第一篇:临床微生物学检验的目的和要求
(一)临床微生物学检验的目的1.为临床感染性疾病的诊断提供病原学依据。
2.为临床感染性疾病的治疗提供参考用药的信息。
3.为医院感染提供病原微生物及其耐药性动态信息。
4.改进或更新临床微生物学检验的方法。
(二)临床微生物学检验的要求
1.快速、准确地提出检验报告。
2.检验人员必须有较丰富的微生物学基础知识和熟练、正确的操作技能,必须养成有菌观点和无菌操作的习惯。
3.临床微生物学检验必须进行全面质量控制,并参加和接受质量控制考核。
4.重视实验室消毒灭菌工作。
(三)诊断试验的选择原则
1.选择有鉴定价值的试验:要对两种细菌进行鉴定,须选择一项两种菌呈现绝然不同结果的试验,即一种菌呈现阳性(阳性反应的菌株阳性率须大于90%),另一种菌为阴性(阴性反应的菌株阳性率应小于10%),这项试验才有鉴定价值。否则,就没有鉴定价值。
2.选择简易、快速、方便的试验:①鉴定一种细菌可能有多种特异的方法,没有必要逐一进行试验,只选择其中一或两种达到目的即可,多选无意义。如金黄色葡萄球菌凝固酶试验、耐热DNA酶试验、甘露醇分解试验均阳性,只选较简单的凝固酶试验就足够了。②选择操作简便、快速的方法。③选用复合培养基,一次操作可同时看几个生化反应,如克氏双糖铁(KIA),动力靛基质脲酶(MIU)等。
3.综合考虑试验的敏感性和特异性:敏感性=所有阳性结果数/所有感染病人数,试验敏感性越高,假阴性结果就越少。特异性=阴性结果总数/未感染病人数,特异性越高,假阳性结果越少。试验的敏感性和特异性是相互联系的,试验的敏感性增加,会使特异性下降,反之亦然。
第二篇:《临床微生物学检验》教学大纲
《临床微生物学检验》教学大纲
课程号
制定单位
制定人洪秀华 审核人 胡翊群
制定时间
课程概述
临床微生物学检验是国家教委规定的医学检验专业主干学科和必修课程,在 医学检验人才培养中发挥主要作用。主要讲授微生物学基础理论及其技术,临床上重要的病原菌的生物学性状、致病性和微生物学检验方法。通过本课程学习,掌握各类感染性疾病的微生物特性和系统的检出病原体检验方法,为临床诊断、治疗、预防提供科学依据。课程适用于医学检验专业4年制学生使用,课程总学时数为162,其中实验71学时。课程使用中国医药科技出版社出版的《临床微生物学检验》为教材;实验教材为北京人民卫生科出版社出版的《临床微生物学与微生物检验实验指导》;参考教材为北京科技文献出版社出版的考试辅导丛书《临床微生物学检验》。考试采用闭卷形式。
课程教学基本要求
讲授内容和时数
讲授内容
讲授时数
实验时数
绪论 1 微生物的信息贮存与传递 2 细菌的生理学 5 6 细菌代谢 2 细菌遗传变异 4 细菌感染与宿主免疫 5 细菌实验诊断技术与质量控制 3 5 细菌耐药性检測 6 3 微生物的分类与命名 1 球菌 5 6 肠杆菌科 7 9 非发酵革兰阴性菌 3 3 弧菌 3 2.5 弯曲菌、螺杆菌 3 0.5 需氧革兰阳性杆菌 3 3 革兰阴性小细菌 3 2 分枝杆菌 3 2 厌氧菌 5 2 螺旋体、2.5 1 立克次体、支原体、衣原体 2.5 0.5 真菌 3 1.5 病毒的基本性状 3 病毒感染与宿主免疫 1 病毒实验室诊断 2 3 病毒学各论 6 临床标本的微生物检测 3 19 考试 4 2 合计 91 71
绪论
【目的要求】
掌握
微生物分类其主要特点和微生物学的定义。
了解
医学微生物学发展简史和临床微生物学的任务及其在检验医学中的地位。【教学时数】
讲授1学时。【讲授内容】
微生物定义、种类、存在、和人类的关系,医学微生物研究的内容和郭霍原则,临床微生物学的任务及其在医学检验专业中的地位,微生物学的发展简史和临床微生物学的发展方向。
【自学内容】
医学微生物学发展史上的重要时期,免疫学的兴起和发展、微生物对遗传学和分子生物学发展的影响。
第二章 细菌生理学
【目的要求】
掌握 细菌大小及其测量单位、细菌的基本形态;细菌的结构、化学组成和功能;细菌各种结构的生物学意义和临床意义及在细菌检验中的作用。革兰阳性菌与阴性菌的结构差异。细菌生长繁殖方式和生长速度,细菌生长曲线意义,影响细菌生长的因素。
细菌的人工培养,培养基的分类及用途。细菌生长繁殖条件,细菌繁殖方式、速度及其生长曲线;细菌的人工培养的培养基、培养方法及生长现象观察。
熟悉
细菌的营养类型,营养物质及其吸收。消毒灭菌的常用术语、方法、机制和适用范围。【教学时数】
讲授5学时,实验6学时。【讲授内容】
细菌的大小和形态 大小和形态及它们受细菌种类、菌龄和环境因素影响。鞭毛 定义、分类、作用与意义;菌毛的定义、分型、作用与意义。荚膜与糖萼 定义、分类、作用与意义
细胞壁的结构、化学组成和功能 肽聚糖骨架及其联结方式;革兰阳性细菌细胞壁的特殊组成;革兰阴性菌的外膜和周浆间隙;不同组成的细胞壁与革兰染色性、致病性和对抗生素敏感性的关系;细胞壁缺陷细菌(原生质体和圆球体)的临床意义。
细胞膜的结构、化学组成和功能 细胞膜和真核细胞膜的异同点;细胞膜的特殊结构-中介体。
细胞质的化学组成和功能 核蛋白体、异染颗粒、质粒、芽胞。
核质的特点和功能(详见第四章)【实验内容】
细菌的形态学检验 显微镜的构造和应用;细菌不染色标本检查;革兰染液的配制;细菌涂片的制作和革兰染色;细菌的基本形态和特殊结构。
细菌培养技术
培养基制备技术;细菌培养方法;分离培养和接种技术; 倾注培养和活菌计数;细菌生长现象的观察。【复习思考题】
名词解释:芽胞、鞭毛、荚膜、菌毛、中介体、原生质体、圆球体、细菌L型、培养基、细菌生长曲线、菌落、自养菌、异养菌、污染菌落。
问答题:
1.简述革兰阴性和革兰阳性细菌细胞壁的结构差异及其临床意义。2.试述观察细菌的大小和形态的方法及其注意点。3.细菌L型的检查在临床上有何意义? 4.简述细菌生长曲线的临床意义。
5.如何观察细菌在各种不同培养基生长的现象? 6.简述细菌生长的必需条件。
第三章 细菌代谢
【目的要求】
掌握
细菌的化学组成,细菌的物理性状。合成代谢、分解代谢、中间代谢、发酵、呼吸、有氧呼吸、厌氧呼吸概念,细菌的合成代谢产物(热原质、毒素和侵袭性酶类、色素、抗生素、细菌素、维生素)及其在医学上的意义。
了解
细菌的化学组成、物理性状及其临床意义。【教学时数】
讲授2学时。【讲授内容】
细菌的物理性状
带电现象,巨大表面积,半透明和渗透压,光学性质。
细菌分解代谢和生化反应
糖分解、蛋白质分解。
细菌合成代谢产物
热原质、毒素、侵袭性酶、色素、抗生素、细菌素、维生素。
【自学内容】
细菌摄取营养的机制,细菌的生物氧化,需氧呼吸,发酵。【复习思考题】
名词解释:IMViC、氧化酶试验、凝固酶、生化反应、细菌数值分类。
问答题:
1.简述细菌生长曲线的临床意义。
2.如何观察细菌在各种不同培养基生长的现象?
