第一篇：交叉配血操作流程

交叉配血血标本采集操作流程

用物：

常规消毒盘一个，采血针头、止血带、试管（浅紫色）、小垫、用血申请单、血型检验报告单、试管标签、医嘱变更单、交叉配血登记表、病历、手套、手消毒液

评估着装，洗手。现在接到医嘱要为30床张丽贫血血色素低至60g/L的病人进行静脉输血。输血前要先进行交叉配血血标本采集。双人核对医嘱。核对内容（用血申请单、血型检验报告单、试管标签、变更单，患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、凝血四项和免疫三项结果均无异常，患者已经签定输血知情同意书）核对完毕。

拿病历到病房评估病人。进病房后核对床头卡和床号。

护士：阿姨你好，我是你今天的主管护士，我叫XXX，你可以叫我XX。请问你叫什么名字？ 病人：张丽。

护士：可以给我看一下你的手腕带吗？ 病人：可以。

查看病人手腕带.护士：张阿姨你好，请问你现在觉得怎么样了？ 病人：有点头晕

护士：哦，这位是你的家属吧，那我就跟你和你的家属先说一下，头晕是跟你贫血有关，你早上抽血血色素只有60g/L，现在医生开了备血医嘱，准备要给你输血，通过输血可以缓解你的症状，请问你以前输过血吗？ 病人：没有

护士：请问你以前有没有对什么过敏（药物、食物等）？ 病人：没有

护士：谢谢。为了输血安全，每次输血前都要进行交叉配血试验，交叉配血试验就是从你身体抽出2ml的血液和献血者的血液进行配合试验，如果两者无发生凝集反应，就可以输血了。请问你明白了吗？ 病人：明白

护士：张阿姨，可以先让我检查一下你的肢体及血管吗？ 病人：可以

护士：肘关节这里的皮肤没有破损，无瘀斑。血管弹性好，血管充盈，待会我就在这个位置给你抽血好吗？ 病人：好的

护士：张阿姨，请问在抽血之前需要我协助你去大小便吗？ 病人：不用

护士：好的。那请你稍等一下，我先回去准备一下用物。待会就过来帮你抽血。病人：嗯。

评估环境，光线充足，清洁安静，适合无菌操作，便于抢救。回到治疗室，检查用物在有效期内可以使用，洗手，戴口罩。双人携病人和变更单到病房。

护士：张阿姨你好，我是刚刚来过的护士，要给你抽血的。请问你叫什么名字？

病人：张丽

护士：能让我看一下你的手腕带吗？ 病人：嗯

一人核对手腕带，一人核对床头卡。

护士：张阿姨，我现在准备要为你抽血了，请问你准备好了吗？ 病人：好了。

双人再次核对。核对内容（用血申请单、血型检验报告单、试管标签、变更单，患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、凝血四项和免疫三项结果均无异常）核对完毕。

护士：阿姨，请问这个体位你觉得舒服吗？ 病人：舒服。

在患者肘关节下放置一小垫，选择静脉，扎止血带，第一次消毒，松开止血带，戴手套，扎止血带，嘱病人握拳，第二次消毒（范围大于6cm），开抽血针头。护士：阿姨，我现在要为你抽血了，进针的时候会有的痛，请你放松，不要紧张。我会尽量把动作放轻柔。

进针，抽完血后松开止血带，用棉签按压穿刺点。将试管的血液摇匀（5次）帮患者按压穿刺点五分钟。直到穿刺点不出血。

脱手套，洗手，核对内容（用血申请单、血型检验报告单、试管标签、变更单，患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号）核对完毕。无误后，把标签贴在试管上，在用血申请单上签名，将用血申请单圈好试管。

护士：阿姨，现在针眼没有出血了。请问这个体位你觉得舒服吗？（整理床单位）血液标本我会尽快送去检验科，请你注意观察针眼处有无红肿出血，疼痛或者抽血后其他的不舒服等情况，如果有任何不适请按床头铃，我会马上过来处理。谢谢你的配合。

