4．6全血模式与预稀释模式的转换

4．6．1在电脑工作界面点击“全血”标识，屏幕上将弹出“转换到预稀释模式”，点击“是”，转换成“预稀释工作模式”，同时屏幕上的标识变成“稀释”标识。

4．7血样计数、分析 4．7．1预稀释模式

a）将洁净的空试管置于采样针下，在血细胞分析窗口，点击“排液”图标，仪器通过采样针排出稀释液到试管中。

b）试管移出，将20μL定容采血管内的血样迅速注入到准备好的盛有稀释液的试管中，并轻轻摇动试管，使血样与稀释液混匀。

c）将试管放于采样针下，应确保采样针轻挨试管底部。

d）按仪器前面板的“RUN”键，待听到“滴”的一声后，方可移走试管。e）仪器开始自动分析样本，请等待分析结果。4．7．2全血模式

a）轻轻摇动盛有标本的试管，血样充分混匀后，将试管置于采样针下。b)按仪器前面的“RUN”键，待听到“滴”的一声后，方可移走试管。c）仪器开始自动分析样本，请等待分析结果。

注意：在“预稀释”模式下，必要时可将剩余样本再进行一次计数。4．8样本资料的输入 4.8.1手工资料的输入

在血液细胞分析窗口，点击“资料”图标，弹出资料编辑窗口后，用鼠标点击需要输入项目的文本框并输入资料。资料输入完毕后，用点击“确定”按钮，仪器保存当前编号的资料并返回血液细胞分析窗口。

点击“下一个”按钮，可输入下一个编号的资料，这样就可以批量输入样本资料，然后批量样本测量。点击“取消”按钮，仪器取消本次输入的资料并返回血液细胞分析窗口。

注意：序号0是仪器本底测试的专用序号，在正式的血液标本测试时请勿输入此序号。

4．9测量结果分析、处理

仪器提供丰富、便捷的测量结果分析、处理功能。点击“图形”图标，可以修改分析结果。

点击“传输”图标，可以将当前样本数据传输到网络。

点击“记录”图标，可以将当前样本数据的分析报告，通过内置记录仪打印出来。

点击“打印”图标，可以将当前样本数据的分析报告或浏览历史详细的报告，通过外置打印机打印出来。

点击“报警音”图标，可以关闭故障的警报音，再次点可恢复报警音。点击“帮助”图标，可以进入帮助窗口，获得版本号等信息，点击“详细”按钮，进入帮助文件获得需要的帮助。

如果仪器分析所得到的参数的数值超过系统所设定的参数界限，仪器会用不同的颜色进行标记。

蓝色表示测试参数值低于系统设定的下限；红色表示测试参数值超过系统设定的上限。

如果计数时间低于系统内部设定的时间，则仪器会提示“WBC气泡”或“RBC气泡”，同时在检测结果前显示“B”。

如果计数时间高于系统内部设定的时间，则仪器会提示“WBC堵孔”或“RBC堵孔”，同时在检测结果前显示“C”。

当WBC直方图出现报警时，R1，R2，R3，R4，RM分别表示如下含义： *R1报警：提示淋巴细胞左侧区域异常，可能原因：RBC溶血不全、血小板凝

结、巨大血小板、疟原虫、有核红细胞、异常淋巴细胞、冷凝球蛋白及脂类克立等。

*R2报警：提示淋巴和单核细胞间区域异常，可能原因：异型淋巴细胞、异常淋巴细胞、姜细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞增多、原幼细胞等存在。

*R3报警：提示单核细胞与粒细胞之间区域异常，可能原因：有未成熟粒细胞、异常细胞和嗜酸性粒细胞存在。

*R4报警：提示粒细胞右侧区域异常，可能原因：粒细胞增多。

*RM报警：提示在白细胞的分区中，除以上区域外的多区存在异常，可能原因：以上多种原因共同存在。

当PLT的直方图出现异常时，其右侧会出现Pm报警提示，Pm报警的具体含义为：

*PM报警：提示血小板与红细胞交界处区域异常，可能原因：有血小板凝结、大血小板、小的红细胞、细胞碎片和纤维蛋白存在。

注意：若系统测试所得到的参数数值为“***”，表示本次测试数据为无效数据。（测试本底除外）

注意：当PLT直方图出现Pm报警时，参数PDW的测试值有可能为“***”。注意：当WBC的测试结果的数值小于0.5*109/L时，白细胞分类可能不准确，白细胞分类可能不准确，建议手工复查。

4．10报告输出

仪器提供内置热敏记录仪和外接打印机两种设备，可根据用户的需要配置。当血液样本分析完成后：

点击“传输”图标，可以将当前样本数据传输到网络。

点击“记录”图标，可以将当前样本数据的分析报告，通过内置记录仪打印出来。

点击“打印”图标，可以将当前样本数据的分析报告或浏览历史详细的报告，通过外置打印机打印出来。

当“自动打印”被选中：

若“记录仪”被选中，内置记录仪会自动打印出测试报告； 若“外接打印机”被选中，外接打印机会自动打印出测试报告；

若同时被选中，则记录仪和打印机可以同时输出报告。若“自动传输”被选中，仪器会自动将测试数据传输到网络。

记录仪、打印机、传输及测试报告的格式再“设置”窗口进行设置，具体设置方法、步骤请参考参照本说明书第4章《仪器设置》。

4．11分析结果修改

当操作者认为仪器的WBC、RBC、PLT浮动解表自动分类不能满足临床或实验室的特殊样本的分类需求，操作者可以根据临床或实验室的实际情况，采用人工移动分类界标进行WBC、RBC、PLT的调整。

注意：不必要或不正确的人工移动分类界标，可能导致不可信的分析结果。在用于临床前建议用镜检验证。

具体方法、步骤如下：

a）在血液细胞分析窗口，点击“图形”图标，此时WBC直方图被选中，其图形被红白相间的矩形框包围，点击屏幕下方的“参数”图标可以选择需要调整的WBC、RBC、PLT直方图参数。

b）确定要修改的直方图参数后，点击“分类”图标，选择需要调整的分类限，选中的分类限会由绿色虚线变为粉红色实线。

c）根据需要点击“左移”图标或“右移”图标，可分别向左或右移动选中的分类线，在直方图的左下方同时显示选中的分类线的数值，同时相应的检测结果也随着分类线的移动面变化。

d）调整完成后，点击“返回”图标，出现提示对话框，点击“取消”图标可以取消本次调整结果，点击“确定图标则存储本次调整结果。

4．12关机

a）在血液细胞分析窗口，点击屏幕右上角的“关机”图标，屏幕弹出关机窗口。

b）若关闭仪器，点击“是”。

c）仪器开始对液路进行保养、清洗，关机程序运行完毕后，仪器会自动退出系统，此时关闭仪器后面板的电源开关。

d）清理工作台并处理废液。

注意：禁止违规进行关机操作，否则将导致仪器性器性能和可靠性的降低。

5．支持性文件

5.1 URIT-3300全自动血液细胞分析仪使用说明书。5.2LZCDC-BX04检测设备操作规程编写要求。