3.简述不同物理性状的培养基在检验中的不同用途。
4.简述细菌生长的必需条件。
第四章
细菌遗传
【目的要求】
掌握
突变的类型、规律和发生机制,诱变剂的种类;基因重组的类型和机制,转座子的分类和转座的意义;质粒的结构、功能和特点,接合发生的过程和机制,高频率重组菌株和F’质粒的概念;噬菌体的生物学性状,噬菌体的生活周期及其与宿主的相互关系,转导的机制及意义;细菌转化的机制和人工转化的原理及意义。遗传变异的物质基础;微生物变异的机制;耐药性变异。
熟悉
细菌变异的表现形式和研究意义。
【教学时数】
讲授4学时。【讲授内容】
遗传变异的物质基础
细菌染色体(结构特点,细菌DNA复制、表达和调节);细菌的质粒(质粒基本特性,质粒的分类,F质粒、R质粒);细菌的插入顺序及转座子,转座噬菌体。噬菌体生物学性状,噬菌体的增殖和宿主相互关系(溶菌和溶原),噬菌体在医学和生物学中的应用。
变异类型
遗传性变异和非遗传性变异,形态与结构的变异,培养特性的变异,抗原性变异,毒力变异,耐药性变异。
微生物变异的机理
突变(概念、规律、类型、机制),细菌基因物质转移和重组(转化、转导、接合、溶原性转换、原生质体融合)。
遗传变异的实际应用 【复习思考题】
名词解释:突变、转座子、插入顺序、转化、转导、接合、溶原性转换、高频重组株、普遍性转导、局限性转导、R质粒、F质粒、突变株、BCG、空斑形成、温度敏感突变株(ts),毒性噬菌体、温和噬菌体、溶原菌、前噬菌体。
问答题
试述细菌耐药变异的机制。
第五章 细菌感染与宿主免疫
【目的要求】
掌握
传染病的概念、病原菌感染类型及其传播方式。病原菌的致病性;条件致病菌的意义、条件致病菌与内源性感染的关系、引起内源性感染的机制。医院感染的类型、途径及病原菌的特点。正常菌群与菌群失调的概念、人体重要的正常菌群、菌群检测指标
了解 人体细菌的分类及与人体的关系;机体免疫防御系统组成。【教学时数】
讲授5学时。
【讲授内容】
感染,致病菌,非致病菌,条件性致病菌,正常菌群概念。
宿主与菌群的相互关系(有益菌、条件致病菌、病原菌)。病原菌的致病性与宿主免疫反应:病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。毒素按其来源、性质和作用,分为外毒素内毒素两种。病原菌与传染病;医院感染;外源性感染和内源性感染。人体菌群与微生态相关疾病;常见微生态相关疾病微生态诊断。【自学内容】
宿主抵抗力,机体的基本抵抗力,抗细菌免疫。【复习思考题】
名词解释:正常菌群、菌群失调、条件性致病菌、外毒素、内毒素、外源性感染、内源性感染、社会感染、医院感染、显形感染、隐性或亚临床感染、持续性感染、潜伏感染细菌密集度。问答题:
1.2.3.4.5.6.7.试述人体细菌的分类及与宿主的关系并举例说明。试述细菌的致病物质及与致病有关的结构有哪些? 简述机体非特异性免疫防御系统的组成。简述机体特异性免疫防御系统的组成。简述内源性感染的发病机制。何谓菌群失调,并举例说明之。
试述微生物如何入侵机体引起机体感染?
第六章
细菌实验诊断技术与质量控制
【目的要求】
掌握
掌握临床常见标本的细菌学检验程序和方法;掌握细菌学检验的形态学检 查方法;掌握细菌的分离培养技术和方法;掌握细菌代谢产物检测与鉴定技术。掌握细菌检验的质量控制。
了解
几种常用免疫学检测技术的原理和应用;核酸杂交与聚合酶链反应技术原理和应用。细菌感染的分子生物学检测技术、细菌感染免疫学检测、细菌毒素的检测、【教学时数】
讲授3学时,实验5学时。【讲授内容】
细菌形态学检查
普通光学显微镜的原理和应用;暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、电子显微镜观察细菌形态和结构的意义。细菌染色标本检查:革兰染色法原理、步骤、结果判断;细菌不染色标本检查:细菌动力观察。
细菌的人工培养和生化反应
细菌生长条件、培养基;细菌接种方法;细菌培养方法;生化反应的原理;常见生化反应IMViC、蛋白分解产物试验、呼吸酶类试验、脂酶、凝固酶等原理和结果判断。【实验内容】
细菌鉴定技术
生物化学鉴定;数值编码鉴定;血清鉴定。生化反应的原理;常见生化反应IMViC、蛋白分解产物试验、呼吸酶类试验、脂酶、凝固酶等原理和结果判断;菌毒素检测。【自学内容】
动物实验:实验动物选择、动物接种法、动物实验的应用。
免疫检测技术:免疫荧光、酶免疫测定、凝集反应、免疫印迹、气-液相色谱技术、发光分析技术。
核酸技术:杂交技术、PCR技术。【复习思考题】
名词解释:生化反应、细菌数值分类、鉴别培养基。
问答题:
1.临床常见标本的细菌学检验程序和方法有哪些?
2.培养和鉴定细菌方法有哪些?各有何用途?
第七章-细菌耐药性检测
【目的要求】
掌握
抗菌药物敏感试验体外药敏试验意义、方法、原理和结果判断;细菌的耐药性产生机制和细菌的耐药性检查
熟悉
体外药敏试验的步骤;厌氧菌、真菌及分支杆菌体外药敏试验。
了解
临床常用抗菌药物作用机制。【教学时数】
讲授6学时,实验3学时。【讲授内容】
体外药敏试验
K-B纸片琼脂扩散法、稀释法、E试验、最低抑菌浓度测定和体外联合药敏试验原理、方法、结果判断及质量控制。
细菌耐药性检测
特殊耐药菌检测:耐甲氧西林葡萄球菌检测、耐青霉素肺炎链球菌检测、耐万古霉素肠球菌检测、产超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科细菌检测。
结核分枝杆菌及酵母样真菌体外抗菌药物敏感试验
稀释法原理及结果判断解释。
【实验内容】
抗生素敏感试验
纸片扩散法、稀释法、E试验。特殊耐药菌检测。【自学内容】
体内抗菌药物的活性和浓度的测定:微生物测定法和非微生物法。
【复习思考题】
名词解释:-内酰胺酶、E试验。
问答题:
1.试述抗菌药物敏感性检测方法的原理和质量检测。
2.试述检测细菌耐药性的几种方法。
第八章 微生物的分类与命名
【目的要求】
掌握
微生物在生物分类学中的地位;细菌的分类单位和命名。
熟悉
细菌的分类系统;细菌的分类方法。【教学时数】
讲授1学时。【自学内容】
微生物在生物分类学中的地位
细菌和原核生物界;真菌和真菌界;病毒和病毒界。
细菌的分类单位、系统和命名
细菌分类单位—种、属、科;细菌的株和型;细菌的双命名法;细菌的伯杰分类系统和CDC分类系统。
细菌的分类方法
生理学与生物学分类法(传统分类法和数值分类法);遗传学分类法(DNA G+C mol%、核酸同源值测定、核蛋白体RNA硷基序列测定)。
病毒的分类方法
ICTV分类;习惯分类法。【复习思考题】
名词解释:株、标准株、型、种、属、科。
问答题:
试述细菌的双命名法和它们的分类系统。
第九章 球菌
【目的要求】
掌握 常见化脓性球菌的种类。葡萄球菌的分类方法、微生物特性、微生物学检 验,链球菌的分类方法、微生物特性、微生物学检验,鉴别甲型链球菌和肺炎链球菌的主要试验。肠球菌的分类、微生物特性、微生物学检验,奈瑟菌属的分类方法、微生物特性、微生物学检验
熟悉
葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属细菌其致病因素及所致主要疾病。
【教学时数】
讲授5学时,实验6学时。【讲授内容】
葡萄球菌属
分类
与链球菌属的鉴定要点;凝固酶阳性葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌。
生物学性状
形态与染色(革兰阳性球菌、葡萄状),培养特点(耐盐),生化反应,抗原结构,抵抗力。
临床意义
致病物质(毒素、杀白细胞素、血浆凝固酶、肠毒素、皮肤坏死毒素);致病特点(化脓性感染、食物中毒);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)。
微生物学检查
检验程序,检验方法(直接涂片、分离培养及鉴定),结果的评价和报告。
.链球菌属
链球菌
分类
按溶血性分为甲、乙、丙三大类;按Lancefied分类。
生物学性状
形态与染色(革兰阳性球菌、链状),培养特性(营养要求高),生化反应,抗原结构(群和型特异性抗原)。
临床意义
致病物质(毒素-溶血素O及S,酶-透明质酸酶、链激酶、链道酶、蛋白酶、核糖核酸酶);所致疾病(化脓性感染,中毒性感染-猩红热,变态反应性疾病-风湿热、肾小球肾炎)。
微生物学检查
标本(咽拭、血液、脓液、血清);分离培养及鉴定;链球菌分群试验;血清学反应(抗链球菌溶血素“O”)。
肺炎链球菌
生物学性状
形态与染色(革兰阳性双球菌、矛头状有荚膜,与甲型溶血性链球菌鉴别),生化反应(胆汁溶菌等),抗原结构。耐青霉素的肺炎链球菌(penicillinresistant streptococous pneomonia,PRSP)
肠球菌属
生物学性状
形态与染色,培养特性,分类。
临床意义
医院感染,耐药菌株,耐万古霉素肠球菌(VRE)。
微生物学检查
检验程序,检验方法(直接涂片、分离培养和鉴定、种间鉴定),耐万古肠球菌。脑膜炎奈瑟菌
生物学特性
形态(肾形双球菌,细胞内)与染色,培养特性(营养要求高),抵抗力(抵抗力极低易自溶),抗原结构与分型,流行菌群。
临床意义
传染源,传播途径,鼻咽炎,菌血症,脑膜炎,带菌者。
微生物学检查
标本采集(按不同病期采取不同标本),送检(保温),检验程序,检查方法(涂片、分离培养、血清学分群)。淋病奈瑟菌
生物学性状
形态与染色,培养特性,生化反应。
临床意义
致病性(性病、新生儿眼结膜炎),耐药性。
微生物学检查
标本采集和运送;分泌物涂片、分离培养、鉴定。
.布兰汉菌
形态与染色,培养特性,生化反应,所致疾病。【实验内容】
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌形态染色、菌落特性、血浆凝固酶试验;链球菌(甲、乙、丙三型)、肺炎链球菌、粪肠球菌形态染色,菌落观察,生化反应;链球菌溶血素O试验;淋病奈瑟菌阴道涂片染色,菌落观察生化反应。【自学内容】
了解葡萄球菌生化反应鉴定程序;微球菌属的生物学特性及细菌学检查;其他奈瑟菌属。
【复习思考题】
名词解释:血浆凝固酶、MRSA、MRSCN、VRE、PRSP。
问答题:
1.金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌在形态、培养、对抗菌药物的抵抗力及产生毒性物质方面有何不同?