回到治疗室叫人立刻把血标本送检验科。垃圾按医疗废物分类处理，洗手，在变更单上签名及时间，同时于交叉配血登记本上签名。

静脉输血操作流程

用物准备：病历、变更单、0.9%氯化钠注射液、输血器、常规消毒盘，输血观察卡，急救盒，消毒液、体温表、输血不良反应单、无菌盘、变更单

今天有一个贫血的病人，血红蛋白浓度为60g/L，医生开医嘱需要输去白细胞悬浮红细胞2U。

带用物和病历进病房对患者进行输血前评估。

护士：阿姨你好，我是你今天的主管护士，我叫XXX，你可以叫我XX。请问你叫什么名字？ 病人：张丽。

护士：可以给我看一下你的手腕带吗？ 病人：可以。

查看病人手腕带.护士：张阿姨，刚才为你抽取的血液已经送检了，检验科已经配好血，输血前要为你量一下体温，我放这里可以吗？ 病人：可以

护士：因为体温超过38.5度我们就要根据你的情况才能给你输血，请问你以前有输过血吗？ 病人：没有

护士：有没有对药物或者什么东西过敏？ 病人：没有

护士：那你知道自己是什么血型吗？ 病人：B型。

护士：对，你是B型血。输血就跟输液一样。也是从静脉通道输进去的，输血前后都要用生理盐水进行冲管，通过输血可以给你补充血容量，纠正贫血，改善你的头晕症状，增强机体抵抗力。输血知情同意书的内容你和你的家属都已经了解了吧？ 病人：嗯

护士：那你应该知道输血可能会引起过敏反应，疾病的传播，比如乙肝，你知道了吗？ 病人：知道

护士：啊姨，体温计可以拿出来了。体温是36.8度，属于正常体温，你可以输血了。张阿姨，可以先让我检查一下你的肢体皮肤及血管吗？ 病人：可以

护士：这里的皮肤没有破损，无瘀斑。血管弹性好，血管充盈，待会我就在这个位置给你穿刺好吗？ 病人：好的

护士：输血的时间有点长，请问在输血之前需要我协助你去大小便吗？ 病人：不用

护士：好的。那请你在病床上稍等一下，我先回去准备一下用物。待会就过来帮你输血。

评估环境，光线充足，清洁安静，适合无菌操作，便于抢救。

检验科来电说血已经配好了。持病历，无菌盘到检验科取血。核对内容（患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、血型检验报告单、变更单、交叉配血试验结果、血液种类及质量、血袋号及血液有效期），在发血报告单上领血者及核对者处签名。

回到治疗室，检查用物在有效期内可以使用，洗手，戴口罩。双人在治疗室核对(患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、血型检验报告单、变更单、交叉配血试验结果、血液种类及质量、血袋号及血液有效期），填写好输血观察卡、输血不良反应单眉栏。双人携用物到病房。

护士：阿姨你好，我是刚刚来过的护士说要给你输血的，请问你叫什么名字？ 病人：张丽

护士：能让我看一下你的手腕带吗？ 病人：可以

按静脉输液方法建立静脉通道，挂上冲管液，排气，在患者手下放置一小垫，选择静脉，扎止血带，第一次消毒，松开止血带，戴手套，撕输液贴，扎止血带，嘱病人握拳，第二次消毒（范围大于6cm），护士：阿姨，现在我准备为你穿刺了。会有点痛，请忍耐一下。病人：好的。

穿刺，贴好输液贴。收好小垫。调滴速。输血前再次核对（患者的床号、姓名、年龄、性别、住院号、血型检验报告单、变更单、交叉配血试验结果、血液种类及质量、血袋号及血液有效期）。该次核对双人在床边核对。

将血液轻轻摇匀，接血袋，调滴速。洗手，输血速度宜先慢后快（前15分钟20滴/分，无不良反应后，根据病情及血液成分调节速度），输血后再次核对医嘱，填写输血巡视卡。

护士：阿姨，我已经帮你输上血了，穿刺的手请不要乱动，我把床头铃放在你身边，有不舒服请及时按铃告诉我。我也会定时过来巡视你的。谢谢你的配合。

在输血观察卡上填写输血开始时间，滴速，患者状况等。

护士：阿姨，十五分钟已经到了，请问你有没有什么不舒服呢？（检查手局部情况）病人：没有

护士：那我就给你调快滴速，每分钟四十滴。请你不要随意调快滴速，以免引起不适，输血的肢体不要剧烈运动，如果局部有红肿胀痛，滴速明显减慢以及其他不适，请你及时按铃通知我们。我也会随时过来巡视你。在输血观察卡上填写滴速。

