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《药物分析》实验教学大纲
课程名称： 药物分析 课程代码：130042 课程类型：专业基础课程 开课学期：第四学期 课程总学时：108学时 实验学时：38学时 前期课程：药物化学、药理学、分析化学、有机化学、无机化学 使用专业：药学
一、课程性质、目的和任务
药物分析是高职高专教育药学专业的一门重要专业课程之一。本课程主要内容包括药物鉴别、检查、含量测定基本理论及制剂检验技术；药典中常见分析方法的介绍及典型药物的分析；药品生物检测技术、中药制剂分析及体内药物分析等。通过本课程的学习，使学生具备强烈的药品质量观念，能够掌握药典中常见分析方法的基本原理和基本操作技能，熟悉常见药物的分析，初步具备运用现代分析技术对药物进行全面质量控制的能力，能够胜任生产企业、研发部门及营销单位的相关技术工作。
药物分析实验课是药理学的重要组成部分，加强和改进实验课教学是提高教学质量的重要环节，本实验室所开的实验课均随相应的理论课进行，通过药物分析实验课教学应达到以下三方面的教学目的：
1、加深对专业知识的理解，正确掌握药典各种分析方法的原理及应用。
2、使学生掌握药品检验的基本操作技能及各种仪器的使用。培养学生的实验操作技能、独立分析问题及解决问题的能力。
3、培养学生具有严谨、求实的科学态度。
二、实验教学基本要求
为达到以上教学目的，对所有参加药物分析实验课的学生做出以下具体要求：
1、实验课前要预习实验教程，了解实验的目的、原理及基本操作规程。
2、实验时应认真操作，仔细观察实验现象及实验结果，及时并如实地做好记录。
3、实验结束后，及时整理和总结实验结果，按规定格式写出实验报告。实验报告格式：
实验题目___________________ 实验日期___________________
一、目的要求
二、实验用品
三、操作步骤
四、实验结果
五、结果分析
三、主要仪器设备
紫外-可见分光光度仪、旋光仪、高效液相色谱仪、溶出度测定仪、ZTY-1型自动永停滴定仪、脆碎度检查仪、融变时限检查仪等。
四、实验内容及学时分配
实验一 化学药物的鉴别（必修，2学时）
1、掌握几种常见化学药物的鉴别方法和原理。
2、熟练地进行几种常见化学药物鉴别试验的操作。
3、能作出正确的结果判断。
实验二 中药制剂的鉴别（选修，2学时）
1、掌握牛黄解毒片、板蓝根颗粒、双黄连口服液的鉴别方法和基本原理。
2、学会中药制剂鉴别的操作技术。
3、能进行正确的记录和结果判断。
实验三 葡萄糖的杂质检查（必修,2学时）
1、掌握药物中一般杂质检查的操作及有关计算。
2、熟悉葡萄糖原料药的杂质检查项目及方法。
3、了解微生物限度检查法。
实验四 药物中特殊杂质检查（必修、4学时）
1.掌握比色法、薄层色谱法、紫外分光光度法、旋光法和高效液相色谱法测定药物中特殊杂质的操作及有关计算。
2、熟悉药物中特殊杂质检查的一般方法。
实验五 阿司匹林片的含量测定（必修，2学时）
1、掌握酸碱滴定法测定药物含量的基本方法及有关计算。
2、熟悉两步滴定法测定阿司匹林片的原理。
3、了解片剂分析的基本操作技术。
实验六 安乃近片的含量测定（选修、2学时）
1、掌握碘量法测定安乃近片的操作技能及有关计算。
2、熟悉安乃近片的含量测定原理。
3、了解片剂分析的基本操作。
实验七 盐酸金刚烷胺片的含量测定（选修，2学时）
1、掌握盐酸金刚烷胺片的含量测定方法及计算。
2、熟悉用非水溶液滴定法测定盐酸金刚烷胺片的原理。
3、了解非水溶液滴定法的操作技术。
实验八 苯巴比妥的含量测定（必修、2学时）
1、掌握银量发测定巴比妥类药物的原理和方法。
2、学会电位滴定的重点判断和操作技能。
实验九 盐酸普鲁卡因胺注射液的含量测定（必修，2学时）
1、掌握亚硝酸钠滴定法的原理及方法。
2、学会永停滴定法指示终点的原理及操作。
实验十 维生素B1片的含量测定（必修，4学时）
1、掌握吸光系数法测定药物含量的方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理和操作。
实验十一 硫酸阿托品注射液的含量测定（必修，2学时）
1、掌握标准对照法测定药物含量的基本方法与操作技术。
2、熟悉酸性染料比色法的基本原理。
3、了解注射剂分析的基本操作技术。
实验十二 头孢氨苄胶囊的含量测定（必修，2学时）
1、掌握高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊含量的原理及操作技术。
2、熟悉外标法计算药物含量的方法及结果判断。
3、了解高效液相色谱法在药物定量分析中的应用。
实验十三 氢化可的松的含量测定（必修，2学时）
1、掌握高效液相色谱法中内标法测定药物含量的基本方法和操作技术。
2、熟悉内标法的有关计算问题及结果判断。
3、了解高效液相色谱法测定氢化可的松的原理。
实验十四 维生素E胶丸的含量测定（选修，2学时）
1、掌握气象色谱法测定药物含量的原理及方法。
2、熟悉维生素E胶丸含量测定的操作条件及要点。
实验十五 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定（必修，2学时）
1、掌握双黄连口服液中黄芩苷的含量测定方法。
2、熟悉中成药含量测定药味选择原则及测定方法。
3、了解双黄连口服液的质量标准。
实验十六 重量差异检查与崩解时限检查（必修，2学时）
1、掌握片剂重量差异检查与崩解时限检查方法和判断标准。
2、熟悉升降式崩解仪的使用方法。
3、了解升降式崩解仪的构造。
实验十七 装量差异检查（选修，2学时）
1、掌握注射用无菌粉末及胶囊剂装量差异检查的步骤、结果计算和判断标准。
2、熟练使用分析天平（或电子天平）。
实验十八 溶出度检查（必修，2学时）
1、掌握用转篮法测定片剂溶出度的步骤、结果计算和判断标准。
2、熟悉溶出度测定仪的使用方法。
3、巩固紫外-可见分光光度计的正确使用。
实验十九 马来酸氯苯那敏片含量均匀度检查（必修，2学时）
1、掌握片剂含量均匀度的测定方法、结果计算和判断标准。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的使用方法。
实验二十 脆碎度检查与融变时限检查（必修，2学时）
1、掌握脆碎度检查与融变时限检查操作步骤、结果计算和判断标准。
2、了解脆碎度检查仪及融变时限检查仪的仪器装置。
实验二十一 氯化钠注射液中可见异物的检查（选修，2学时）
1、掌握可见异物检查中灯检法的操作步骤及判断标准。
2、了解灯检法所用仪器装置。
实验二十二 注射用青霉素钠中水分的测定（必修，2学时）
1、掌握费休法测定药物中水分的步骤、方法和计算。
2、了解费休试液保管的方法。
实验二十三 硬脂酸镁的分析（必修，2学时）
1、掌握药用辅料的检查项目及方法。
2、了解凝点测定的方法及仪器装置。
实验二十四 糊精的分析（必修，2学时）
1、掌握药物辅料的检查项目及方法。
2、了解还原糖的检查方法及操作。
实验二十五
苯甲酸钠的分析（必修，2学时）
1、掌握双相滴定法测定药物含量的原理、方法及操作。
2、熟悉苯甲酸类药物的鉴别反应。
3、了解红外光谱在药物分析中的应用。
实验二十六
药品外包装材料的分析（选修，2学时）
1、熟悉常见药品外包装材料的检验项目。
2、了解药品外包装材料的分类。
五、考核方式
实验对提高学生动手能力和加深理解、掌握课堂理论教学内容具有不可替代的作用。为了加强实验教学工作，提高师生上好、学好实验课程，特制定实验技能考核办法。
实验课考核内容如下：
1、考勤：四分之一实验课未做者，实验成绩为不合格。
2、预习：课前要预习所做实验的目的、内容。
3、实验课：上课时必须穿白大褂。严格实验课纪律，熟悉实验的目的、方法。在带教教师的指导下能较好的完成实验。
4、实验成绩包括以下几方面：
（1）考勤（10分）；
（2）实验技能掌握优劣（50分）；（3）实验结果（20分）；（4）实验报告完成情况（20分）。
5、教师要精心组织实验教学，认真带教，学期末教师应将学生实验成绩按30%记入学期总成绩。
六、推荐实验教材和教学参考书
实验教材：孙莹 吕洁主编.《药物分析实验实训》（供高职高专药学专业使用）.人民卫生出版社，2009.1 参考书：石东方主编，药物分析，人民卫生出版社，2003年2月
七、说明
选修实验不计在总学时内，可根据具体情况调整使用。本大纲中编写的有些简单实验项目可以合并上，在时间允许的情况下，争取开设设计性实验项目，给学生增加动手的机会，加强对学生实践技能的训练和提高。
第二篇：生物化学试验教学大纲课程名称生物化学课程代码120005课程
《生物化学》实验教学大纲
课程名称：生物化学 课程代码：120005 课程类型：专业基础课程 开课学期：第二学期 课程总学时：72学时 实验学时：20学时 前期课程：人体解剖学、组织胚胎学、遗传学、有机化学 使用专业：护理、助产、临床、药学
一、课程性质、目的和任务
生物化学是在分子水平上阐明生命现象的科学，它主要以化学和生物学的理论和方法为主要手段来研究生物体基本物质的化学组成，结构、理化性质、生物功能和结构与功能的关系及其在生命过程中化学变化的规律。生物化学是本专业基础课。通过本课程的教学使学生掌握生物化学的基本理论，基本知识和基本技能。为学习其它基础课程和专业课程奠定基础。
生物化学是一门实验性学科，它之所以能够迅速地发展，主要原因就是由于生物化学实验技术的不断提高和实验内容的持续发展。
生物化学实验课是生物化学教学的重要组成部分，加强和改进实验课教学是提高教学质量的重要环节，本实验室所开的实验课均随相应的理论课进行，通过生化实验课教学应达到以下三方面的教学目的：
1、验证生物化学的基本理论知识，加深对基本理论的理解和掌握。
2、使学生掌握生物化学实验的基本操作技能和实验方法。
3、使学生学会正确使用精密仪器和一些常规仪器。
4、培养学生具有严谨的科学作风和科学实验能力以及独立分析问题和解决问题的能力。
二、实验教学基本要求
为达到以上教学目的，对所有参加生物化学实验课的学生做出以下具体要求：
1、实验课前要预习实验教程，了解实验的目的、原理及基本操作规程。
2、实验时应认真操作，仔细观察实验现象及实验结果，及时并如实地做好记录。
3、实验结束后，及时整理和总结实验结果，按规定格式写出实验报告。实验报告格式：
实验题目___________________ 实验日期___________________
一、目的要求
二、实验原理
三、操作步骤
四、实验结果
五、结果分析
三、主要仪器设备
离心机、电泳设备、722分光光度计、电冰箱、可调式恒温水浴仪、恒温浴槽、培养箱、移液器等。
四、实验内容及学时分配
生化实验基本操作
【实验类型】 示教性实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1．了解生物化学实验室的一般规则。
2．熟悉生化实验室的基本操作。