2.鉴定链球菌有哪些试验 ?
3.肺炎链球菌形态结构有何特点?它与甲型链球菌如何鉴别?
4.淋病奈瑟菌是怎样传播的?在其微生物学检查中应注意哪些事项?
第十章 肠杆菌科
【目的要求】
掌握
肠杆菌科的命名与分类;肠杆菌科细菌的共同特性、临床意义和微生物学检验;大肠埃希菌、沙门菌属、志贺菌属、与临床医学密切相关的肠杆菌科(变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属)的生物学特性、临床意义和微生物学检查。
熟悉
耶尔森菌属生物学特性、临床意义。
了解
沙雷菌属、哈夫尼菌属、普罗威登菌属、摩根菌属生物学特性、临床意义和微生物学检查。【教学时数】
讲授7学时,实验9学时。【讲授内容】
.概述
肠杆菌科定义、命名与分类(伯杰系统细菌学手册)、共同特性(染色特性、培养特性、生化反应及抗原结构);临床意义和微生物学检查(标本采集运送、分离培养、鉴定和血清学检测)。.埃希菌属
生物学性状
形态染色、培养特性、生化反应、抗原结构。
临床意义
致病因素(侵袭力、内毒素和肠毒素);所致疾病(肠道外感染,肠道感染-产毒素性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠出血性大肠埃希菌、肠凝聚型大肠埃希菌)。
微生物学检查
检验程序、分离培养、生化反应、血清学鉴定及毒素(LT、ST)检测。
沙门菌属
血清学分类
生物学性状
形态染色,常用培养基及特性,生化反应,抗原构造,变异性。
临床意义
传染源,传播途径,致病因素及所致疾病(伤寒、副伤寒、胃肠炎、菌血症和败血症)。
微生物学检查
标本采集、分离培养和鉴定(初步鉴定—氧化酶、KIA、MIU,最后鉴定—肠杆菌科试剂盒、沙门因子血清凝集试验);Vi噬菌体分型、肥达反应。.志贺菌属
生物学性状
形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造(分类与分型)、变异性。
临床意义
传染源、传播方式。
变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属 生物学特性、临床意义和微生物学检查。
耶尔森菌属
生物学性状
形态染色、培养特点、生化反应、抗原构造。
临床意义
致病因素(内毒素、外毒素);所致疾病临床类型(鼠疫耶尔森菌引起鼠疫,小肠结肠耶尔森菌引起小肠结肠炎)。
微生物学检查
标本采集、检验程序、分离培养和鉴定。【实验内容】
.大肠埃希菌、沙门菌属、志贺菌属细菌形态染色,菌落观察,生化反应,血清学试验;肥达试验;小肠结肠耶尔森菌、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形杆菌属细菌形态染色,菌落观察,生化反应。【自学内容】
蜂房哈夫尼菌、多源菌属、普罗威登菌属及摩根菌属。【复习思考题】
名词解释:SS琼脂、KIA、MIU。
问答题:
1.肠杆菌科根据伯杰系统细菌学手册共分几属?各写出一个代表菌种。
2.大肠埃希菌在临床上主要引起哪些疾病?引起肠道感染的该菌可分几组?(用 中、英文写出)。
3.伤寒患者的细菌学检验,根椐病程有何特殊的采样要求。
4.列出志贺菌属及伤寒沙门菌在KIA和MIU的基本生化反应。
肺炎克雷伯菌处初次分离时菌落有何特点? 6.何谓产ESBL株,其临床意义是什么?
第十一章 非发酵革兰阴性菌
【目的要求】
掌握
非发酵革兰阴性菌的概念、种类和初步鉴定特征。假单胞菌属的分类、临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。铜绿假单胞菌的临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。荧光假单胞菌、不动杆菌属、寡养单胞菌属、产碱杆菌属和军团菌的临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。
了解
恶臭假单胞菌、斯氏假单胞菌的临床意义、细菌特性和实验室检查。黄杆菌属和莫拉菌属的细菌特性和实验室检查。莫拉菌属、军团菌属生物学性状,临床意义和微生物学检查。
【教学时数】
讲授3学时,实验3学时。【讲授内容】
概述
非发酵菌定义、主要菌属、假单胞菌分类。铜绿假单胞菌生物学性状(单端鞭毛、生长温度范围25~42℃、绿脓素);临床意义(条件性致病菌);微生物学检查(标本采集、检验程序、分离培养和鉴定)。荧光假单胞菌生物学形状、临床意义和微生物学检查。
嗜麦芽黄 寡养单胞菌细菌特性、实验室检查和耐药性;
不动杆菌属、产碱杆菌属和军团菌黄杆菌属的主要菌种、临床意义,生物学性状及其临床意义(条件性致病菌)。
军团菌属
分类命名、生物学性状、临床意义和微生物学检查。【实验内容】
假单胞菌属和嗜麦芽寡养单胞菌形态染色、菌落观察、生化反应;不动杆菌属和产碱杆菌属形态染色、菌落观察和生化反应。【复习思考题】
名词解释:非发酵菌、O-F培养基、氧化酶试验。
问答题:
1.非发酵菌为条件性致病菌,常引起人类哪些疾病?如何鉴定之?
2.临床上引起感染的非发酵菌主要有哪些?
第十二章 弧菌属、气单胞菌属和邻单胞菌属
【目的要求】
掌握
霍乱弧菌、副溶血弧菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查。
熟悉
非O1群霍乱弧菌、O139、气单胞菌属的生物学性状、临床意义和微生物学检查。气单胞菌和 邻单胞菌属生物学性状、临床意义、微生物学检查。
【教学时数】
讲授3学时,实验2.5学时 【讲授内容】
弧菌属
霍乱弧菌
生物学性状(形态染色、活泼动力),培养特性(嗜碱、需氧),选择鉴别培养基,生化反应(发酵蔗糖),抗原结构,变异性,抵抗力;临床意义(致病因素、所致疾病);微生物学检查(标本采集、检验程序、检验方法)。
非O1群霍乱弧菌
血清学分型。
O139血清学分型
血清学分型。
副溶血弧菌
生物学性状(形态染色、活泼动力),培养特性(嗜盐性、耐碱性),选择鉴别培养基,生化反应,神奈川现象,抗原结构,抵抗力;临床意义(耐热溶血毒素和类似毒素,所致疾病);微生物学检查(标本采集、检验程序与方法)。
.气单胞菌属和邻单胞菌属
分类,气单胞菌属生物学性状,临床意义和微生物学检查。【实验内容】
霍乱弧菌和副溶血弧菌形态观察、菌落观察、生化反应;霍乱弧菌分型试验、副溶血弧菌鉴定试验。气单胞菌和邻单胞菌生物学性状、临床意义和微生物学检查。
【复习思考题】
名词解释:TCBS培养基、神奈川现象。
问答题:
1.如何进行霍乱弧菌和副溶血弧菌的培养、分离和鉴定?