护士：阿姨，如果没有什么事情那我先回去了。等会再来看你。输血完毕。用生理盐水冲管，写上输血完毕时间。

护士：啊姨，血已经输完了，请问你有没有什么不舒服。病人：没有。

观察患者全身及局部情况，洗手，记录。

护士：那就好，如果你觉得不舒服的话请及时告诉我们。谢谢你的配合。整理用物，床单位，协助患者取舒适卧位。护士：如果没什么需要我先回去了。

回到治疗室，签名（不良反应单，医嘱单，护理记录、领血单）

第二篇：血型及交叉配血检验

红细胞血型

血型：是指各种血液成分的遗传多态性，它受独立的遗传基因所控制。由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系称血型系统。

目前已发现的红细胞抗原有400余种，被归纳为27个血型系统。其中发现最早，且与人类输血关系最密切的是ABO血型系统，其次是Rh血型系统。

ABO血型系统

现知ABO遗传座位在第9号染色体长臂上，A基因的产物是N-乙酰半乳糖转移酶，它能把α-N-乙酰半乳糖分子接到一个前身物糖蛋白上，产生A抗原决定簇；B基因的产物是半乳糖转换酶，它能把α-D-半乳糖接到前身物糖蛋白上并产生B抗原决定簇；O基因不编码酶，因此是一个无效等位基因，故O型又被称为缺失型(nun type)；AB杂合子分别由A和B基因产生AB两种酶。

不同个体红细胞膜抗原经上述某种遗传基因作用，形成A、B、O、AB四种正常型别和许多亚型。它们的分型原则是：红细胞上有A抗原，血清中有抗B抗体的为A型，红细胞上有B抗原，血清中有抗A抗体的为B型；红细胞上有A和B两种抗原，血清中不含抗A和抗B的为AB型；红细胞上没有A和B抗原，血清中却有抗A和抗B抗体者为O型，H抗原存在于ABO各型红细胞上，称为H物质(基础抗原)，但以O型最多。ABO血型系统的共同特点是红细胞上含有某种抗原，血清中就不存在对应的天然抗体。反之，血清中含有某种天然抗体，红细胞上就不存在其对应抗原，此规律是Landsteiner在1900年首先发现的，故称Landsteiner定律。根据此规律用标准抗血清检测红细胞上的抗原(正定血型)，或用标准红细胞检测被检者血清中抗体(反定血型)来判断血型。

ABO血型鉴定的应用价值主要在于：

(1)在输血中寻找合适供体；

(2)在皮肤及肾移植上的供体选择；

(3)在不孕症和新生儿溶血症病因研究中的应用；

(4)ABO血型检测还可用于亲子鉴定、可疑血迹、精斑、毛发等的鉴定，以及与某些疾病相关的调查等。

另外，在ABO血型系统中尚存在一些变异型，简称之为亚型。如A型中的A2、A3、Ax、Am等；在B型中的B2、B3、Bx、Bm等。它们共同的规律是红细胞上的抗原较弱，少数个体尚存在有不规则的同种抗体。有些亚型抗原甚至弱到与抗血清的反应难以用肉眼观察的地步，必须用吸收和放散的方法证实其抗原抗体反应的存在。

了解亚型的重要性在于：

(1)易造成误定血型，可使配血不合；

(2)有额外抗体(如抗A、抗B)者常使同型间配血发生困难；

(3)误输入不相合的亚型血(抗原)，可使缺乏此抗原的受血者产生免疫性血型抗体，造成溶血的潜在威胁。Rh血型系统

Rh血型常见的抗原(又称因子)有5种(理论上推测有6种)，分别是D、C、E、c、e(d未能证实)。尚有一些变异型，如Du、Cw、En等。目前能识别的Rh系统抗原共4 3种。与ABO系统不同的是此系统很少有天然抗体，大部分抗体均由免疫刺激产生。

Rh系统中D抗原的免疫性最强，正常D阴性受血者接受一次D阳性红细胞输血后，产生抗体的机率>50％。因此，临床上往往以D抗原的存在与否定为Rh阳性或阴性。我国汉族人D阴性的比率较低，约占人群的0.2%～0.4%。因而Rh系统抗D所致的溶血反应与新生儿溶血病的比率远低于白种人，但输血和妊娠中不相合抗原所致的抗E、抗C、抗Ce、抗cE并非少见，应引起临床医生的高度重视。