3．练习玻璃器皿的洗涤、刻度吸管的选择和使用。4．掌握离心机的使用方法及注意事项。
实验一 蛋白质的两性电离和等电点的测定
【实验类型】 定量实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】
1、验证蛋白质的两性电离和等电点。
2、掌握测定酪蛋白等电点的原理及方法。
实验二 血清总蛋白测定
【实验类型】 定量实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1.熟悉血清总蛋白测定的原理及基本操作。
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】 2.掌握血清总蛋白测定的临床意义。
实验三 血清蛋白质的醋酸纤维素薄膜电泳
半定量、综合性实验 必开实验 学时
．掌握电泳法的原理及应用。
2．用醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白。3．了解血浆蛋白质的分类及功能。
实验四 肝组织中核酸的提取和鉴定
综合性实验 选开实验 学时
验证核酸的三大组成成分。
2.熟悉组织中核酸的提取与鉴定的基本操作方法。3.了解核酸的理化性质。实验五 酶的特异性及影响酶活性的因素
定性、验证实验 必开实验 学时
．验证酶催化的特异性及影响酶活性的因素。
2 1.2 12．通过唾液淀粉酶活性的变化，观察温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
3．学习使用恒温水浴箱。
实验六 尿淀粉酶活性测定
【实验类型】 定性实验 【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】 选开实验 学时、验证淀粉酶的催化作用。
2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。
实验七 琥珀酸脱氢酶的作用及其抑制
定性实验 必开实验 学时
．加深酶的竞争性抑制作用及其特点的认识。
2．学习琥珀酸脱氢酶的提取方法。3．通过实验观察酶的竞争性抑制现象。
实验八 分光光度计的使用
定性、示教实验 必开实验 学时
．掌握分光光度法定性、定量测定物质的原理。
2．学习使用722 分光光度计
实验九
血糖的测定
定量实验 必开实验 2 2 1
1 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1.了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理。
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】 2.能熟练进行血糖测定的操作。3.掌握血糖测定的临床意义。
实验十 酮体的生成与利用
定性实验 选开实验 学时
．掌握酮体的概念；了解酮体生成和利用的生理意义。
2．通过实验加深对酮体生成部位的认识并学会酮体的鉴定方法。3．学会从动物肝脏提取酶的粗制品。4．学会正确使用离心机
实验十一 血清甘油三酯的测定
定量实验 必开实验 学时
熟悉酶法测血清TG的基本原理及注意事项。
2.熟练进行实验操作。3.了解TG测定主要临床意义。
实验十二 血清胆固醇测定
定量实验 必开实验 学时
．了解胆固醇氧化酶法测定血清胆固醇的原理。
2.能熟练进行血清胆固醇测定的操作。3.掌握血清胆固醇测定的临床意义。
1
1.2 1
实验十三 血清ALT测定-赖氏法
【实验类型】 定量实验 【实验属性】 必开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1．掌握转氨基反应并了解常见转氨酶测定的临床意义。
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】【实验学时】【目的要求】
【实验类型】【实验属性】【实验学时】 2．熟悉丙氨酸氨基转移酶测定的原理及方法。3．了解酶活性单位的规定。4．测定血清丙氨酸氨基转移酶活性。
实验十四 血清BUN测定—二乙酰一肟显色法
定量实验 必开实验 学时
．熟悉血清尿素氮测定的原理及方法。
2．了解血清尿素氮测定的临床意义和正常值。3．学会使用微量进样器
实验十五 血清胆红素测定
定量实验 必开实验 学时
熟悉血清胆红素测定的原理和方法；
2.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。
实验十六 血清钾、钠的测定
定量实验 选开实验 学时
2 1.2【目的要求】 1.了解火焰光度计的作用原理。
2.了解血钾、钠测定的方法及临床意义。
实验十七 血清总钙测定
【实验类型】 定量实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1.熟悉甲基麝香草酚蓝比色法测定钙的原理和方法。
2.掌握血钙测定的参考范围及临床意义。
实验十八 血浆碳酸氢根浓度测定
【实验类型】 定量实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1.熟悉滴定法测定血浆碳酸氢根浓度的原理和方法。
2.掌握血浆碳酸氢根浓度测定的临床意义。
实验十九 胡萝卜素的柱层析分离
【实验类型】 半定量、综合性实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1.了解柱层析分离法的基本原理及其在生物化学中的应用
2.学习柱层析法的基本操作技术，利用柱层析法分离菠菜叶（或红辣椒）中的胡萝卜素及其它色素。
实验二十 凝胶层析分离血红蛋白和核黄素
【实验类型】 定量、综合性实验 【实验属性】 选开实验 【实验学时】 2学时
【目的要求】 1.掌握凝胶层析的基本原理。
2.熟悉凝胶层析的操作过程。
五、考核方式
实验对提高学生动手能力和加深理解、掌握课堂理论教学内容具有不可替代的作用。为了加强实验教学工作，提高师生上好、学好实验课程，特制定实验技能考核办法。
实验课考核内容如下：
1、考勤：四分之一实验课未做者，实验成绩为不合格。
2、预习：课前要预习所做实验的目的、内容。
3、实验课：上课时必须穿白大褂。严格实验课纪律，熟悉实验的目的、方法。在带教教师的指导下能较好的完成实验。
4、实验成绩包括以下几方面：（1）考勤（10分）；
（2）实验技能掌握优劣（40分）；（3）实验结果（20分）；（4）实验报告完成情况（30分）。
5、教师要精心组织实验教学，认真带教，学期末教师应将学生实验成绩单交教研室存档。
以上各项由实验课教师按相应比例酌情给分，总分再按30%的比例折算出实验成绩，汇入期末总成绩。
六、推荐实验教材和教学参考书
实验教材：王文玉主编.《生物化学实验教程与习题》.第四军医大学出版社，2010.9 参考书：李玉兰主编.《生物化学实验》（供高职高专使用）.中国医药科技出版社，2008.6
七、说明
选修实验不计在总学时内，可根据具体情况调整使用。本大纲中编写的有些简单实验项目可以合并上，在时间允许的情况下，争取开设设计性实验项目，给学生增加动手的机会，加强对学生实践技能的训练和提高。
第三篇：药理学教学大纲课程名称药理学课程代码120008课程类型
《药理学》实验教学大纲
课程名称： 药理学 课程代码：120008 课程类型：专业基础课程 开课学期：第二学期 课程总学时：90学时 实验学时：18学时 前期课程：生理学、生物化学、病理学、微生物及免疫学 使用专业：临床、护理、助产、药学、影像
一、课程性质、目的和任务
药理学是研究药物与机体(包括病原体)间相互作用、作用规律的学科。其研究内容是药物效应动力学（简称药效学）和药物代谢动力学（简称药动学）。药效学研究药物对机体的作用及机制，包括药理作用、临床应用和不良反应等；药动学研究机体对药物的作用及规律，包括药物的体内过程及药物在体内随时间而变化的动态规律。药理学是基础医学与临床医学、药学与医学之间一门双重桥梁课。通过本课程的教学，使学生掌握药理学的基本理论，基本知识和基本技能，为临床合理用药，提高疗效，减少不良反应提供基本理论。
药理学实验课是药理学的重要组成部分，加强和改进实验课教学是提高教学质量的重要环节，本实验室所开的实验课均随相应的理论课进行，通过药理学实验课教学应达到以下三方面的教学目的：
1、验证药理学的基本理论知识，加深对基本理论的理解和掌握。
2、使学生掌握药理学实验的基本操作技能和实验方法。培养学生的实验操作技能、独立分析问题及解决问题的能力，并使学生学会药理学常用实验仪器的使用。
3、培养学生具有严谨、求实的科学态度。
二、实验教学基本要求
为达到以上教学目的，对所有参加 药理学实验课的学生做出以下具体要求：
1、实验课前要预习实验教程，了解实验的目的、原理及基本操作规程。
2、实验时应认真操作，仔细观察实验现象及实验结果，及时并如实地做好记录。
3、实验结束后，及时整理和总结实验结果，按规定格式写出实验报告。实验报告格式：
实验题目___________________ 实验日期___________________
一、目的要求
二、实验用品
三、操作步骤
四、实验结果
五、结果分析
三、主要仪器设备
721分光光度计、离心机、计算机、智能化药理生理检测仪、记纹鼓、压力换能器、生理实验多用仪、电刺激仪、热板测痛仪、离体肠肌实验装置、电冰箱、恒温水箱、手术器械等。
四、实验内容及学时分配
实验一 药物的一般知识（选修，2学时）
1、了解药物的来源、有效成分、特殊药品的概念。
2、熟悉药物的制剂与剂型、药品管理基本知识、处方规则等。
3、实物展示、练习开写处方。
实验二 动物实验基本技术（必修，2学时）
1．了解药理学实验室一般规则。2．熟悉药理实验课的目的、要求。
3．掌握注射器的使用；逐步学会常用实验动物的捉拿和给药方法。
实验三 药物的基本作用（选修,2学时）
1、验证盐酸普鲁卡因兴奋、抑制、局部和吸收作用。
2、初步练习家兔椎管、肌肉、静脉注射法。实验四 药物血浆浓度半衰期（t1/2）测定（选修、4学时）
1.了解药物血浆浓度半衰期（t1/2）的简单测定方法，学习家兔采血技术。
2、熟悉721分光光度计、离心机、计算器 的原理及基本操作。2.掌握药物血浆浓度半衰期（t1/2）测定的临床意义。
实验五 药物剂量对药物作用的影响（必修，2学时）
1．验证药物的不同剂量对作用的影响。
2、初步学会小白鼠的捉拿和腹腔注射。
3、了解药物的安全范围有何临床意义。
实验六 不同给药途径对药物作用的影响（必修、2学时）
1.验证药物的给药途径不同对作用的影响。核酸的三大组成成分。2.进一步学会小白鼠的捉拿、腹腔注射及灌胃方法。3.掌握影响药物作用的因素。
实验七 药物的协同作用和拮抗作用（必修，2学时）
1．验证药物间的协同及拮抗作用。2．掌握联合用药时药物作用的相互影响。
实验八 传出神经药对瞳孔的影响（必修、2学时）
1、验证药物的缩瞳、散瞳作用。