2.霍乱弧菌及副溶血弧菌主要的致病因素和致病机制。
第十三章
弯曲菌属和螺杆菌属
【目的要求】
掌握
螺杆菌属的主要特性、分类;幽门螺杆菌的临床意义、细菌特性、实验室检查。
熟悉
弯曲菌属的主要特性、分类;幽门螺杆菌的临床意义、细菌特性、实验室检查。
【教学时数】
讲授3学时,实验0.5学时。【讲授内容】 弯曲菌属
弯曲菌的主要特性、分类;空场弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌的鉴别、致病。弯曲菌的微生物学检查。
螺杆菌属
幽门螺杆菌生物学性状(形态染色、培养所需气体条件)、选择培养基;与慢性胃炎关系;微生物学检查(快速脲酶试验、碳标记呼吸试验、PCR检测HP、分离培养和鉴定)。幽门螺杆菌的临床意义、细菌特性、实验室检查。【实验内容】
幽门螺杆菌形态染色和培养特性、生化反应(氧化酶、脲酶和快速脲酶试验)。【复习思考题】
名词解释:快速脲酶试验。问答题:
1.螺杆菌的致病机制及主要细菌特性。
2.如何培养鉴定胃炎活体组织标本中的幽门螺杆菌。
第十四章苛养菌与人兽共患病原菌
【目的要求】
掌握
苛养菌概念;嗜血杆菌属主要细菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查。
熟悉
鲍特菌属的生物学性状、临床意义和微生物学检查。了解
人兽共患病原菌的概念,常见细菌。
【教学时数】
讲授3学时,实验2学时。【讲授内容】 苛养菌概念
嗜血杆菌属
主要菌种、形态染色、培养(X、V因子)、卫星现象、生化反应;临床意义;主要菌种、形态染色、培养(标本采集、检验程序和检查方法)。
鲍特菌属
主要菌种、形态染色、培养特性,主要菌种、形态染色;微生物学检查。
人兽共患病原菌
布鲁菌属、巴斯德菌属、弗朗西斯菌属主要细菌的微生物学特性及其临床意义。
【实验内容】 【复习思考题】
名词解释:流感嗜血杆菌
形态染色、菌落观察、卫星现象、X+V因子试验。
第十五章 革兰阳性需氧杆菌
【目的要求】
掌握
白喉棒状杆菌生物学性状、临床意义和微生物学检查;炭疽芽胞杆菌和蜡 样芽胞杆菌生物学形状、临床意义和微生物学检查;产单核细胞李斯特菌生物学形状、临床意义和微生物学检查。
讲授3,实验3学时。【讲授内容】
炭疽芽胞杆菌
生物学性状(形态染色芽胞、抗原结构);临床意义(炭疽毒素、所致疾病);微生物学检查(标本采集处理、检验程序和方法、鉴定试验、动物试验)。【自学内容】
蜡样芽胞杆菌
生物学性状(形态染色芽胞、卵磷脂酶试验);临床意义和微生物学检查。
产单核细胞李斯特菌
生物学性状;临床意义;微生物学检查。白喉棒状杆菌
生物学形状(形态、染色、异染颗粒、培养特性、亚碲酸钾培养基、生化反应、抗原构造);临床意义(白喉外毒素的特性、致病机制、预防接种、锡克试验);微生物学检查(标本采集、检验程序和检验方法)。
其他棒状杆菌
常见的菌种及所致疾病;与白喉棒状杆菌的鉴别 【实验内容】
蜡样芽胞杆菌形态及菌落观察、生化反应和活菌计数;
炭疽芽胞杆菌形态及菌落观察、生化反应;产单李斯特菌形态及菌落观察、生化反应。【复习思考题】
名词解释:Elek平板毒力试验、异染颗粒、吕氏血清斜面。
问答题;
1.白喉棒状杆菌和类白喉棒状杆菌的区别。
2.炭疽芽胞杆菌和蜡样芽胞杆菌的鉴别。
3.产单李斯特菌的主要生物学形状。
第十六章分枝杆菌属
【目的要求】
掌握
分枝杆菌属主要种别;结核分枝杆菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查。
熟悉
麻风分枝杆菌生物学性状、临床意义和微生物学检查。
【教学时数】
讲授3学时,实验2学时。【讲授内容】
分枝杆菌属
共同生物学性状;主要种别;国际上应用的分类。
结核分枝杆菌
形态染色(抗酸阳性、分枝生长、Much颗粒);专性需氧培养、菌落特征;生化反应;菌体成分和抗原;变异及抵抗力;临床意义、Koch现象、结核菌素试验;微生物学检查(标本采集、涂片检查、分离培养、核酸检测)。
非典型分枝杆菌
分类、与结核分枝杆菌的鉴别。
麻风分枝杆菌
生物学形状、临床意义、微生物学检查。
【实验内容】
结核分枝杆菌
涂片法检查、抗酸染色、金胺“O”荧光染色,菌落观察、培养。
麻风分枝杆菌
病理组织切片涂片染色检查。【复习思考题】
名词解释:抗酸染色、鲁琴培养基、结核菌素试验。
问答题:
1.试述结核分枝杆菌感染和免疫的关系。
2.结核分枝杆菌的主要致病因素是什么?
第十七章 厌氧菌
【目的要求】
掌握 厌氧菌的概念、种类及其在人体中的分布特点。厌氧菌感染的特点,厌氧菌感染的临床及细菌学指征。厌氧菌标本采集与送检的要求及方法,厌氧菌的检验程序,厌氧培养方法。无芽胞厌氧菌在临床厌氧菌感染中的意义、常见种类、细菌学特性与细菌检验方法。厌氧性细菌的概念、分布及其在临床各科中感染的普遍性;厌氧菌的分类;厌氧菌标本的采集和送检;厌氧菌分离与鉴定。
熟悉
梭状芽胞杆菌属细菌的生物学性状;临床意义和微生物学检查;无芽胞厌氧菌的常见种类及其它们的生物学性状、临床意义和微生物学检查。【教学时数】
讲授5学时,实验2学时。【讲授内容】
概述
分布特性、种类;厌氧菌感染因素;感染的临床及细菌学特征。
厌氧菌的分离培养和鉴定
标本的采集方法;标本的运送-无氧小瓶运送法、针筒运送法、厌氧袋运送法、大量液体标本运送法;培养基的种类和选择;厌氧培养法-厌氧罐培养法、抽气换气法、气袋法、厌氧手套箱法;鉴定试验-形态染色、菌落性状、抗生素敏感性鉴定试验、生化特性、气液相色谱分析。
梭状芽胞杆菌属
破伤风梭菌、气性坏疽病原梭菌、肉毒梭菌和艰难梭菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查。
类杆菌属
脆弱类杆菌群、产黑色素类杆菌群和厌氧性球菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查。【实验内容】
破伤风梭菌、产气荚膜梭菌形态染色、菌落观察、芽胞染色;庖肉基生长现象、卵磷脂酶试验、汹涌发酵、动物试验(毒素被抗毒素中和)。
脆弱类杆菌和产黑色素类杆菌形态染色、厌氧培养、生化反应、胞外酶快速试验。【自学内容】
无芽胞厌氧菌—梭杆菌属、双歧杆菌属、乳酸杆菌属 【复习思考题】
名词解释:庖肉培养基、汹涌发酵现象、聂格尔试验。
问答题:
1.试述厌氧培养成功的关键。
2.试述厌氧菌微生物学检查的程序和方法。
第十八章 螺旋体
【目的要求】
掌握
螺旋体的生物学性状,临床意义和微生物学检查,相互之间的生物学性状的比较。
熟悉
螺旋体生物学性状,临床意义及微生物学检查。【教学时数】
讲授2.5学时,实验1学时。
【讲授内容】
螺旋体
概述
生物学性状
形态结构(细胞壁、细胞质组成的原生质圆柱体、轴丝、周浆鞭毛),染色性,活泼螺旋式运动;培养特性(需氧生长、柯氏培养基、密螺旋体的组织培养);抗原结构(特异性抗原、类属抗原);抵抗力。
临床意义
性传播性疾病,自然疫源性疾病(钩端螺旋体病,莱姆病,回归热)
微生物学检查梅毒螺旋体血清学试验。【复习思考题】
名词解释:RPR
问答题:
1.试述螺旋体的生物学性状。
2.螺旋体微生物学检查原则。
第十九章 立克次体、支原体、衣原体
【目的要求】
掌握
支原体、立克次体和衣原体的生物学性状,临床意义和微生物学检查,相互之间的生物学性状的比较。
熟悉
支原体、立克次体、衣原体和人类感染密切的菌种生物学性状,临床意义及微生物学检查。【教学时数】
讲授2.5学时,实验0.5学时。【讲授内容】 支原体
概述
生物学性状
形态结构(无细胞壁、多形性、革兰染色阴性);培养特性(pH、马或小牛血清、微氧环境、油煎蛋样菌落);生化反应(葡萄糖、精氨酸、尿素、CCU);抗原结构(GIT及MIT);抵抗力。
临床意义泌尿生殖道感染的常见支原体的致病性。
微生物学检查
标本采集,分离鉴定。
立克次体
概述
生物学性状
形态结构、繁殖代谢、抗原成分、变异性、抵抗力。
临床意义
立克次体病、衣原体
概述
生物学性状
独特生活周期,抗原成分LPS和外膜蛋白,抵抗力。
临床意义
沙眼衣原体感染,肺炎衣原体感染。
微生物学检查
标本采集与处理,直接镜检,分离与鉴定。
【实验内容】 支原体鉴定板条 【复习思考题】
名词解释:始体、原体、CCU。问答题:
1.支原体、衣原体、立克次体微生物学检查原则。
2.支原体、衣原体、立克次体的生物学性状及他们和细菌、病毒的相互比较。
第二十章 真菌学检验
【目的要求】
掌握
真菌的基本特征、分类、致病性、微生物学检查;医学上重要的真菌临床意义及微生物学检查。
了解
医学上有关的真菌性疾病与病原性真菌。
【教学时数】
讲授3学时,实验1.5学时。【讲授内容】
概述
生物学性状(营养体、繁殖体、孢子),分类与致病,致病特点,微生物学检查(标本采集、非培养法、培养法)。
医学上重要酵母菌
念珠菌
临床意义,真菌检验和血清学诊断。
隐球菌
临床意义,真菌检验。
二相性真菌
特征,真菌检验,血清免疫学试验。
曲霉菌
特征,分离鉴定,血清免疫学诊断。
毛霉菌
特征,分离鉴定,血清免疫学诊断。
皮肤真菌 临床意义,真菌检验(标本采集、直接镜检、分离鉴定)。【实验内容】
浅部真菌(石膏样小孢子、石膏样毛霉菌、絮状表皮藓菌)的菌落观察;芽管形成试验;菌丝、孢子镜下观察;白假丝酵母菌菌落观察、镜下形态;科玛嘉真菌显色平板。
【复习思考题】
名词解释:菌丝、孢子、二相型真菌、沙氏培养基。
问答题:
1.试述真菌的结构特征及其在真菌检验中的重要意义。
2.深部真菌感染有何临床意义?