由免疫刺激而产生的抗体多为小分子IgG类，在盐水介质配血试验中，与相应抗原的反应仅表现为“致敏”，肉眼见不到凝集现象，必须选用木瓜酶(菠萝酶)或抗人球蛋白介质等检测手段才能发现不相合抗体。Rh血型检测在临床上的意义

1．Rh血型与输血的关系

因为正常人血中一般不存在Rh天然抗体，所以在第一次输血时，往往不会发现Rh血型的不合。Rh阴性的病人输受了Rh阳性的血液后，可产生免疫的抗Rh抗体，当病人再次输受Rh阳性的血液时，就可以出现溶血性输血反应，如果将此病人的血液再输给另外一个Rh阳性的人，由于免疫性抗体不能被中和，也可以致敏受血者的红细胞而产生溶血，在西欧各国大部分输血反应都是由抗D抗体引起。

2．与妊娠及新生儿溶血病的关系

Rh阴性的妇女如孕育Rh阳性的胎儿，胎儿的红细胞可经过有损伤的胎盘进人母体，刺激母体产生免疫性抗Rh抗体。此抗体可以通过胎盘进入胎儿血液循环，与胎儿的Rh阳性红细胞产生抗原抗体反应，破坏胎儿红细胞，甚至毒害中枢神经细胞(核黄疸)，造成新生儿溶血性贫血、流产或死产；如果孕妇需要输血，又不慎输给了Rh阳性血，也能造成严重的溶血反应。由于Rh系统存在天然抗体的机率很低，如果孕妇在受孕Rh阳性胎儿前，没有输过Rh阳性的血液，也没有注射过含有Rh抗原的血清、全血或血液制品，在第一胎时由于体内抗体效价不高，一般可以正常分娩、存活。如果孕前接受过含Rh抗原的注射或输血，第一胎就可以出现新生儿溶血病(也有少数人没有Rh抗原的接触史，而第一胎就发病)。一般胎次越多，孕妇血中的免疫性抗体效价也越高，对胎儿的损害也越严重。但是也有Rh阴性妇女，妊娠多次，没有一个胎儿出现新生儿溶血病。因此，母体在什么情况下才能产生免疫性抗体，至今还不完全明了。

3．Rh抗体可以出现在乳汁、腹水、羊水等体液中，如果羊水中抗体的滴度达到1：64时，说明胎儿有受到Rh抗体严重侵犯的危险，所以检查羊水中的Rh抗体，可以作为了解胎儿现状的一种指标。

血小板血型

血小板血型抗原有两大类：一类主要存在于血小板膜糖蛋白上的特异性抗原；另一类是与其它血细胞所共有，包括HLA I类抗原和A、B、H、Le、I及P抗原。

已报道的血小板特异性同种抗原(血小板特异性抗原)系统至少有11个。按发现的时间顺序排列如下：Duzo、PIA(ZW)、PIE、Ko(Sib)Bak(Lek)、Yuk(Perl)、Br(Hc、Zav)、PLT、Nak、GoV和Sr。其中Duzo自首次报道后未再有进一步研究。而PIE和Nak抗体的先证者已被发现分别是血小板糖蛋白(GP)Ib缺陷的巨血小板综合征患者或GPⅣ缺陷者，因此这两种抗原应列入同族抗原的范围。PLA、Ko、Bak、Yuk、Br、GoV等系统都已被证实由常染色体双等位基因以共显性模式控制。其余抗原系统也为常染色显性遗传，但是否为双等位共显性模式有待证实。

检测血小板抗原抗体反应的方法有血小板凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白消耗试验、免疫荧光试验等。

血小板抗体多为获得性免疫抗体、这种抗体会导致许多免疫性血小板疾病的发生，如原发性血小板减少性紫癜、新生儿血小板减少性紫癜、自身免疫性贫血伴血小板减少症综合征)、输血后紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜等。多次输注抗原不同血小板时所产生的抗血小板抗体，也可导致输人血反应、血小板输注无效和血小板减少症等。