2、掌握它们的作用机制，联系临床应用。
3、熟悉家兔的捉拿、滴眼及量瞳方法。
实验九 去甲肾上腺素的缩血管作用（必修，2学时）
1．观察去甲肾上腺素的缩血管作用。2．掌握作用机制及临床意义。
3．练习蛙（小白鼠）捉拿及破坏其脑、脊髓（剖腹探查）等。
实验十 传出神经药对血压的影响（选修，4学时）
1．验证传出神经药对血压、呼吸、心跳的影响。
2、掌握作用机制及临床意义。
3、了解实验方法，记录血压变化。
实验十一 有机磷酸脂类的中毒和解救（必修，2学时）
1.验证农药敌百虫的中毒现象。2.掌握阿托品、碘解磷定的解毒特点。3.初步学会家兔的耳静脉注射方法。
实验十二 局部麻醉药对兔角膜的麻醉作用比较（必修，2学时）
1、比较丁卡因及普鲁卡因对兔角膜的麻醉强度。
2、熟练进行家兔的捉拿及滴眼药。
3、掌握丁卡因及普鲁卡因的作用特点及用途。
实验十三 普鲁卡因及丁卡因的毒性比较（必修，2学时）
1．观察普鲁卡因及丁卡因对小白鼠全身作用结果。
2、判断两药的毒性大小，联系临床应用。
3、了解普鲁卡因溶液中加入少量肾上腺素有何临床意义。
实验十四 药物的抗惊厥作用（必修，2学时）
1．观察地西泮的抗惊厥作用。
2、学习药物致惊方法及特点。
实验十五 镇痛药的镇痛作用比较（选修，2学时）
1.观察镇痛药的镇痛作用。2.掌握镇痛药的作用及意义。
实验十六 强心苷对离体蛙心的作用（选修，2学时）
1、学习氏斯离体蛙心灌注法。
2、观察强心苷对离体蛙心收缩强度、心率和节律的影响，与钙离子的协同作用。
3、学习离体蛙心标本制备，掌握生理实验多用仪使用方法。
实验十七 枸橼酸钠的抗凝血作用（必修，2学时）
1.熟悉枸橼酸钠的抗凝血作用及应用。2.掌握家兔心内采血方法。
实验十八 呋塞米对家兔的利尿作用（必修，2学时）
1、观察呋塞米对水电解质排泄的影响。
2、学会输尿管插管法。
3、掌握尿液测钠的临床意义。
实验十九 硫酸镁急性中毒及其解救（必修，2学时）
1、观察硫酸镁急性中毒的症状及钙盐的解救作用
2、掌握拮抗作用的临床意义，能熟练的进行兔耳静脉给药。
实验二十 硫酸镁导泻作用原理的分析（必修，2学时）
1、观察硫酸镁、液体石蜡对肠管影响，分析其作用机制。
2、学会小肠给药（剖腹手术）的操作过程。
3、掌握硫酸镁导泻原理及临床应用。
实验二十一 链霉素的毒性反应及氯化钙的对抗作用（必修，2学时）
1、观察链霉素阻断神经肌肉接头的毒性作用及钙离子的对抗作用
2、掌握拮抗作用的临床意义。
五、考核方式
实验对提高学生动手能力和加深理解、掌握课堂理论教学内容具有不可替代的作用。为了加强实验教学工作，提高师生上好、学好实验课程，特制定实验技能考 核办法。
实验课考核内容如下：
1、考勤：四分之一实验课未做者，实验成绩为不合格。
2、预习：课前要预习所做实验的目的、内容。
3、实验课：上课时必须穿白大褂。严格实验课纪律，熟悉实验的目的、方法。在带教教师的指导下能较好的完成实验。
4、实验成绩包括以下几方面：（1）考勤（10分）；
（2）实验技能掌握优劣（50分）；（3）实验结果（20分）；（4）实验报告完成情况（20分）。
5、教师要精心组织实验教学，认真带教，学期末教师应将学生实验成绩按30%记入学期总成绩。
六、推荐实验教材和教学参考书
实验教材：王开贞 于肯明主编.《药理学》实验教程（供高职高专临床医学专业使用）.第6版.人民卫生出版社，2009.2 参考书：弥曼主编.《药理学》（供高职高专护理专业使用）.第2版.人民卫生出版社，2007.8
七、说明
选修实验不计在总学时内，可根据具体情况调整使用。本大纲中编写的有些简单实验项目可以合并上，在时间允许的情况下，争取开设设计性实验项目，给学生增加动手的机会，加强对学生实践技能的训练和提高。
第四篇：药物分析
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第七章 芳香胺类药物的分析
第七章 芳香胺类药物的分析
教学目的和要求
1、进一步掌握结构、性质与鉴别检查、含量测定的关联。
2、熟悉芳胺类、苯乙胺类、芳氧丙醇胺类类药物的分析方法。
3、掌握我国药典收载的此类药物的质量标准。
4、综合运用所学知识，对分析方法评价、比较和选择，逐步培养制定药物质量标准的能力。
5、进一步掌握常用的分析方法：高效液相色谱法，非水滴定法，溴量法。教学重点，难点 重点
1．芳胺类药物的亚硝酸钠滴定法，用永停法指示终点。药典收载用此法进行含量测定的药物：苯佐卡因；盐酸普鲁卡因及注射液；盐酸普鲁卡因胺及片剂，注射液；醋氨苯砜及注射液；盐酸克仑特罗 2．此类药物的非水滴定法 难点：
亚硝酸钠法测定含量的实验条件，此法对伯胺和仲胺测定时的不同化学反应
第一节 芳胺类药物的分析
芳胺类药物主要分为两类：一类为芳伯氨基未被取代，而在芳环对位有取代的对氨基苯甲酸酯类。另一类则为芳伯氨基被酰化，并在芳环对位有取代的酰胺类药物。
一、结构与性质
(一)对氨基苯甲酸酯类药物
本类药物分子中都具有对氨基苯甲酸酯的母体，结构通式如下：
1、典型药物：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸丁卡因等局部麻醉药。结构为:
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苯佐卡因
盐酸普鲁卡因(Benzocaine)(Procaine Hydrochloride)
盐酸丁卡因
(Tetracaine Hydrochloride)
盐酸普鲁卡因胺（抗心律失常药）因其化学性质与本类药物很相似，也在此一并列入讨论。其结构如下：
2、主要化学性质
1）芳伯氨基特性 显重氮化－偶合反应；与芳醛缩合反应；易氧化变色等。
2）水解特性 含酯键（或酰胺键）易水解。其水解的快慢受光线、热或碱性条件的影响。水解产物主要为对氨基苯甲酸（PABA）。
3）弱碱性 除苯佐卡因外，因其脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故具有弱碱性。因此能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；但在水溶液中不能用标准酸直接滴定，在非水溶剂中能滴定。
4）其它特性 本类药物的游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐均系白色结晶性粉末，具有一定的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。
(二)酰胺类药物
本类药物均系苯胺的酰基衍生物，其共性是具有芳酰氨基，基本结构为：
1、典型药物：对乙酰氨基酚（扑热息痛）等解热镇痛药、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因等局部麻醉药及醋氨苯砜抗麻风药。结构为：
对乙酰氨基酚
醋氨苯砜新疆医科大学教案续页
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(Paracetamol)(Acedapsone)
盐酸利多卡因
盐酸布比卡因
(Lidocaine Hydrochloride)(Bupivacaine Hydrochloride)
2、主要化学性质
1）水解后显芳伯氨基特性 芳酰氨基在酸性溶液中易水解为芳伯氨基，并显芳伯氨基特性反应。水解反应的速度受空间位阻影响：对乙酰氨基酚>利多卡因、布比卡因。
2）水解产物易酯化 对乙酰氨基酚和醋氨苯砜→醋酸→醋酸乙酯的香味。3）酚羟基特性 对乙酰氨基酚(FeCl3)。
4）弱碱性 利多卡因和布比卡因的脂烃胺侧链有叔胺氮原子，显碱性，可以成盐，与生物碱沉淀剂发生沉淀反应。其中与三硝基苯酚试液反应生成的沉淀具有一定的熔点。
5）与重金属离子发生沉淀反应 盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂后呈色。
此外，本类药物的紫外吸收和红外吸收光谱特征均可供分析用。
二、鉴别试验
(一)重氮化－偶合反应
分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β－萘酚偶合生成有色的偶氮染料。
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺(盐酸溶液中)+ 亚硝酸钠进行重氮化反应；
对乙酰氨基酚和醋氨苯砜(盐酸或硫酸)加热水解 + 亚硝酸钠进行重氮化反应。
如盐酸普鲁卡因的鉴别反应如下：
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又如对乙酰氨基酚的鉴别方法 取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5 滴, 摇匀, 用水3ml稀释后，加碱性β－萘酚试液2ml，振摇，即显红色。
盐酸丁卡因结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成乳白色的 N－亚硝基化合物沉淀（可与具有芳伯氨基的同类药物区别）。
(二)与三氯化铁反应---对乙酰氨基酚（+FeCl3试液→蓝紫色）。(三)与重金属离子反应
1.与Cu2+和Co2+反应 盐酸利多卡因，在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，溶于氯仿则显黄色。（盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等无此反应）。
盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。
2.与Hg2+反应 盐酸利多卡因 + 硝酸汞试液煮沸→显黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别。
3.羟肟酸铁盐反应 盐酸普鲁卡因胺分子中具有芳酰胺结构，加入浓过氧化氢溶液，缓缓加热至沸后，先被氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁，其溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。中国药典95年版采用本法鉴别盐酸普鲁卡因胺。
(四)水解产物反应
本类药物分子中有些具有酯的结构，在碱性条件下水解，利用其水解产物与试剂的反应进行鉴别。中国药典95年版采用此法鉴别盐酸普鲁卡因、苯佐卡因。
1.盐酸普鲁卡因的鉴别方法 取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀，加热变为油状物（普鲁卡因）；继续加热，产生的蒸汽（二乙氨基乙醇）能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消 新疆医科大学教案续页