第二十一章病毒基本性状
【目的要求】
掌握
病毒体大小、测量单位、基本形态;病毒的基本特性、结构和化学组成及功能;病毒的复制周期及增殖过程中的异常现象;噬菌体生物学特性及其应用。
了解
理化因素对病毒的影响。【教学时数】
讲授3学时。【讲授内容】
病毒体的形态结构
病毒大小与形态;病毒结构:核心、衣壳、包膜、辅助结构;核衣壳对称型。
病毒的复制周期
吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装与成熟、释放。
异常病毒复制
顿挫感染与缺损病毒。
干扰现象
干扰类型、干扰机制、干扰现象意义。
亚病毒
类病毒、卫星RNA、朊病毒。
理化因素对病毒的影响
温度、pH、射线、脂溶剂。【自学内容】
两种病毒感染同一宿主细胞时的增殖。【复习思考题】
名词解释:病毒体、衣壳、核衣壳、核衣壳对称型、包膜、病毒的灭活、病毒复制周期、顿挫感染、缺损病毒、问答题: 叙述病毒的基本特性。在形态大小、结构、生长繁殖、培养方法和细菌相比较有何区别?
第二十二章 病毒感染与宿主免疫 第二十三章 病毒感染的实验诊断
【目的要求】
掌握
病毒的感染类型;病毒的致病机制;病毒学分离培养鉴定的方法及病毒增殖的指标;病毒血清学诊断方法及原理;病毒感染的早期诊断的原则。了解
病毒的感染方式与途径;宿主的抗病毒免疫。【教学时数】
讲授3学时,实验3学时。【讲授内容】
病毒感染的方式与途径
水平传播、垂直传播。
病毒的感染类型
隐性感染、显性感染。
病毒的致病机制
病毒对宿主细胞的直接作用:杀细胞效应、稳定状态感染、细胞凋亡包涵体的形成、细胞转化增生与整合感染;免疫病理损伤及对免疫系统的影响。宿主的抗病毒免疫
非特异性抗病毒免疫;特异性抗病毒免疫。
病毒学检验原则
直接检查病毒体、病毒核酸和病毒抗原;分离培养鉴定病毒体、病毒学清学诊断患者血清中特异抗体。
病毒分离培养与鉴定
标本采集时间、部位,标本的运送和保存,标本的处理;分离培养方法(组织培养、动物接种、鸡胚接种);病毒的鉴定(初步鉴定、最后鉴定);病毒培养结果的报告。
病毒血清学诊断
原理、补体结合试验、中和试验、TCID50、血凝抑制试验、间接免疫荧光检测、酶联免疫吸附测定。
病毒感染早期诊断
病毒胞内抗原检出,病毒胞外抗原检出;光学显微镜检查病毒包涵体;电镜及免疫电镜检查病毒体。【实验内容】
病毒鸡胚接种技术、流感病毒血凝试验、正常细胞与病毒感染细胞CPE效应的观察,酶免法测EB病毒。
【复习思考题】
名词解释:潜伏感染、隐性感染、TCID50、包涵体、血凝现象。
问答题:
1.试述细胞水平的病毒感染。
2.试述病毒分离检验的基本原则、方法和步骤。
3.解释各种病毒增殖指标的含义和原理。
4.概括引起常见的感染性疾病病毒的生物学性状、临床意义和检测特点
第24章肝炎病毒 第25章疱疹病毒 第26章呼吸道病毒
第29章人类免疫缺陷病毒 【目的要求】
掌握 甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、流感病毒、SARS-CoV、人类免疫缺陷病毒的临床意义、微生物特性、微生物检验
熟悉 肠道病毒的生物学性状,临床意义和微生物学检查。了解
狂犬病毒、人乳头瘤病毒的临床意义和微生物学检查。【教学时数】。
讲授6学时 【讲授内容】
甲型肝炎病毒 丙型肝炎病毒丁型肝炎病毒戊型肝炎病毒分类、临床意义、微生物特性、微生物检验
疱疹病毒的种类和共同特点单纯疱疹病毒的水痘-带状疱疹病毒巨细胞病毒EB病毒致病性和检测方法。
呼吸道病毒的种类。掌握流感病毒、SARS-CoV的分类方法、生物学性状、微生物学检验方法,熟悉所致主要疾病及发病机理。
人类免疫缺陷病毒的概念、形态结构、传播途径、致病机制、培养特性及其常用实验室检查法的原理。【复习思考题】
问答题:试述上述病毒分离检验的基本原则、方法和步骤。
各种临床标本的微生物学检查
【目的要求】
掌握
血液、脑脊液、粪便、生殖道分泌物、尿液、脓汁及痰液标本的常见病原微生物检测的程序和结果报告;各种临床标本微生物学检测的基本技能。【教学时数】
讲授3学时,实验19学时。【讲授内容】
各种临床标本
采集和运送;常见致病菌的检验方法和鉴定要求;检测报告的发出方式。
【实验内容】
血液标本
标本采集和接种;A群链球菌、枯草芽孢杆菌、产气肠杆菌、沙门菌属和葡萄球菌鉴定。
粪便标本
标本采集;一般性状检查(量、外观、气味、酸碱反应、寄生虫和结石);化学检查(隐血试验、粪胆色素检查);显微镜检查(细胞、食物残渣、结晶);细菌学检查(SS琼脂平板接种、志贺氏菌属的鉴定)。
尿液标本
标本和采集;尿液标本的细菌学检验程序;尿液标本细菌计数法;肠球菌、大肠埃希菌和变形杆菌的鉴定。
泌尿生殖道标本
标本采集;外观及清洁度检查;细菌学检查(淋病奈瑟菌、支原 体和衣原体鉴定)。
痰液标本
标本采集;细菌检测程序;细菌鉴定(结核分枝杆菌、肺炎链球菌和甲型溶血性链球菌)。
脓汁分泌物标本
标本采集;检测程序;细菌鉴定(铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌)。
脑脊液标本
标本采集;一般性状检查;化学检查;显微镜细胞检查;细菌学检查(脑脊液奈瑟菌和新型隐球菌、产单核李斯特菌)【复习思考题】
名词解释:运送培养基、标本处理。
问答题:
简述各种临床标本微生物学检查的程序及常见病原微生物的鉴定。21
第三篇:临床微生物学与检验教学大纲
临床微生物学与检验教学大纲
长沙医学院医学检验系
微生物学与检验教学大纲
前言
适用专业:医学检验专业 课程的性质、目的及任务:
微生物学及检验是医学微生物学、临床微生物学以及微生物学技术密切结合的一门新兴学科,是医学检验专业的一门专业主干课程,它综合了临床医学、免疫学、临床抗生素学和医院流行病学等几方面的知识和技能,研究感染性疾病的病原体特征,提供快速、准确的病原学诊断,密切结合临床提出及时有效的治疗方案,对医院内感染进行动态监控。
课程内容:该课程包括医学微生物学和临床微生物学两部分,前者主要研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性、以及防治措施的学科。后者侧重于研究感染性疾病,快速、准确的诊断病原体的策略与方法,为临床诊断提供依据。教学内容覆盖了《医学微生物学》和《临床微生物学及微生物学检验》两本教材,在教学过程中将两本教材的内容有机融合在一起。本课程包括五篇:细菌学总论,细菌学各论及检验,真菌学及检验,病毒学及检验,微生物学检验。
课程教学基本要求:
1.掌握微生物的基本特性。
2.掌握病原微生物对人体的致病性以及人体的抗感染免疫 3.掌握微生物学检验的基本技术。
4.掌握各类临床标本的采集方法、检验程序及常规检验方法。5.选择最佳鉴定方法对感染性病原体进行鉴定或快速诊断。6.熟悉感染性疾病的预防及治疗原则。
7.了解病原微生物学检验的新方法、新技术及发展动向。8.能够正确运用微生物实验室常用自动化仪器和微量装置。9.能够进行正确的抗菌药物敏感实验并准确报告。10.能够对实验结果进行正确的分析及致病性评价。教学模式及教学环节: 微生物学及检验是一门实践性、应用性很强的课程,在广泛吸纳国内外先进教学方法的基础上,结合本课程的特点,经过多年的教学改革实践,形成了风格迥异的教学模式,即将传统沿用的“理论与实验教学”改为“理论与实验合二为一”,课堂上以学生为主体,以直观、形象、立体的实验内容为切入点,同时辅以讨论、交流、归纳等诸多教学实践活动,将理论与实验相融合,学生参与、老师引导并行,同时根据不同的教学内容,采用不同的灵活多样的教学实践活动,充分调动学生学习的主动性,课堂效率大大提高。本着不断充实和丰富提高的原则,在总结教改经验的基础上制定了本教学大纲。
学时分配:
在教学过程中理论与实验时间为1:1,本课程总学时数为162学时,其中: 第一篇细菌学总论40学时(理论21学时,实验19学时);第二篇细菌学各论及检验70学时(理论34学时,实验36学时);第三篇真菌学及检验10学时(理论5学时,实验5学时); 第四篇病毒学及检验34学时(理论24学时,实验10学时);第五篇微生物学检验8学时(理论3学时,实验5学时)。
通过微生物学及检验的学习,使学生具备医学检验专业高素质的专门人才所必需的微生物学检验技术的基本知识和基本技能。为学生学习相关专业知识和职业技能,提高全面素质,增强适应职业变化的能力和继续学习的能力打下一定的基础。
教学大纲内容
第一章 绪论
教学目的:
掌握有关微生物及微生物学的概念,了解微生物学的发展简史。教学时数:1学时 教学内容:
一、微生物、医学微生物学、临床微生物学
二、微生物学的发展简史
三、临床微生物学的任务及在临床医学中的地位
第一篇细菌学总论
第二章 细菌的形态与结构
教学目的:
掌握细菌的形态、基本结构、细菌特殊结构的含义与意义,革兰染色的原理、步骤、结果及致病性;熟悉不染色标本检查法及特殊染色法。教学时数:9学时(理论3学时,实验6学时)教学内容:
一、细菌的大小与形态
(一)细菌的大小
(二)细菌的形态
二、细菌的结构
(一)基本结构
(二)特殊结构
三、细菌形态学染色法
第三章 细菌的生理
教学目的:
掌握细菌的生长条件、生长繁殖规律及培养基的制备方法,掌握细菌的分解代谢产物及其意义,熟悉其合成代谢产物及意义。了解微生物的分类与命名原则 教学时数:6学时(理论2学时,实验4学时)教学内容:
一、细菌的生长繁殖
(一)细菌的理化性状
(二)细菌的营养与繁殖条件(三)细菌的新陈代谢
1.细菌的分解代谢产物及其意义 2.细菌的合成代谢产物及其意义
(四)细菌的能量转换
二、细菌的人工培养
(一)培养基
(二)细菌在各种培养基上的生长现象
(三)人工培养细菌的意义
三、细菌的命名细菌分类学
(一)基本概念
(二)细菌分类等级
(三)细菌命名法
第四章 消毒与灭菌
教学目的:
掌握消毒、灭菌的基本概念,物理灭菌法的条件及应用,熟悉化学消毒剂的应用及影响因素,了解化学消毒剂的种类及杀菌机理 教学时数:4学时(理论2学时,实验2学时)教学内容:
一、基本概念
二、物理灭菌法
(一)高温
1.干热灭菌法 2.湿热灭菌法
(二)紫外线及辐射
(三)超声波
(四)滤过除菌
三、化学消毒法
(一)化学消毒剂的种类及用途
(二)影响化学消毒剂的因素
四、微生物实验室生物安全
第五章 细菌的遗传与变异
教学目的:
掌握细菌变异的物质基础及机理,熟悉细菌的各种变异现象,熟悉细菌基因转移和重组的过程,了解遗传变异的实际意义。教学时数:4学时(理论3学时,实验1学时)教学内容:
一、噬菌体
(一)毒性噬菌体
(二)温和噬菌体
二、遗传变异的物质基础
(一)细菌染色体
(二)质粒
(三)转位因子
三、细菌基因表达的调节
四、细菌基因的转移和重组
五、基因突变
六、遗传变异研究的意义
第六章 抗微生物药物敏感性实验和耐药性
教学目的:
掌握抗菌药物敏感性实验的方法;掌握细菌对抗菌药物产生耐药的机制及耐药性检测主要方法。熟悉抗菌药物的种类。教学时数:6学时(理论4学时,实验2学时)教学内容:
一、常用抗菌药物
二、抗菌药物敏感性实验
(一)抗菌药物敏感性实验的原理和意义
(二)纸片扩散法
(三)稀释法
(四)E实验
三、细菌耐药性和发生机制
第七章 细菌的感染与免疫
教学目的:
掌握细菌的致病性、感染类型;熟悉正常菌群的分布及生理作用;了解机体的抗菌免疫。了解医院感染概况,掌握医院感染常见微生物及监测方法 教学时数:8学时(理论5学时,实验3学时)教学内容:
一、正常菌群和机会性致病菌
二、细菌的致病作用
(一)细菌的毒力 1.侵袭力
2.毒素:内外毒素的主要区别
(二)细菌的侵入数量
(三)细菌的侵入门户
三、宿主的免疫防御机制
(一)非特异性免疫
(二)特异性免疫
四、感染的发生与发展
(一)感染途径
(二)感染种类
(三)感染类型
五、院内感染
(一)医院感染的概述与流行特点
(二)医院感染的监测
(三)医院感染的控制 第八章 细菌感染的检查方法与防治原则
教学目的:
掌握标本采集的原则、标本的处理方法及常用实验诊断技术。了解微生物感染的防治原则
教学时数:2学时(理论1学时,实验1学时)教学内容:
一、临床标本的采集与处理
二、病原学诊断:
(一)细菌的形态学检查
(二)细菌的分离培养与接种技术
(三)细菌生化实验
(四)细菌感染的血清学检测
(五)细菌感染的分子生物学检测
(六)动物实验
(七)免疫学检验技术
三、人工主动免疫
(一)疫苗
(二)类毒素
四、人工被动免疫
五、细菌感染的治疗
第二篇 细菌学各论及检验
第九章 球菌
教学目的:
掌握葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属的主要生物学性状及检查,熟悉其致病性。
教学时数:10学时(理论5学时,实验5学时)教学内容:
一、概述
二、葡萄球菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
1.标本采集
2.检验程序 3.检验方法
4.鉴定依据 5.报告方式
三、链球菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
1.标本采集 2.检验程序 3.检验方法
4.鉴定依据 5.报告方式
四、肠球菌属
(一)生物学性状
(二)致病性及耐药性:
(三)微生物学检验
1.检验程序: 2.检验方法:
五、奈瑟菌属和布兰汉菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
第十章 肠杆菌科
教学目的:
掌握大肠埃希菌、沙门菌和志贺菌的检验程序及检验方法,掌握肥达氏反应原理、方法及致病性,熟悉各种肠杆菌的致病性。教学时数:10学时(理论5学时,实验5学时)教学内容:
一、概述:
(一)肠杆菌科的定义及分类
(二)肠杆菌科的共同特性:
二、埃希菌属(以大肠埃希菌为代表)
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验 1.标本采集 2.检验程序
3.检验方法
三、沙门菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验: 1.标本采集; 2.检验程序; 3.检验方法
4.血清学试验---肥达反应
四、志贺菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验 1.标本采集 2.检验程序 3.检验方法
4.快速诊断
五、耶尔森菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 变形杆菌 沙雷菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验: 1.检验程序 2.鉴定试验
第十一章 小细菌
教学目的:
掌握嗜血杆菌属、布鲁菌属、鲍特菌属主要生物学性状及鉴定方法。教学时数:4学时(理论2学时,实验2学时)教学内容:
一、嗜血杆菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
二、布鲁菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
三、鲍特菌属
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
第十二章 非发酵革兰阴性菌
教学目的:
掌握非发酵菌的鉴定要点及铜绿假单胞菌主要鉴定特征,熟悉不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、军团菌属的主要鉴定特征。教学时数:6学时(理论3学时,实验3学时)教学内容:
一、概述
二、铜绿假单胞菌
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验 1.标本采集 2.检验程序 3.检验方法 4.鉴定依据
三、荧光假单胞菌:与铜绿假单胞菌的区别
四、军团菌
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
五、其他非发酵菌
第十三章 弧菌属 气单胞菌属
教学目的:
掌握霍乱弧菌的生物学性状及鉴定方法,熟悉气单胞菌属、邻单胞菌属之间的主要区别以及与弧菌属的区别。
教学时数:2学时(理论1学时,实验1学时)教学内容:
一、弧菌属
(一)霍乱菌属 1.生物学性状 2.致病性 3.微生物学检验(1)标本采集(2)检验程序(3)检验方法
(4)快速诊断
(二)副溶血性弧菌:与霍乱弧菌的主要区别。
二、气单胞菌属、邻单胞菌属
两属之间的主要区别以及与弧菌属的区别。
第十四章 弯曲菌属和螺杆菌属
教学目的:
熟悉弯曲菌和幽门螺杆菌的生物学性状及主要鉴别试验 教学时数:2学时(理论1学时,实验1学时)教学内容:
一、弯曲菌属
(一)概述
(二)生物学性状
(三)致病性:肠道感染;肠道外感染
(四)微生物学检验
二、螺杆菌属—幽门螺杆菌
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
第十五章 需氧革兰阳性杆菌
教学目的:
掌握白喉棒状杆菌的生物学性状及检验方法,炭疽芽胞杆菌的培养特性及检验方法;熟悉李斯特菌、红斑丹毒丝菌、阴道加特纳菌的生物学特性及主要鉴定试验。
教学时数:6学时(理论3学时,实验3学时)教学内容:
一、白喉棒状杆菌
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验: 1.标本采集 2.检验程序 3.检验方法
二、其他棒状杆菌:与白喉棒状杆菌的鉴别
三、炭疽芽胞杆菌