输血前相容性检查

血型是一个非常庞大而又复杂的系统，加之某些疾病过程中还会出现血型暂时性变异，为了防止输入血型不合的血液，在输血前作相容性检查，常规须作交叉配血试验，即将供血

者的血球和血清分别与受血者血清和血球进行交容反应，观察他们之间的相容性。交叉配血试验的目的在于： 1．发现ABO血型鉴定的错误

如将A型或A亚型献血员误定为O型，当与O型病人交叉配血时，患者血清与献血员红细胞即可出现凝集，从而避免严重的溶血性输血反应。

2．发现不规则凝集素

如含抗A 1不规则凝集素的A 2型血清，与A 1型献血员红细 胞配血时，可出现凝集，这种不规则凝集一般为冷凝素，如效价不高影响不大，但若为免疫性抗体，3 7℃条件下效价较高，就必须选用亚型相同的血液，否则可产生溶血性输血反应。3．发现其他血型抗体

如抗P1、抗H等天然抗体和抗Rh等免疫性抗体，虽然输人的血液ABO血型相同，但Rh或其他血型不同，同时能引起严重的溶血性输血反应。交叉配血的方法：

1．无输入史及异常妊娠史者，可只作盐水配血。

2．凡有输血反应史和原因不明的流产史或生育过有新生儿溶血病婴儿的妇女，皆可有免疫性抗体。应用木瓜酶、抗人球蛋白法等不完全抗体配血法。

3．病人在48小时内输入5L或更多血时，叫做大量输血，此时要多个献血员供给血液，如果献血员之间有不规则抗体或ABO系统以外的抗体，也能互相作用，引起不良输血反应，此时应作大量输血的平板配血法。

4．对多发性骨髓瘤、进行性结核病、肝病及输受过右旋糖酐的病人，避免假阳性，最好也作抗人球蛋白配血。

同型之间交叉配血不合时的处理：

1．与个别同型献血员不能配合，可另选同型献血员进行配血。

2．当病人与多个献血员配血不合时，如为盐水介质配血不合，应考虑到：

(1)ABO血型错误，须用正规方法复查血型；

(2)是否ABO亚型不合，并含有不规则凝集素，应作亚型和不规则抗体的检定；

(3)是否有非特异性凝集，如红细胞线串状形成、寒冷凝集、自身免疫性温性抗体凝集、T凝集与H凝集、类B抗原凝集等，用相应方法进行确证。如为不完全抗体配血法阳性，应考虑Rh血型不同或其他系统免疫性抗体的存在。

第三篇：交叉配血法验证鱼类血型

交叉配血法验证鱼类血型

Cross matching blood method validates fish blood type

邓韩涛2009308200608水族090

3摘要本试验中通过抗体来区分红细胞膜上的抗原的方法来证明鱼类血型存在。先用不同的浓度梯度实验找出最适合该实验的红细胞悬液浓度，然后按照该浓度配制红细胞悬液，放于冰箱冷冻待用。再制作血清，静置后离心，上清液即为血清。最后用红细胞悬液与血清进行交叉配血，观察是否发生凝集现象，从而来判断鱼类是否存在血型。

关键字 血型 红细胞悬液 血清 抗原 抗体 交叉配血

血型指红细胞膜上存在的特异性抗原的类型。正常情况下，红细胞是均匀分布在血液中的，如果将血型不相融的两个个体的血滴在玻片上混合，红细胞即出现凝聚成团的免疫反应，在补体作用下，红细胞的凝集伴有溶血，其凝集本质是抗原—抗体反应。红细胞表面的抗原即特异性糖蛋白或糖脂为凝集原，血清中的能将红细胞膜上凝集原引起凝集反应的特异抗体为凝集素。同种血型的抗原抗体不发生凝集反应，而相异血型则发生。本试验中通过抗体来区分红细胞膜上的抗原的方法来证明鱼类血型存在。先做一个浓度梯度实验找出最适合该实验的红细胞悬液浓度，然后按照该浓度配制红细胞悬液，冷冻，再分别制作血清，静置后再离心，最后用红细胞悬液与血清进行交叉配血，观察是否发生凝集现象，从而来判断鱼类是否存在血型。证明鱼类血型存在有着重要的实际意义：进行鱼类血统登记，为鱼类建立准确可靠的系谱资料，能够防止血统混乱，保证育种工作的可靠性，减少繁殖配种工作的误差。选择鱼类经济性状，可以利用血型与生产力，抗病力之间的关系，作为优良个体选育和品种改良的依据。在鱼类分类上的应用，用血清蛋白中的不同抗原作为种类鉴别的辅助特征。判别鱼类亲缘的远近。