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失后（生成可溶于水的对氨基苯甲酸钠），放冷，加酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于过量的盐酸。
2.苯佐卡因的鉴别方法 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
(五)制备衍生物测熔点(六)紫外特征吸收光谱
(七)红外吸收光谱
红外吸收光谱具有特征性强，专属性好的特点。因此，国内外药典均把红外吸收光谱作为一种鉴别方法，而且采用该法鉴别的药品不断增加。如中国药典（1995年版）用红外吸收光谱法鉴别的药品，由1990年版的207种增加到316种。该法特别适用于化学结构比较复杂、化学结构相互之间差别较小的药物的鉴别与区别。因为这些药物采用其他理化方法难以进行区别，而用红外吸收光谱法就比较容易区别。以盐酸普鲁卡因与盐酸普鲁卡因胺的红外图谱为例说明。
四、杂质检查
(一)对乙酰氨基酚的杂质检查
合成工艺：A、对硝基氯苯→水解→对硝基酚→还原→对氨基酚→乙酰化，制得；B、酚→亚硝化、还原→对氨基酚，乙酰化。在生产过程中除可能引入一般杂质外，还可能引入特殊的杂质。
1.乙醇溶液的澄清度与颜色 生产工艺中使用铁粉作为还原剂，可能带入成品中，致使乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚的有色氧化产物，在乙醇中显橙红色或棕色。
检查方法 取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液应澄清，无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较,不得更深。
2.有关物质 由于本品的生产工艺路线较多，不同生产工艺路线所带入的杂质也有所不同，这些杂质主要包括中间体、副产物及分解产物。例如：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等。以对硝基氯苯为原料，可能引入对氯乙酰苯胺，药典采用薄层色谱法对此项杂质进行限度检查。
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检查方法 取本品的细粉1.0g，置具塞离心管或试管中，加乙醚5ml，立即密塞，振摇30分钟，离心或放置澄清，取上清液作为供试品溶液；另取每 1ml中含对氯乙酰苯胺1.0mg的乙醇溶液适量，用乙醚稀释成每1ml中含50μg的溶液作为对照液。吸取供试品溶液200μl与对照溶液40μl，分别点于同一硅胶GF254 薄板上。以氯仿－丙酮－甲苯（13:5:2）为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更大，更深。
3.对氨基酚 本品在合成过程中，由于乙酰化不完全或贮藏不当发生水解，均可引入对氨基酚，使本品产生色泽并对人体有毒性，应严格控制其限量。利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，而对乙酰氨基酚无此反应的特点，与对照品比较，进行限量检查。
检查方法 取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50μg用同一方法制成的对照液（临用配制）比较，不得更深(0.005％)。
(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查
普鲁卡因分子结构中有酯键，易发生水解反应。其注射液制备过程中受灭菌温度、时间、溶液pH值、贮藏时间以及光线和金属离子等因素的影响，可发生水解反应生成对氨基苯甲酸和2-二乙氨基醇。其中对氨基苯甲酸随贮藏时间的延长或高温加热，可进一步脱羧转化为苯胺，而苯胺又可被氧化为有色物，使注射液变黄，疗效下降，毒性增加。故中国药典90年版规定，本品注射液应检查水解产物对氨基苯甲酸，其限度不得超过1.2％。
检查方法 精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品,加乙醇制成每1ml中含30μg的溶液,作为对照品溶液。取上述两种溶液各10μl，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯－冰醋酸－丙酮－甲醇（14:1:1:4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2％对二甲氨基苯甲醛乙 6 新疆医科大学教案续页
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醇溶液100ml，加入冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。
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五、含量测定(一)亚硝酸钠滴定法
本类药物分子结构中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠反应，可用亚硝酸钠滴定法测定含量。由于本法适用范围广，常被国内外药典所采用。
中国药典（2005年版）收载用本法测定含量的有：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因及其片剂，盐酸普鲁卡因胺及其片剂与注射液，醋酸氨苯砜及其注射液。
1.原理 芳伯氨基药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐，用永停法或外指示剂法指示反应终点。
2.测定的主要条件 重氮化反应的速度受多种因素的影响，亚硝酸钠滴定液及反应生成的重氮盐也不够稳定，因此在测定中应注意以下主要条件：
1)加入适量溴化钾加快反应速度：在盐酸存在下，重氮化反应的历程为：
慢 快 快
整个反应的速度取决于第一步，而第一步反应的快慢与含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游离程度有密切关系。如芳伯氨基的碱性较弱，则在一定强度酸性溶液中成盐的比例较小，即游离芳伯氨基多，重氮化反应速度就快；反之，则游离芳伯氨基较少，重氮化反应速度就慢。所以，在测定中一般向供试溶液中加入适量溴化钾（中国药典规定加入2g），使重氮化反应速度加快。
溴化钾与盐酸作用产生溴化氢，后者与亚硝酸作用生成NOBr： HNO2 ＋ HBr → NOBr ＋H2O(1)若供试溶液中仅有HCl，则生成NOCl：
HNO2 ＋ HCl → NOCl ＋H2O(2)由于(1)式的平衡常数比(2)式的约大300倍，即生成的NOBr量大得多，也就是在供试液中NO+的浓度大得多，从而加速了重氮化反应。新疆医科大学教案续页
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2)加过量盐酸加速反应：因胺类药物的盐酸盐较其硫酸盐的溶解度大，反应速度也较快，所以多采用盐酸。盐酸的用量按其反应，1mol的芳胺需与2mol的盐酸作用，但实际测定时往往加入过量的盐酸，有利于：①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果。
酸度加大，反应向左进行，故可以防止偶氮氨基化合物的生成。若酸度过大，又可阻碍芳伯氨基的游离，反而影响重氮化反应速度。在太浓的盐酸中还可使亚硝酸分解。所以，加入盐酸的量一般按芳胺类药物与酸的摩尔比约为1:2.5～6。
3)室温（10～30℃）条件下滴定：通常温度高，重氮化反应速度快；但温度太高，可使亚硝酸逸失，并可使重氮盐分解：
一般温度每升高10℃，重氮化反应速度加快2.5倍，但重氮盐分解的速度亦相应地加速2倍；所以滴定一般在低温下进行。由于低温时反应太慢，经试验，可在室温下进行。
4)滴定管尖端插入液面下滴定：重氮化反应为分子反应，反应速度较慢，帮滴定不宜过快。为了避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解，滴定时将滴定管尖端插入液面下约2/3处，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，使其尽快反应。然后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再缓缓滴定。尤其是在近终点时，因尚未反应的芳伯氨基药物的浓度极稀，须在最后一滴加入后，搅拌1～5分钟，再确定终点是否真正到达。这样可以缩短滴定时间，也不影响结果。
3.指示终点的方法 有电位法、永停滴定法、外指示剂法和内指示剂法等。药品标准中多采用永停滴定法或外指示剂法指示终点。
1)永停滴定法： 中国药典规定用永停法指示亚硝酸钠滴定法的终点。电极应为铂－铂电极系统。用亚硝酸钠液滴定，终点前，溶液中无亚硝酸，线路无电流通过，电流计指针指零。终点时溶液中有微量亚硝酸存在，电极即起氧化还原反应，线路中遂有电流通过，此时电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。
2)外指示剂法：
(二)非水溶液滴定法 新疆医科大学教案续页
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(三)分光光度法
对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。该法较亚硝酸钠滴定法灵敏度高，操作简便，因此被国内外药典所收载。如USP（24）采用甲醇－水混合溶剂，于244nm波长处测定吸收度，与对照品溶液进行对照测定其含量；而中国药典（2005年版）则采用百分吸收系数（剂、注射液、栓剂及胶囊剂的含量。1.对乙酰氨基酚的测定
2.片剂溶出度测定
3.分光光度法测定人唾液中对乙酰基酚的含量(四)比色法
(五)盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定---参阅教材P128
(六)高效液相色谱法
用高效液相色谱法，以苯甲酸为内标，可以同时测定盐酸普鲁卡因注射液中的普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸(PABA)，不需分离提取，方法准确简便。
练习题
98：133．盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（AB）A.重氮化—偶合反应 B.羟肟酸铁盐反应 C.氧化反应 D.磺化反应 E.碘化反应
97：137．采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（CD）A.苯巴比妥 B.盐酸丁卡因 C．苯佐卡因 D.醋氨苯砜