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验 1.标本采集 2.检验程序 3.检验方法
四、蜡样芽胞杆菌
五、产单核细胞李斯特菌和红斑丹毒丝菌
六、阴道加特纳菌
微生物学检验
第十六章 分枝杆菌属
教学目的:
掌握结核分枝杆菌的生物学性状,检验程序及主要鉴定方法,了解其他分枝杆菌的检验程序及鉴定方法
教学时数:8学时(理论3学时,实验5学时)教学内容:
一、概述
二、结核分枝杆菌与非典型分枝杆菌
(一)结核分枝杆菌 1.生物学性状 2.致病性
3.微生物学检验
⑴ 标本采集 ⑵ 检验程序 ⑶ 检验方法
(二)非典型分枝杆菌
三、麻风分枝杆菌
四、放线菌属和诺卡菌属
第十七章 厌氧菌
教学目的:
掌握厌氧菌的培养方法、检验程序、检验方法;掌握梭状芽胞杆菌的检验方法,熟悉其致病性;熟悉无芽胞厌氧菌的检验方法及致病性。教学时数:8学时(理论4学时,实验4学时)教学内容:
一、概述
二、厌氧菌的分布与致病性
三、厌氧菌标本的采集与送检
(一)标本采集
(二)标本运送与处理
四、厌氧菌的分离与鉴定
(一)检验程序
(二)检验方法
五、梭状芽胞杆菌属
(一)破伤风梭菌 1.生物学性状 2.致病性
(二)产气荚膜梭菌 1.生物学性状 2.致病性
3.微生物学检验
(三)肉毒梭菌 1.生物学性状 2.致病性
3.微生物学检验
(四)艰难梭菌
六、无芽胞厌氧菌
致病性
第十八章支原体 立克次体 衣原体
教学目的:
掌握支原体的生物学特性,肺炎支原体和解脲脲原体的检验方法,沙眼衣原体的检验方法;熟悉立克次体,衣原体的致病性。教学时数:4学时(理论3学时,实验1学时)教学内容:
一、支原体
(一)概述
(二)生物学性状
(三)致病性
(四)微生物学检验 1.标本采集
2.检验方法 3.鉴定依据
二、衣原体
(一)命名与分类
(二)生物学性状
(三)致病性 1.沙眼衣原体 2.鹦鹉热
3.肺炎衣原体感染
(四)微生物学检验 1.标本采集处理 2.检验方法
三、立克次体:
检验方法和致病性。
第十九章 螺旋体
教学目的:
掌握螺旋体生物学性状及梅毒螺旋体和钩端螺旋体的微生物学检验,熟悉螺旋体的致病性。
教学时数:8学时(理论4学时,实验4学时)教学内容:
一、钩端螺旋体
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
1.标本采集 2.检验方法 3.检验程序
二、梅毒螺旋体
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
1.标本采集 2.检验方法
三、疏螺旋体
(一)伯氏疏螺旋体
(二)回归热疏螺旋体
(三)奋森疏螺旋体
细菌学录像
教学时数:2学时
第三篇 真菌学
第二十章 真菌学及检验 教学目的:
掌握真菌生物学性状及检验方法,了解真菌的致病性。教学时数:10学时(理论5学时,实验5学时)教学内容:
一、真菌生物学性状:
(一)形态与结构
(二)培养特性
(三)分类与致病
二、真菌检验 1.标本采集 2.检验程序
3.检验方法
三、病原性真菌
(一)浅部真菌 1.致病性 2.检验方法
(二)白假丝酵母菌、隐球菌及其他医学上重要的霉菌 1.致病性 2.检验方法
第四篇 病毒学及检验
第二十一章 病毒总论
教学目的:
掌握病毒的基本性状;掌握病毒的致病性及抗病毒免疫;掌握病毒感染常用诊断方法。
教学时数:10学时(理论8学时,录像2学时)教学内容:
一、病毒的基本性状
(一)病毒的概念
(二)病毒的特点
(三)病毒的形态结构与化学组成
(四)病毒的增殖
(五)理化因素对病毒的影响
(六)病毒的分类与命名
(七)病毒的遗传与变异
二、病毒的感染与免疫
(一)病毒的致病机理
(二)病毒性感染的方式与类型
(三)抗病毒免疫
三、病毒感染的检查方法与预防原则
(一)标本采集
(二)检验方法 1.直接检查 2.分离培养鉴定 3.病毒抗原检测 4.早期IgM抗体检测 5.病毒核酸检测
(三)病毒感染的治疗
第二十二章 呼吸道病毒
教学目的:
掌握流感病毒生物学性状及检测方法,熟悉呼吸道病毒的种类及其致病性。教学时数:6学时(理论3学时,实验3学时)教学内容:
一、概述
二、流行性感冒病毒
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检查 1.病毒的分离与鉴定 2.血清学诊断
三、副粘病毒科(呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒)
四、其他呼吸道病毒(冠状病毒、风疹病毒)
第二十三章 肠道病毒
教学目的:
熟悉肠道病毒的微生物学特性,了解肠道病毒生物检测及致病性。教学时数:2学时(理论1学时,录象1学时)教学内容:
一、概述
二、脊髓灰质炎病毒
(一)生物学性状
(二)微生物学检查
三、柯萨奇病毒简介
四、埃可病毒、新型肠道病毒简介
五、轮状病毒
(一)生物学性状
(二)微生物学检查
第二十四章出血热病毒及虫媒病毒
教学目的:
掌握流行性乙型脑炎病毒的检验方法,熟悉其致病性;掌握流行性出血热病毒的检验方法,熟悉其致病性。
教学时数:2学时(理论1学时,录象1学时)教学内容:
一、流行性出血热病毒
(一)汉坦病毒
(二)新疆出血热病毒
二、虫媒病毒
(一)概述
(二)流行性乙型脑炎病毒
(三)森林脑炎病毒
(四)登革病毒
第二十五章 肝炎病毒
教学目的:
掌握甲型、乙型、丙型肝炎病毒的致病性及微生物学检查,熟悉其它肝炎病毒的致病性。
教学时数:6学时(理论5学时,实验1学时)教学内容:
一、各型肝炎病毒性状比较
二、甲型肝炎病毒
(一)生物学性状
(二)微生物学检查法: 1.标本采集
2.检查方法:电镜直接查病毒颗粒;早期抗HAV-IgM抗体检测。
三、乙型肝炎病毒
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验方法
四、其他肝炎病毒
(一)生物学性状
(二)微生物学检验方法
第二十六章逆转录病毒
教学目的:
掌握人类免疫缺陷病毒的生物学性状及检验方法,熟悉其致病性特点。教学时数:4学时(理论3学时,录象1学时)教学内容:
一、人类免疫缺陷病毒
(一)生物学性状
(二)致病性与免疫性
(三)微生物学检验 1.标本采集 2.检验方法
二、人类嗜T淋巴细胞病毒简介
第二十七章 疱疹病毒 教学目的:
掌握各种疱疹病毒的微生物学检验方法,熟悉其致病性。教学时数:2学时(理论1学时,实验1学时)教学内容:
一、概述
二、单纯疱疹病毒
(一)致病性
(二)检验方法
三、水痘带状疱疹病毒
四、巨细胞病毒
(一)致病性
(二)检验方法
五、EB病毒
(一)致病性
(二)检验方法
第二十八章 其他病毒
教学目的:
掌握狂犬病毒的生物学性状及微生物学检验,熟悉其致病特点及防治原则。教学时数:1学时 教学内容:
一、狂犬病毒
(一)生物学性状
(二)致病性
(三)微生物学检验
(四)防治原则
二、人乳头瘤病毒
第二十九章 朊粒
教学目的:
掌握朊粒的生物学性状及微生物学检查,熟悉其致病性特点,了解其发现过程。
教学时数:1学时 教学内容:
一、朊粒的发现
二、朊粒的定义
三、朊粒的生物学性状
四、朊粒的致病性
五、微生物学检查
第五篇 微生物学检验
第三十章 临床标本的细菌学检验与微生物商品化、自动化检验
教学目的:
掌握临床标本的采集原则、检验程序及检查方法。了解微生物鉴定和药敏实 验的自动化分析系统、血培养自动化分析系统。教学时数:6学时(理论1学时,实验5学时)教学内容:
一、临床标本检查的一般原则
二、标本的采集原则
三、检查方法的选择
四、常见临床标本的检查
(一)粪便标本的检验
(二)尿标本的检验
(三)痰标本的检验
四、细菌耐药性的检测方法
五、医院见习
六、SENSITRE微生物鉴定与药敏分析系统。
第三十一章 微生物学检验的质量控制
教学目的:
掌握微生物学检验室内质控的方法,熟悉室间质控的评判方法及意义。教学时数:2学时 教学内容:
一、概述
二、室内质量控制
(一)人员与组织管理
(二)操作手册
(三)培养基
(四)试剂、抗血清和染液的质量控制
(五)抗生素选择与质控
(六)仪器
(七)标准菌株
三、室间质量评价
第四篇:《临床微生物学和微生物检验》课程简介(范文模版)
《临床微生物学和微生物检验》课程简介
课程名称:《临床微生物学和微生物检验》
英方名称:《clinical microbioogy and microorganism laboratory》 开课单位:遵义医学院医学检验系
课程性质:必修课
总 学 时:120学时,其中理论:60学时,实验:60学时
学分:6.6学分
适用专业:医学检验
教学目的:通过这门课程的学习,使学生不仅能较全面地掌握临床微生物学的现代
理论知识,而且能较系统地掌握临床微生物学检验的先进技能,在毕业时能独立地正确采取临床标本,分离培养与鉴定出相应的病原微生物,会正确出报告。并注意激励学生的创新思维和动手能力。