一 研究内容

将异体鲫鱼的血清与红细胞混合，观察是否发生凝集反应。

二 研究对象

鲫鱼4条

三 实验设备及药品：

2ml注射器5支，尖头滴管8支，试管20只，玻璃滴定板4片，解剖盘1个，显微镜1台，试管架2个，纱布，50ml烧杯1个，500ml烧杯1个，镊子1把，记号笔1只，鱼用生理盐水，离心机，冷冻箱，1000ul移液枪一支，棉花

四 实验方法与步骤：

（一）按下列药品制备1000ml鱼用生理盐水

NaCl：5.9g、KCl： 0.25g、CaCl2： 0.28g、MgSO4.7H2O： 0.29gNaHCO3：2.1g、KH2PO4：1.6g加蒸馏水溶解定容至1000 ml

（二）取血

将鱼体用纱布包住，侧卧于解剖盘中，在鱼尾部（腹鳍和尾鳍之间）侧线下1cm处用镊子去除少许鳞片，将注射器垂直插入肌肉，穿到脊椎骨后，稍往下方移动，插入尾静脉内，轻轻抽取注射器，让血在负压作用下自然流入注射器内。

（三）制备适宜浓度的红细胞悬液。

选择一条鱼的血液，分别滴一滴血液到加有0.4ml,0.8ml,1.0ml,2.0ml鱼用生理盐水的小试管中制备红细胞悬液，分别编号为a、b、c、d,静置五分钟，观察溶液凝聚情况。结果显示c管中凝聚现象最不明显，编号血细胞1。重复上述步骤，按照c管的浓度配制其他三条鱼的红细胞悬液，并分别编号2、3、4。将1,2,3,4号管放入4℃的冰箱里冷冻3到4小时，备用。

（四）制备血清

剩余血液注入另一只试管中，不加抗凝剂，放到1500r/min的离心机中离心30分钟，然后取出，吸取上清液，分装备用，分别编号血清1，2,3,4。

（五）、交叉配血

1、取玻璃滴定板4块，编号1，2，3,4，在1号板上四个孔里分别滴一滴1号鱼的红细胞悬液，2，3,4号板重复上述操作分别滴加2,3,4号红细胞悬液，2、将1号鱼的血清依次滴一滴到4块玻片的第1孔鱼红细胞悬液中，将2,3,4号鱼的血清重复上述步骤滴一滴到3块玻片的2-4孔鱼红细胞悬液中。

3、放置10-30min后观察，如肉眼不易观察则使用显微镜观察。

五 实验结果与分析

“＋”——表示出现凝聚现象，“—”——表示没出现凝聚现象, “*”——表示无实验结果。

注：第三组血清实验由于第三条鱼所取血清过少，吸取的血清中含有红细胞，所以未看到实验结果。

结果分析：

1.由于实验误差的原因，导致一，二，四组实验都没发生凝集现象，所以可能导致实验失败。

2.在存在的实验误差是在允许的范围内，而导致一，二，四组没有发生凝集，可能证明鱼类不存在血型。

3.由于离心所得血清过少导致现象不足以观察。

误差分析：由于实验条件的问题，鱼类种类不多，不能具有普遍性。另外操作过程存在错误，尤其取血环节花费大量时间，可能对实验会有影响。

六、清洗并整理实验器具及材料

参考文献：

杨秀平，《动物生理学实验》，第1版，北京，高等教育出版社，2004

注：实验设备及药品：

10ml注射器4支，尖头滴管8支，试管20只，双凹玻片6片，解剖盘1个，显微镜1台，试管架2个，纱布，50ml烧杯1个，500ml烧杯1个，大剪刀1把，镊子1把，记号笔1只，鱼用生理盐水.

第四篇：交叉配血和定血型的注意事项

交叉配血和定血型的注意事项

一、操作技术错误（最常见）

二、红细胞标本问题

1、未加入抗体或血清

2、实验温度（37℃凝集会下降）

3、未识别溶血

4、血清与红细胞比例不当

5、离心速度、时间不够

6、使用失效或错误试剂

7、实验结果记录、解释错误

8、离心速度过大、时间过长

9、使用了受到细菌污染的试剂

10、试验器皿不干净

11、实验结果记录、解释错误

患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞

某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集反应

红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗－A、抗－B试剂可能与这些异常的红细胞反应 使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗－A、抗－B试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应

患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致

红细胞表面包被IgG类抗体

三、血清标本的问题

小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。

免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱

4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱，一般只测正定 血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特异凝集。