E.盐酸去氧肾上腺素
95：85．下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（A））法，测定对乙酰氨基酚原料、片新疆医科大学教案续页
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A.乙酰水杨酸 B.对氨基水杨酸钠 C.对乙酰氨基酚 D.普鲁卡因 E.苯佐卡因
96：81（99：72）.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（B）A.添加Br-B.生成NO+·Br-C．生成HBr D.生成Br2 E.抑制反应进行
95：75．中国药典（1990年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（B）
A.电位法 B.永停法
C.外指示剂法 D.内指示剂法 E.自身指示剂法
96：127．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）A.自身指示剂法 B.内指示剂法 C.永停法 D.外指示剂法 E.电位法
例1.ChP（2000）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（C）A.自身指示终点法 B.电位法指示终点 C.永停滴定法
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D.氧化还原指示剂法 E.酸碱指示剂法
例2.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（E）A.盐酸普鲁卡因 B.盐酸普鲁卡因胺 C.注射用盐酸普鲁卡因 D.盐酸普鲁卡因胺片 E.盐酸普鲁卡因注射液
例3.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（ABCDE）A.强酸
B.加入适量溴化钾 C.室温（10～30℃）下滴定 D.滴定管尖端深入液面 E.永停法指示终点
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第二节 苯乙胺类药物的分析
一、结构与性质
(一)基本结构与典型药物
本类药物为拟肾上腺素类药物，共性为具有苯乙胺的基本结构。其中肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素和盐酸多巴胺分子结构中苯环的3,4位上都有2个邻位酚羟基，与儿茶酚类似，都属于儿茶酚胺类药物。药典中收载本类原料药物近20种，在鉴别、检查和含量测定等方面具有代表性的药物供分析用。本类药物的基本结构为：
(二)主要化学性质
1.弱碱性 本类药物分子结构中具有烃氨基侧链，其氮为仲胺氮，故显弱碱性。其游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。
2.酚羟基特性 本类药物分子结构中具有邻苯二酚（或苯酚）结构，可与重金属离子络合呈色，露置空气中或遇光、热易氧化，色渐变深，在碱性溶液中更易变色。
3.光学活性 多数药物分子结构中具有手性碳原子，具有旋光性，可供分析用。
此外，药物分子结构中苯环上的其它取代基，如盐酸克仑特罗的芳伯氨基，也各具特性均可供分析用。还可利用其紫外吸收与红外吸收光谱进行定性或定量分析。
二、鉴别试验
(一)与三氯化铁反应---酚羟基
肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素等药物的分子结构中具有酚羟基，与Fe3+ 离子络合显色，加入碱性溶液，随即被高铁离子氧化而显紫色或紫红色。
(二)与甲醛－硫酸反应
肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素等药物可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。
(三)氧化反应---酚羟基
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本类药物分子结构中多数具有酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而呈现不同的颜色。如肾上腺素在中性或酸性条件下，被碘或过氧化氢氧化后，生成肾上腺素红，放置可变为棕色多聚体；盐酸异丙肾上腺素在偏酸性条件下被碘迅速氧化，生成异丙肾上腺素红，加硫代硫酸钠使碘的棕色消退，溶液显淡红色。
重酒石酸去甲肾上腺素在上述条件下比较稳定，几乎不被碘氧化。为了与肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素相区别，中国药典规定本品加酒石酸氢钾饱和溶液（pH 3.56）溶解，加碘试液放置5分钟后，加硫代硫酸钠试液，溶液为无色或仅显微红色或淡紫色。在此条件下肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素可被氧化产生明显的红棕色或紫色。在pH 6.5的缓冲液中，这三种药物均可被碘氧化产生红色。故在pH 6.5条件下加碘试液，无法区别这三种药物。
（四）紫外特征吸收与红外吸收光谱
(五)与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini试验）---脂肪伯氨基
三、杂质检查(一)酮体检查(二)有关物质检查
(三)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查
四、含量测定
本类药物的原料多采用非水溶液滴定法和溴量法测定含量，其制剂的测定方法较多，有提取容量法、阴离子表面活性剂滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相色谱法等。
(一)非水溶液滴定法
在列举的13种典型药物中，有10种药物的原料药均采用非水溶液滴定法测定含量。常用的测定条件为：冰醋酸为溶剂，加入醋酸汞试液以消除氢卤酸的干扰，并用结晶紫指示液指示终点。仅盐酸甲氧明测定中以萘酚苯甲醇指示终点；盐酸苯乙双胍和盐酸克仑特罗的测定采用电位滴定法。如碱性较弱，终点不明显可加入醋酐，提高其碱性，使终点突跃明显。
1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定 取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml，振摇溶解后(必要时微温)，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）14 新疆医科大学教案续页
第七章 芳香胺类药物的分析
滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于31.93mg的C8H11NO3.C4H4O6。
由于重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性较弱，不干扰高氯酸的滴定和结晶紫指示剂终点颜色的变化。故可以高氯酸直接滴定。
2.盐酸克仑特罗的测定 取本品约0.25g，精密称定，加冰醋酸20ml，微热使溶解，放冷，加醋酸汞试液5ml，照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于31.37mg的C12H18Cl2N2O·HCl。
*醋酸汞的作用--消除氢卤酸的干扰。
*为何用电位法指示终点？---由于盐酸克仑特罗的游离碱碱性较弱，终点突跃不明显。
3.硫酸沙丁胺醇的测定 取本品约0.4g，精密称定，加冰醋酸10ml，微热使溶解，放冷，加醋酐15ml和结晶紫指示液1滴用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于57.67mg的（C13H21NO3)2 H2SO4。
有机碱的硫酸盐，因硫酸在滴定液中酸性很强，只能滴定至HSO4-。*为何在放冷的条件下加醋酐？
---防止氨基被乙酰化，乙酰化物碱性很弱，如为伯氨基的乙酰化物，以结晶紫为指示剂时不能被滴定，用电位滴定法尚可测定，但突跃很小，这样就会使滴定结果偏低。仲氨基的乙酰化物，以指示剂法和电位滴定法都不能被滴定。但在低温时可防止乙酰化，所以加冰醋酸溶解样品后，应在放冷的条件下再加醋酐。
(二)溴量法(三)比色法
利用药物分子结构中的酚羟基可与亚铁离子络合显色，测定盐酸异丙肾上腺素注射液和盐酸多巴胺注射液的含量。也可利用分子结构中的芳伯氨基进行重氮化－偶合反应显色，测定盐酸克仑特罗栓剂的含量。所以比色法也是本类药物制剂常用的含量测定方法，具有灵敏和简便的优点。以盐酸克仑特罗栓的含量测定为例。
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第七章 芳香胺类药物的分析
1.测定原理 加氯仿使栓剂基质溶解后，用盐酸液（9→100）提取盐酸克仑特罗，加亚硝酸钠试液后，则分子中的芳伯氨基重氮化，在酸性溶液中，与N-(1-萘基)-乙二胺偶合显色，在500nm波长处进行比色测定。
2.测定方法 对照品溶液的制备 供试品溶液的制备 测定方法
(四)提取酸碱滴定法
(五)肾上腺素的荧光分光光度法(六)高效液相色谱法
利用液相色谱的高效分离、高灵敏度和高选择性的测定方法，不但对本类药物制剂进行常规分析，而且还广泛用于本类药物的临床药浓监控和体内药物动力学研究。
练习题
例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为（D）A.浓硫酸 B.甲醛试液 C.氨试液
D.甲醛—硫酸试液 E.茚三酮试液
例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（E）A.有关物质 B.二苯酮 C.盐酸 D.醛 E.酮体
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第七章 芳香胺类药物的分析
第三节
芳氧丙醇胺类药物
一、结构与性质
(一)典型药物的结构
OOHNHOCH2OCH3NHOOHNHCH3CH3CH3CH3.HCl氧烯洛尔 盐酸卡替洛尔
主要理化性质新近发展很快的一类用于心脑血管病的药物。
氧烯洛尔：本品为白色结晶性粉末，味苦，在乙醇或丙酮中易溶，在乙醚或氯仿中略溶，在水中微溶。
盐酸卡替洛尔：本品为白色结晶性粉末，在水中溶解，在甲醇中略溶，在乙醇中极微溶解，在乙醚中几乎不溶，在冰醋酸中极微溶解。
二、鉴别试验 化学鉴别反应 紫外吸收峰特征：
盐酸卡替洛尔水溶液（8ug/ml）,在215与252nm波长处有最大吸收。氧烯洛尔乙醇溶液（40ug/ml），在275nm波长处有最大吸收。
三、盐酸卡替洛尔中有关物质检查 TLC（高低浓度对比法）限量1%（稀释100倍）
四、含量测定 非水滴定 分光光度法
体内药物分析(HPLC)
芳胺及芳烃胺类药物的分析小结
1、本类药物的结构和性质
2、芳胺类药物的鉴别试验方法和含量测定的亚硝酸钠滴定法，新疆医科大学教案续页
第七章 芳香胺类药物的分析
芳胺类药物的特殊杂质检查和含量测定的非水溶液滴定法和分光光度法。（1）鉴别试验：各鉴别试验所用试剂及产生的现象；（2）亚硝酸钠滴定法。原理、主要测定条件及注意事项；（3）对氨基酚的检查；（4）对氨基苯甲酸的检查；
3、苯乙胺类药物的鉴别、检查和含量测定方法。[练习题及答案]
一、练习题 [A型题] 1．盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是
A.水杨醛 B.间氨基酚
C.水杨酸
D.对氨基苯甲酸 E.氨基酚 2．对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是
A.水杨醛 B.间氨基酚
C.对氨基酚
D.苯甲酸 E.苯酚 3．肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是
A.水杨醛 B.间氨基酚
C.对氨基酚
D.酮体 E.苯甲酸 [B型题] A.硫酸铜反应
B.氧化反应
C.还原反应
D.水解后重氮化-偶合反应
E.重氮化-偶合反应 1.盐酸利多卡因 2.肾上腺素 3.盐酸普鲁卡因 4．对乙酰氨基酚
A.溴量法 B.紫外分光光度法 C.亚硝酸钠滴定法 D.RP-HPLC法
E.非水滴定法 5.盐酸去氧肾上腺素 6.肾上腺素注射液 7.盐酸普鲁卡因 8．对乙酰氨基酚 [X型题]
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第七章 芳香胺类药物的分析
1.直接能与FeCl3产生颜色反应的药物有
A.盐酸普鲁卡因
B.盐酸去氧肾上腺素
C.对乙酰氨基酚
D.盐酸利多卡因
E.盐酸丁卡因 2.直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有
A.盐酸丁卡因
B.盐酸普鲁卡因
C.对乙酰氨基酚
D.对氨基酚
E.盐酸肾上腺素
二、答案精讲 [A型题]
1．D 因为盐酸普鲁卡因注射液在灭菌过程中, 易水解生成对氨基苯甲酸, 是盐酸普鲁卡因注射液中要检查的特殊杂质, 故只能选D。2．C 3．D 因为肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中都检查酮体，酮体是其特殊杂质。故只能选D。[B型题] 1.A 2.B 3.E 4.D 5.A 6.D 7.C 8.B [X型题] 1.B C 因为直接能与FeCl3产生颜色反应的药物，要求分子结构中含有酚羟基，只有盐酸去氧肾上腺素和对乙酰氨基酚具有此结构。故只能选B，C。
2.B C D 因为直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物，要求分子结构中含芳伯氨基或潜在芳伯氨基，只有盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚和对氨基酚含有此结构。故只能选B，C，D。
第五篇：药物分析
药物分析 绪 论
[重点、难点、要点、基本概念]
一、国家药品质量标准
国务院药品监督管理部门颁布的《中华人民共和药典》和药品质量标准为国家药品质量标准。
Pharmacopoiea，缩写为BP），现行版本为BP（2000）。日本药局方，现行版为第十四改正版。缩写为JP（14）。欧
洲
药
典
(European
Pharmacopoiea，缩写为Ph.Eur), 现行版为第四版。国际药典(The International 试者的权益并保障其安全而制订的。主要包括方案设计、组织、实施、监查、稽查、记录、分析总结和报告。
5．分析质量的控制（Analytical Quality Control，AQC）主要用于检验分析结果的质量。
1．药品质量标准 药品质量标准是药品现代生产和管理的重要组成部分，是药品生产、经营、使用和行政、技术监督管理各部门共遵循的法定技术依据，也是药品生产和临床用药水平的重要标志。
2．中国药典 药典是国家监督管理药品质量的法定技术标准，药典受载的品种均有疗效确切、生产成熟、产品稳定的特点。《中国药典》是《中华人民共和国药典》简称，最新版药典可表示为中国药典（2000年版）；英文为：Pharmacopoeia（缩写为Ch.P）。建国后出版了七部药典（1953、1963、1977、1985、1990、1995和2000年版）。3．主要国外药典 目前世界上有数十个国家编订了国家药典，另外有区域性的北欧洲药典、欧洲药典和亚洲药典及WHO编订的国际药典。在药物分析中可供参考的国外药典有：
美国药典（The United States Pharmacopoiea，缩写为USP）2002年为25版。
美国国家处方集（The National Formulary，缩写为NF）2002年为20版。
USP(24)与NF(19)合并为一册出版, 缩写为USP(24)-NF(19), 共有三卷。
USP(25)-NF(20)为首版亚洲专版。英国药典（British
Pharmacopoiea，缩写为Ph.Int), 现行版为第三版。
二、药品质量管理规范
我国对药品质量标准控制的全过程起指导作用的法定性文件有：
1．药品非临床研究质量管理规定（Good Laboratory Practice, GLP）GLP是为料提高药品非临床研究的质量, 确保试验资料的真实性、完整性和可靠性，保证人民用药安全而制订的，主要适用于为申请药品注册而进行的非临床研究。
2．药品生产质量管理规范（Good Manufacture Practice，GMP）是用于药品制剂生产的全过程、原料生产中影响成品质量的关键工序，是药品生产和质量管理的基本准则。主要包括无聊、中间产品和成品的内控标准和检验操作规程，制订取样和留样制度等。
3．药品经营质量管理规范（Good Supply Practice，GSP）是为保证经销药品的质量，保护用户、消费者的合法权益和人民用药的安全而制订的。主要包括药品进、存、销环节确保质量所必备的硬件设施，人员资格及职责，质量管理程序和制度及文件管理系统。
4．药品临床试验管理规范（Good Clinical Practice，GCP）是为了保证药品临床过程规范，结果科学可靠，保护受
第一章 药典概况与药品检验工作
[重点、难点、要点、基本概念]
一、中国药典的基本内容
中国要点的基本内容可分为凡例、正文、附录和索引四部分。1.凡例 是解释和使用《中国药典》的基本原则，并把与正文品种、附录及质量鉴定有关的共性问题加以规定，避免在全书中重复说明。凡例是药典的一个重要组成部分，分类项目有：（1）名称与编排：药典收载的中文药品名称均为法定名称；英文名称出另有规定外，均采用国际非专利药品（International Nonproprietary Names
for
Pharmaceutical Substances，INN）。
有机药物化学名称应根据中国化学会编撰的《有机化学命名原则》命名，母体体的选择英语美国《化学文摘》（Chmical Abstract，CA）系统一致；药品的化学结构式采用WHO推荐的“药品化学结构式书写指南”书写。
（2）检验方法和限度：药典收载的原料和制剂，均应按规定的方法进行检验；如采用其他方法，试验结果必须与药典规定的方法一致。
各品种纯度和限度数值，均包括上限和下限及其中间数值；如片剂的含量限度为95%~105%，不但包括95%和105%，还包括95%到105%之间的数值；再如原料要规定不得低于99%时，虽然未规定上限，但其上限不超过101%。
试验结果在计算过程中，可比规定的有效数值多保留一位，然后根据有效数字修约规则进舍至规定的有效位。
（3）标准品、对照品：是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，均由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应。标准品系指用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，一国际标准品进行标定；对照品出另有规定外，按干燥进行计算后使用。标准品和对照品均附有使用说明书，质量要求，有效期和装量等
（4）计量：滴定液浓度, 如盐酸滴定液(0.1mol/L)；试液浓度，如0.1mol/L 盐酸溶液。温度，如水浴温度至98~100℃；室温指10~30℃。百分比用%符号表示，如%（g/g）、%（ml/ml）、%（ml/g）、%（g/ml）。液体的滴数是指，在20℃时，1.0ml水为20滴。溶液后标记（1→10），指固体溶质1.0g或液体溶质1.0ml加溶剂使成10ml的溶液。
（5）精密度：称量或量取的量，均以阿拉伯数字表示，其精密度可根据有效数字位数来确定，如称0.1g，系指0.06~0.14g, 称2g，系指1.5~2.5g, 称2.0g，系指1.95~2.05g。
称定和精密称定，称定系指准确到所称重量的百分之一，精密称定系指准确到所称重量的千分之一。
量取和精密量取，量取系指可用量筒，取用量不得超过规定量的±10%；精密量取系指量取体积的精密度应符合国家标准对移液管的精密度要求。
(二)正文
正文部分为药品或制剂的具体质量标准，正文品种按中文药品名称的笔画顺序排列。药品质量标准的基本内容包括：性状、鉴别、检查、含量测定、类别、贮藏、制剂等。
（三）附录
1．附录组成：制剂通则、生物制品通则、一般鉴别反应、分光光度法、色谱法、理化常数、有关滴法和测定方法、一般杂志检查、制剂检查、抗生素微生物测定法、升压物质检查法、放射性药品检查法、生物鉴定统计法、试药余滴定液、制药用水、灭菌法和原子量表。
2．附录内容举例 附录有十九类，每类含有一项或多项内容： 附录Ⅰ 制剂通则，含有ⅠA~ⅠV共21 项。
附录Ⅱ 生物制品通则、附录Ⅲ 一般鉴别试验都只含一项。附录Ⅳ 分光光度法，含有A，B，C，D，E，F。
（四）索引
索引中文和英文，中文按汉语拼音排序；英文按字母排序。
（五）2000年版中国药典进展 1．药典凡例和正文部分的增修订
凡例中对标准中运算结果和限度进一步作出了明确规定；正文部分收载品种有较大幅度增加，共计2691中，其中新增加399种。
2．药典附录的增修订
一部为90个，其中新增10个，修订31个，删除2个；二部为124个，其中新增27个，修订32个，删除2个。
3．系列标准及配套丛书 《中国药典》英文版；《中国药典2000年版电子版》；《中国药品通用名》；《药品红外光谱集》；《临床用药须知》；《药典增补本》等丛书。
二、主要国外药典简介
（一）美国药典