血清中含抗－A、抗－B以外的其他红细胞抗体，如抗－M、抗－I等。

患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体

大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗－A、抗－B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A、B抗原位点，不发生凝集

四、分析和处理

1、重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误

2、查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史

3、彻底洗涤标本或试剂红细胞

4、应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞

5、分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰

6、室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原抗体反应

7、做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰 意外的血清学反应所致的ABO正反定不符 抗体太弱或消失

非正常高浓度的抗－A、抗－B可引起前带现象 A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗－A1 患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集

冷自身抗体，如抗－I、抗－IH、抗－IA等 自身免疫性温型抗体 同种抗体/意外抗体

五、ABO正反定不符及其处理

1、抗体太弱或消失

如新生儿、老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年龄和诊断

2、非正常高浓度的抗－A、抗－B可引起前带现象，导致假阴性,将血清稀释或用EDTA（2.5％）处理可消除

3、A2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗－A1, 抗－A1只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞

4、患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集

将血清用生理盐水稀释3倍或用盐水替换技术可消除

5、冷自身抗体，如抗－I、抗－IH、抗－IA等(自凝)（1）所有试剂及细胞37℃孵育，37℃下判读结果（2）将冷自身抗体吸收

（3）将血清用0.01mol/L DTT处理和再定型

6、自身免疫性温型抗体

自身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自身抗体，37℃反应比室温强

血清能凝集自身和其他各型红细胞，若红细胞上吸附自这种自身抗体，在自身或他人血清中均可出现凝集，正定被误认为AB型，反定被误认为O型。

用递增温度（22℃，37℃，45℃）洗涤红细胞后再做血型鉴定

7、同种抗体/意外抗体

室温下抗-P、抗-M、抗E等，可能出现意外反应，干扰ABO血型鉴定

抗体特异性抗体鉴定，选择抗原阴性的红细胞做反定

六、应用举例

多发性骨髓瘤致ABO血型鉴定困难1例 多发性骨髓瘤（MM）：

一种恶性浆细胞疾病，大量分泌异常的单克隆免疫球蛋白(M 蛋白),影响红细胞表面负电荷状态,血清蛋白浓度和比例异常,A/G比例失调,红细胞呈缗钱状非特异性聚集,给血型鉴定带来一定的困难。

血型血清学检查

正定： A型，RhD（＋）反定： O型 直抗：（－）抗筛：（＋）处理

1、吸收试验

6次洗涤后的患者压积红细胞加等量的抗－A、抗－B血清（1:128）4℃ 1h，离心，取上清，测吸收液的抗－A、抗－B效价

抗－A降低明显，抗－B 1：128

2、放散试验

吸收后的患者RBC用NS洗涤6次＋等量的NS，56℃ 10～15min，放散液与5％标准 A、B RBC反应，Ac:++ Bc:Bc:++

说明患者血清中有抗-B，无抗-A 患者血型最终确定为A型 RhD（＋），输注2U 经过筛选的A型悬浮RBC后，未见任何不良反应。

第五篇：血型鉴定与交叉配血制度

血型鉴定与交叉配血制度

1．病人急需鉴定血型或交叉配合时，医生应在检验单上注明“急”字，并注明时间到分。

2．血型鉴定包括ABO血型和Rh(D)血型，两人核对操作，正反定型相符，方可报告。

3．交叉配血试验的血样标本必须是输血前3天之内的。

4．输血科工作人员必须认真核对申请单、受血者和供血者的血样，复查受血者和供血者ABO血型，Rh(D)血型，正确无误后再进行交叉配血。5．凡输注全血、浓缩RBC、洗涤RBC、冰冻RBC、浓缩WBC、浓缩血小板、机采血小板，都应做交叉配血试验，输注血浆(普通浆、冰冻血浆)也应做次侧配血试验。

6．血库必须严格按照实验规程操作，认真仔细做好交叉配血试验，两人核对操作相符，方可报告，并详细填写好“交叉配血报告单”，报告单上必须双人签名，时间精确到分钟。

7．交叉配血合格后，受血者与供血者的血样及主侧、次侧管均应放入2～6℃专用冰箱内至少保存7天，以备对输血不良反应追查原因。

8．对于手术上或其他急诊大输血时，输血科应先交叉配合1~2袋血并及时送往病室或手术室，然后再交叉配合剩下的血液。