凡例（General Notices and Requirements）
分为19项，依次为书名、法定名称及法定品种、原子量和化学式、缩略语、有效数字与允许偏差、附录、药典论坛、增补本、试剂标准、参照试剂、USP参比标准品、效价单位、试剂成分及工艺、检查和含量、处方和配方、保存、包装、贮藏和标签、植物和动物药、重量和度量以及浓度。
2．正文
USP（24）-NF（19）收载药物品种为世界第一位，收载3777个品种。
原料药标准组成为：英文名，结构式，分子式，分子量，化学名与CA登记号，含量限度，包装和贮藏，USP参考标准，鉴别，物理常数，检查，含量测定。制剂标准组成为：英文名，含量限度，包装和贮藏，USP参考标准，鉴别，物理常数，检查，含量测定。
3．附录
USP（24）附录分为： 检查和含量测定的一般要求，所用仪器
微生物试验和含量测定
一般检查和检定
生物试验和含量测定
化学试验和含量测定
物理试验和测定
一般信息
空气溶胶，乙醇测定法，密度，色谱法，颜色和消色，溶液澄清度，总有机碳量，水的电导率，凝固温度，物理试验和测定种类
容器等。
电泳法，质谱法，核磁共振法，分光光度法和光散射，X-射线衍射法。
原子发射化学合成装置，生物指示剂，颜色-仪器测定法, 法定品种的杂质，一般信息
剂型在体外和体内的等效性, 体内生物等效性指导
相-溶解度分析,片剂脆碎度方法的认证，制药用水
（二）英国药典
第一卷为原料药
BP(2000)第二卷为药物制剂、血液制品、免疫制品、放射药物制剂和糖类药物。
红外光图、增补内容和索引
凡例 第一部分内容说明欧洲药典品种；
第二部内容为了适用BP正文和附录的，共有31 条，如法定标 准，标准的表示，温度，砝码和测定，恒重，浓度表示，水浴，试剂，指示剂，溶解度，鉴别，检查和检定。
第三部分为Ph Eur的凡例，如检查和检定项下内容更细化了，包括范围，计算，限量，杂质限
量的表示，植物药和当量；列出 缩写、符号和国际体系的单位。2．正文 BP(2000)收载品种2663个,其中1361个来源于第三版欧洲药典，原料药标准：英文名，结构式，分子式和分子量，CA登记号，化学名称，作用与用途，含量限度，性状，鉴别，检查，含量测 定，贮藏，最后列出杂质的结构式和名称。
制剂标准：英文名，含量限度，性状，鉴别，检查，含量测定，贮藏，制剂类别。
3．附录 共分24类，如第2类为光谱法：紫外和可见分光光谱法；红外
和近红外光谱；荧光分光光度法；X-射线荧光光谱法和质谱法。
第3类为色谱法：TLC法；PC法；GC法；HPLC法；排阻色谱
法和电泳法。
（三）日本药局方 JP（14）分为两步： 第一部包括通则、制剂总则、一般试验法和各医药品。第二部包括通则、生药总则、制剂总则、一般试验法和各医药品，原子量表、附录和索引。原料药标准：日文名、英文名、结构式、分子式和分子量、性状、鉴别、检查，含量测定和贮法，少数品种列出有效期。制剂标准：日文名、英文名、含量限度、制法、性状，鉴别，检查，含量 测定和贮法。
第一部和第二部均有红外光谱附图，还有配套丛书《解说书》。
三、药品检验工作的机构和基本程序
1．药品检验工作的机构
国家级《中国药品生物制品检定所》简称《中检所》。
地方级 省市、地区、县的药品检验所。药品检验的基本程序
分为取样、鉴别、检查、含量测定、写出报告。[练习题与答案]
一、练习题 [A型题]
1．我国药典名称的正确写法应该是
A．中国药典 B．中国药品标准（2000年版）C．中华人民共和国药典
D．中华人民共和国药典（2000年版）
E．药典 2．我国药典的英文缩写
A．BP B．CP
C．JP
D．ChP
E．NF 3．英国国家处方集的缩写是
A．USP B．PDG C．BNF D．CA
E．USN 4．药品的鉴别是证明 A．未知药物的真伪
B．已知药物的真伪
C．已知药物的疗效
D．药物的纯度
E．药物的稳定性
5．测定土霉素的效价时，需要
A．化学试剂（CP）B．分析试剂（AR）C．对照品
D．标准物质
E．标准品 6．中国药典（2000年版）规定称取2.0g药物时，系指称取
A．2.0g B．2.1g C．1.9g D．1.95g～2.05g
E．1.9g～2.1g
7．中国药典（2000年版）规定称取0.1g药物时，系指称取
A．0.15g B．0.095g C．0.11g D．0.095g～0.15g
E．0.06g～0.14g [B型题] 1～4 A．ChP B．USP C．JP D．BP E．NF 1．美国药典 2．英国药典 3．日本药局方 4．美国国家处方集 5～8 A．附录
B．正文
C．凡例
D．通则
E．一般信息 5．药品的质量标准应处在药典的
6．对溶解度的解释应处在药典的
7．通用检测方法应处在药典的 8．制剂通则 [X型题] 1．检验报告应有以下内容
A．供试品名称
B．外观性状
C．检验结果、结论
D．送检人盖章
E．报告的日期
2．中国药典的内容应包括
A．正文
B．性状
C．凡例
D．索引
E．附录
3．美国药典第25版的正文包括
A．品名、来源或化学名
B．物理常数
C．包装和贮藏
D．参比物质要求
E．化学文摘登录号
二、答案精讲 A型题
：1.D 2.D 3.C 4.B 5.E 6.D 7.E B型题
：1.B 2.D 3.C 4.E 5.B 6.C 7.A 8.A X型题
：
1.ABCE
2.ACDE
3.ABCDE
第二章 药物的鉴别试验 [重点、难点、要点、基本概念] 一、一般鉴别试验的项目与原理 药物的鉴别试验包括性状和鉴别
1．性状（definition）包括：（1）外观：指药物的聚集状态、晶形、色泽以及臭、味等性质。（2）溶解度：是药物的一种物理性质，在一程度上反映了药物的纯度。
（3）物理常数：药典中收载的有：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度，酸值、皂化值、碘值、吸收稀疏。2．一般鉴别试验的原理（1）有机氟化物的鉴别原理：经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收为无
机氟化物，茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH4.3
溶液中形成蓝紫色络合物。（2）水杨酸盐的鉴别原理：利用酚羟基在中性或弱酸性条件下，与三氯化
铁试液生成配位化合物，在中性时呈红色，弱 酸性时呈紫色。
（3）芳香第一胺的鉴别：利用重氮化-偶合反应的原理。（4）托烷生物碱类的鉴别：该生物碱具有莨菪碱结构，有Vitali反应，显紫色。
（5）无机金属盐：钠盐、钾盐、钙盐的颜色反映。钠的火焰光谱线有589.0nm、589.6nm，故显黄色。钾的火焰光谱线有766.49nm、769.90nm，故显紫色。钙钠的火焰光谱线有622nm、554nm、442.67nm与602nm，故显砖红色。（6）无机酸根：氯化物、硫酸
盐等。
3．专属鉴别试验的原理（speciic identfication test）：例如苯巴比妥中苯环、司可巴比妥中双键、硫喷妥钠中的硫元素，可根据各自的特性采用专属反应进行鉴别。
二、鉴别方法
药物的鉴别方法要求专属性强、重现性好、灵敏度高，操作简便、快速等。常用的的鉴别方法有：
呈色反应鉴别法：三氯化铁、茚三酮、重氮化-偶合等。
沉淀生成鉴别法：金属离子、生物碱沉淀剂等。1．化学鉴别法 荧光反应鉴别法：药物本身荧光、与试剂产生荧光。
气体生成反应鉴别法：
测定生成物的熔点：
紫外光谱鉴别法：λmax，λmin；Aλ1/Aλ2；λmax，A； 2．光谱鉴别法
红外光谱鉴别法：压膜法；糊法；膜法；溶液法。
薄层色谱鉴别法 3．色谱鉴别法
气相色谱鉴别法
高效液相色谱鉴别法
4．生物学法 利用微生物或实验动物进行鉴别的方法。5．药物鉴别方法的新动向 仪器鉴别方增加如IR和HPLC法等。
三、鉴别试验的条件 溶液的浓度 溶液的温度 溶液的酸碱度 试验时间 干扰成分的存在
四、鉴别试验的灵敏度 1．反应灵敏度和空白试验
在一定条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即称为反应的灵敏度。常用最低检出量和最低检出浓度表示。
空白试验是指在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。
2．提高反应灵敏度的方法（1）加入与水不互溶的有机溶剂提取浓集
（2）改变观测方法：目视观测溶液的颜色，改为可见分光光度法。
第三章 药物的杂质检查
[重点、难点、要点、基本概念]
一、杂质和杂质限量检查(一)药物的纯度
1．药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯洁程度。2．药物纯度的评价：应把药物的形状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。
（二）药物中杂质的来源 1．杂质的概念 药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物质，称为药物的杂质。2．杂质的来源
一是在生产过程中引入 主要有两个方面：
二是在贮藏过程中引入 3．杂质的分类 按杂质的来源分为一般杂质和特殊杂质；按性质可分为信号杂质和有害杂质。一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐等。特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如阿斯匹林中的游离水杨酸，肾上腺素中的肾上腺酮。药物中的杂质按其性质还可以分为信号杂质和有害杂质。信号杂质一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。有害杂质，如重金属、砷盐、氰化物等，对人体有害，在药品标准中必须严格控制。
（三）杂质的限量检查 1．杂质限量的概念 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。2．杂质限量的计算 杂质限量的计算公式：
杂质限量 = 杂质的最大允许量÷供试品的量×100%
L = C×V/S×100% 例1．对乙酰基酚中的氯化物的检查：
已知：S = 2.0g×25/100；C = 10μg/ml；V = 5.0ml
求： L = ？
解：L = C×V/S×100% =
10×5.0/2.0×10-6×25/100×100% = 0.01% 二、一般杂质的检查方法
（一）氯化物的检查
1．原理 是利用氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液作用，生
成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊液比较，以判断供试品中氯化物是否超过限量。
Cl-+ Ag+
AgCl 2．条件：[Cl-] 0.05mg～0.08mg/50ml, 即相当于标准氯化钠溶液
5ml～8ml。
酸度 稀硝酸10ml/50ml。
温度 30～40℃ 3．干扰的排除
（1）供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中氯化物后过滤来消除混浊对氯化物检查的干扰。
(2）供试品有色：可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。即取两份供试品溶液，于其中一份中先加入硝酸银试液1.0ml，摇匀，放置10min，如显浑浊，可反复过滤，至滤液澄清，即得无氯化物杂质又具有相同颜色的澄清溶液，再在其中加入规定量的标准氯化钠溶液与水适量使成50ml，作为对照溶液；另一份中加入硝酸银试液1.0ml与水适量使成50ml，作为供试溶液，将两液在暗处放置5min后比较，即可消除颜色的干扰。
（二）硫酸盐检查法
1．原理 是利用SO42-在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用，生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供试品中硫酸盐是否超过限量。
2．条件：[SO42-] 0.1mg～0.5mg/50ml, 即相当于标准硫酸钾溶液
1～5ml。
酸度 稀盐酸2ml/50ml。3．干扰的排除
供试品有色：可采用内消色法。
（三）铁盐检查法
1．原理 是利用Fe3+在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵试液作用，生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后所显的颜色进行比较，以判断供试品中铁盐是否超过限量。
2．条件：[Fe3+] 0.01mg～0.05mg/50ml, 即相当于标准硫酸钾溶液
1～5ml。
酸度 稀盐酸4ml/50ml。3．干扰的排除
（1）当有Fe2+存在时，可加入氧化剂过硫酸铵氧化供试品中的Fe2+成Fe3+。
（2）当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。
（四）重金属检查法
重金属是指在实验室条件下与S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、酮、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内友易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。中国药典（2000年版）重金属的检查法一共收载了四种方法： 第一法为硫代乙酰胺法；第二法是将供试品在500~600℃在500炽灼破坏后，再按第一法检查；第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条件下用硫化钠作显色剂；第四法为微孔滤膜法，通过微孔滤膜过滤，使试验条件下生成的硫化铅沉淀富集于滤膜上，形成铅斑，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色，来判断供试品种的重金属是否超过限量。以下重点讨论第一法。
1．原理 是利用硫代乙酰胺在弱酸性溶液中与硫氰酸铵试液作用，生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后所显的颜色进行比较，以判断供试品中铁盐是否超过限量。
2．条件：[Fe3+] 0.01mg～0.05mg/50ml, 即相当于标准铅溶液 1～2ml。
酸度 稀盐酸4ml/50ml。3．干扰的排除
(1)供试品有色：可采用外消色法消除干扰。
(2)供试品有微量Fe3+：在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出硫，产生混浊影响
比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+氧化成Fe2+离子再检查。
（五）砷盐检查法
《中国药典》采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC）检查药物中的微量的砷盐。1.古蔡法
(1)原理：是利用锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应，生成具有挥发性的砷化氢，与溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在相同条件下所生成的砷斑比较，以判断供试品中砷盐是否超过限量。
(2)试剂的作用：碘化钾和氯化
亚锡的主要作用是将五价的砷还原成三价的砷；醋酸铅棉的作用是消除供试品可能含有的少量的硫化物。2.Ag-DDC法
(1)原理：是利用砷化氢与Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的银还原为红色胶态银，以Ag-DDC溶液为空白，于510nm的波长处，测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大于标准砷溶液的吸收度。(2)试剂的作用：同古蔡法。
（六）溶液颜色检查法 溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典（2000年版）收载有三种方法： 1.标准比色液进行比较的方法 2.分光光度法 3.色差计法
（七）易炭化物检查法 易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。常采用与标准比色液比色的方法进行检查。
（八）澄清度检查法
澄清度检查法是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊度标准液比浊的方法进行检查。
（九）炽灼残渣检查法 炽灼残渣检查法是检查有机药物中混入的各种无机杂质。常采用重量方法进行检查。
（十）干燥失重检查法 干燥失重检查法主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质。常采用重量方法进行检查。常用的方法有三种： 压恒温干燥法 燥剂干燥法 压干燥法
（十一）有机溶剂残留量测定法 有机溶剂残留量测定法主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂。
常采用气相色谱法方法进行检查。常用的方法有二种： 接进样法 空进样法
三、特殊杂质的检查方法
（一）利用药物和杂质在物理性质上的差异
臭味及挥发性的差异
例如黄凡士林中异性有机物检查：去本品2g，直火加热应无辛臭。
再例如浓过氧化氢中不挥发性杂质的检查：取本品10ml，水浴蒸干，在105℃干燥至恒重，残渣小于15mg。颜色的差异
例如磺胺嘧啶中有色杂质的检查：取本品2.0g,加氢氧化钠试液10ml溶解后，溶液应澄清无色，若显色与黄色3号比色液比较，不得更深。溶解行为的差异
例如吡哌酸检中不溶物的检查：双吡哌酸甲酯（Ⅰ）和吡哌酸甲酯（Ⅱ）均不溶于氢氧化钠试液。因此可通过溶液的澄清读来控制这些杂质。选光性的差异
例如硫酸阿托品中莨菪碱的检查：共识水溶液（50mg/ml）的选光度小雨-0.4℃。对光吸收性质的差异
（1）紫外分光光度法：①在一定的波长杂质有吸收，而药物无吸收；②杂质杂质紫外吸收光谱与药物紫外吸收光谱重叠；③药物在紫外区有明显吸收，而杂质吸收很弱货物吸收。
（2）原子吸收分光光度法：主要用于药物中金属盐等杂质的检查，如曾用于维生素C、硫酸庆大霉素和安痛定注射液中Na、K、Ca、Mg含量测定。
（3）红外分光光度法：主要用于药物中无效和低效晶型的检查，如甲苯米唑中A晶型的检查。
（4）荧光分析法：例如利血平中氧化产物的检查，是根据利血平纯品无荧光，其氧化产物有荧光。
吸附或分配性质的差异（1）TLC法：①杂质对照法；②高低浓度对照法。
（2）PC法：主要用于极性大的药物的杂质检查，如地高辛、盐酸苯乙双胍中有关杂质的检查。（3）HPLC法：①分面积归一化法；②不加校正因子的主成分自身对照法；③加校正因子的主成分自身对照法；④内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量；⑤外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量。（4）GC法：同HPLC法。
（二）利用药物和杂质在化学性质上的差异
1．酸碱性的差异：①规定消耗滴定液的体积；②pH值测定法；③指示剂法。
2．氧化还原性质的差异：利用药物与杂质氧化还原电位的差异进行检查，如氯化物中碘化物或溴化物的检查。
3．杂质与一定的试剂反应产生沉淀：如生物碱中其他生物碱的检查，多采用此法。
4．杂质与一定的试剂反应产生颜色：利用药物重的杂质与某些试剂发生氧化化、络合、偶合等显色反应，进行药物中杂质的鉴别。
5．杂质与一定的试剂反应产生气体：利用此法可检查药物中的砷、硫、碳酸盐、氨盐、氰化物等。例如氰化物的检查中国药典采用：①改进普鲁士蓝法；②气
体扩散-三硝基苯酚法。6．药物经有机破坏后检查杂质：①硒的检查；②氟的检查。
二、练习题 [A型题]
1．含锑药物的砷盐检查方法为 A.古蔡法
B.碘量法 C.白田道夫法
D.Ag-DDC E.契列夫法
2．药物中杂质的限量是指 A.杂质是否存在 B.杂质的合适含量
C.杂质的最低量
D.杂质检查量
E.杂质的最大允许量
3．中国药典中收载的砷盐检查方法为
A.摩尔法
B.碘量法
C.白田道夫法
D.Ag-DDC E.契列夫法 [B型题]
A.稀HNO3 B.硫代乙酰胺试液
C.BaCl2试液 D.Ag-DDC试液
E.NH4SCN试液 1.铁盐检查 2.硫酸盐检查 3.氯化物检查 4.砷盐检查
A.AgNO3试液 B.硫代乙酰胺试液 C.BaCl2试液 D.KI-SnCl2试液
E.NH4SCN试液 5.重金属检查 6.硫酸盐检查 7.氯化物检查 8.砷盐检查 [X型题]
1．一般杂质检查包括 A.氯化物检查
B.硫酸盐检查
C.重金属检查
D.砷盐检查
E.铁盐检查 2．干燥失重检查法有： A.压恒温干燥法 B.燥剂干燥法 C.减压干燥法
D.摩尔法
E.白田道夫法
二、答案精讲 [A型题] 1．C 因为含锑药物的砷盐检查方法为白田道夫法，因为锑可被还原成锑化氢，可与溴化汞试纸生成题斑，干扰砷斑的检查，不能用古蔡法检查。2.E 3.D [B型题] 1.E 2.C 3.A 4.D 5.B 6.C 7.A 8.D 因为AsO43-还原成AsH3比较慢, KI-SnCl2试液可将AsO43-还原成AsO33-, 然后再还原成AsH3。[X型题] 1.A B C D E
2.A B C 因为干燥失重检查方法只有三种，即只能选A，B，C。