内容简介:《临床微生物学和微生物检验》是在学完基础微生物学的基础上进行学习的。其内容主要包括微生物检验的基本技术、临床微生物学导论、临床细菌学、临床真菌学、临床病毒学、各种临床标本的微生物检验、医院感染及其监测、药物敏感试验、细菌检验的质量控制等。
考核形式:闭卷考试
教材:《临床微生物学和微生物检验》,人民卫生出版社,张卓然,3版,2003
年。
参考书目:
1.《现代医学微生物学》,上海医科大学出版社,闻玉梅,1999年。
2.《临床微生物学手册》,科学出版社,徐建国译,7版,2005年。
3.《医学微生物学》,人民卫生出版社,周正任,6版,2005年。
4.《临床真菌学》,上海医科大学出版社,秦启贤,1999年。
主讲教师:胡永林副教授陈泽慧副教授
第五篇:临床检验标本采集要求
临床检验标本采集要求
临床检验样本拒收的准则
1.盛样本的容器和/检验申请单上信息缺失或不符 1.1 样本容器上无标识或标识不清; 1.2 样本容器上标签与检验申请单不符;
1.3 临床检验申请单上未写患者姓名、检测项目和检测材料中任何一项; 1.4 检验申请单上送检项目本科未开展和/或属科研项目但未事先联系确认。
2.样本不合要求
2.1 未使用合适的抗凝剂或样本类型不当; 2.2 送检样本容器破损、有渗漏或选择不当; 2.3 样本采集后保存不当;
2.4 患者准备状态不恰当,影响实验结果,如未空腹查血脂。
3.发生以下情况原则上拒收样本
中度以上溶血;中度以上脂血;抗凝血中有凝块;量太少等。
但因情况特殊、取材困难或感染疾病的咨询等,本科将会应客房要求进行检测,并在报告单上注明样本状态供临床参考。
样本拒收后处理:在我科拒收的样本,应及时重新采集,否则将和检验申请单一起退回。
临床检验分析前要求
一、临床检验单要求 1.病人信息:
申请者必需清楚写病人的姓名、性别、年龄或其它有效识别身份的信息; 2.病人的病历信息
申请者必须清楚填写病人所在临床科室名称、病历号、床号、临床诊断、临床样本类型、样本采集日期和时间、申请者姓名、申请检验日期; 3.请的检验项目:
申请者必须清楚填写检验项目名称,项目名称应规范、准确,特别是申请组合项目时,一定要与本科<检测目录>的组合内容一致,否则需填写组合项目的具体单项;
二、标本采集前患者准备须知 1.患者状态
原则上患者应在平静、休息状态下采集样本,特别是血液样本。激动、兴奋或恐惧时,可使血红蛋白、白细胞等增高; 剧烈运动、能量消耗、体液丢失、呼吸剧烈可以造成体内多项指标变化,如谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等一过性升高,还可引起血钾、钠、钙、白蛋白、血糖等的变化。
2.患者饮食对检验结果的影响
2.1 进食后一定时间内可使血液中许多成份发生变化。因人们饮食的多样性,生理状况差异也大,而且大多数项目的参考范围是以空腹血液测定值为基础的。故建议,原则上要求早晨空腹采血(空腹12小时左右),对进食有特殊要求的项目除外。
一顿标准餐:可使甘油三酯增高40%以上,血糖增高15%以上,进食高蛋白食物可使尿素氮、尿酸等增高,高碳水化合物食物可使血糖增高; 高脂肪食物:可使甘油三酯大幅增高,并使血液出现乳糜现象影响许多检验结果; 进食咖啡:淀粉酶、促甲状腺激素、碱性磷酸酶增高。
2.2 长期素食者低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白,胆固醇、甘油三酯会降低。2.3 禁食过久对检验结果的影响
补体C3、白蛋白、转铁蛋白、血糖、钾、钙、镁等浓度下降; 血胆红素、酮体、脂肪酸、甘油三酯、尿酸盐增高;
禁食刚开始时,血生长激素可升高15倍,3~4天后基本恢复正常。2.4 咖啡因对检验结果的影响:咖啡、可乐、茶都含有咖啡因
咖啡因可使血糖微量上升,甘油三酯和皮质醇升高,胆固醇降低。2.5 酒精对检验结果的影响:
饮酒后会使血糖立即上升和造成高甘油三酯血症;
中度酒精量可使血清肌酸肌酶、和谷草转氨酶、谷丙转氨酶升高。2.6 抽烟对检验结果的影响
香烟中尼古丁会使血液中肾上腺素、尿中儿茶本酚胺及其代谢产物VMA升高; 生长激素对香烟特别敏感,抽烟后30分钟内浓度可升高10多倍;
吸烟者癌胚抗原、β脂蛋白、胆固醇、甘油三酯、红细胞、血红蛋白、白细胞高于不吸烟者,高密度脂蛋白低于不吸烟者。
3.药物对检验结果的影响
3.1 药理作用对检验结果的影响:
甲状腺药物:使血糖升高、胆固醇降低; 咖啡因:使血糖和胆固醇增高;
维生素C:使总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白降低;
口服避孕药:使甲状腺结合球蛋白、纤维酶原、转铁蛋白、血清铁和甘油三酯升高、白蛋白和血清锌降低;
某些药物能够造成肝、肾功能损害,引起相关指标的变化。3.2 对检验项目的测定方法产生影响:
对于用比色法检测的项目,某些药物的物理特性比如颜色会影响比色; 药物参与检测时的化学反应,如有还原性的药物对于利用氧化还原法测定项目会有影响;某些药物可以抑制酶的活性,对于测定酶活性的项目会使结果降低。
4.标本本身对检验结果的影响
4.1 标本溶血:溶血可能是有某些疾病引起,但主要是在采血过程中或样本处置不当引起。
光学干扰,比色时若用到胆红素的吸收光谱区会产生分析误差;
红细胞内的某些物质与血清或血浆中的含量相差悬殊,如钾、镁、磷、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、血清铁等; 胆红素中的蛋白质使血清总蛋白和白蛋白升高。注一:中度或重度溶血必须重新采集标本 注二:标本溶血的常见原因: 止血带施压时间太长; 穿刺部位皮肤有酒精残留;
针头、针筒或血液容器内有污染或水气; 使用的针头孔径太小;
针筒内的血液由针头排到容器中; 抽血时太快或用力太大;
血液与抗凝剂混合时剧烈振荡; 血液没有完全凝固就离心; 4.2 脂血标本:
脂血造成的浑浊会在比色测定时引起光线散射,导致吸光值假性增高; 脂血会造成电解质检测错误; 抽血前食入富含脂肪的食物;
空腹患者有脂血现象,属于病理因素:甘油三酯过高血浆或血清呈浑浊状;胆固醇含量高,血清或血浆外观没有变化;有乳糜微粒会在血清液面浮上一层奶油状物质。
三、样本采集
1.标本采集前准备
1.1 根据项目要求或医生的交待嘱咐病人作好采集标本前的准备工作,并告知相关注意事项;
1.2 了解各种项目的采集要求,并作好充分的准备;
1.3 按规定选用合适的容器并在明显位置注明标识(如条形码、病人姓名、送检科室、住院号等资料);
1.4 标本采集前应严格查对检验申请单信息和容器上内容是否一致。有些标本采集后应在申请单上标注采集时间、体位等;
1.5 采集抗凝血标本时,应选择合适的抗凝剂,不要随意更换成其他抗凝剂。抗凝剂与血液的量必须准确。抽血后立即轻轻颠倒混匀,避免血液凝固;
1.6 严格掌握采集标本电动机,如避免在输液臂的同侧采血,有的项目测定应注意其分泌的节律性和周期性变化;
1.7 要求病人自己留取的标本应该详细交待留取方法和注意事项。
2.标本采集方法
2.1 准备试管:取合适数量和规格的真空采血管备用;
2.2 选择静脉:患者取坐位,前臂水平伸直置于桌面枕垫上。暴露穿刺部位,选择容易固定,明显可见的肘部静脉;
2.3 扎止血带:在采血部位上端扎止血带,并嘱患者反复握拳头,使静脉充盈暴露,便于穿刺; 2.4 消毒:先用复合碘消毒棉签自静脉穿刺处从内向外,顺时针方向消毒皮肤; 2.5 穿刺:取下一次性针头无菌帽,以左手拇指固定静脉穿刺部位端,右手拇指和中指握针头沿静脉使针头与皮肤成30度角斜行快速入皮肤,然后以5度角向前突破静脉壁进入静脉腔。见回血后,将针头顺势插入少许,以防止采血针头滑出,但不可用力探刺,以免造成血肿;
2.6 抽血:将针头另一端插入真空采血管,至所需血量后,立即去掉止血带,用消毒棉签压住针孔,请患者松拳,迅速拔出针头。嘱患者继续按压针孔数分钟以防出血;
2.7 混匀:如果用的是抗凝管,则轻轻颠倒混匀,切忌振荡试管。
3.尿液标本的采集
尿液标本种类的选择和收集取决于临床医师的送检目的、病人的状况和试验的要求。理想情况下,为了达到筛查、检出分析物和有意义有形成份的目的,应收集浓缩尿液。尿液标本的种类如下:
3.1 晨尿:清晨起床后,在未进早餐和做其它运动前排泄的尿液,又称为首次晨尿。住院病人最适宜收集此类标本,但在采集前一天应提供收集容器和书面收集说明,如外阴、生殖器清洁方法,留中段清洁尿等。若采集后2小时不能进行分析的,可采取适当的防腐措施。晨尿常用于筛查、直立性蛋白尿检查和细胞学研究。
3.2 随机尿:即随时排泄,无需患者做任何准备的尿液,适用于常规及急诊筛查,但是,患者如摄入大量液体和剧烈运动后将直接影响尿液成分,从而不能准确反映患者疾病状况。
3.3 计时尿:收集一段时间内的尿液标本。准确的计时和规范的说明是确保计时尿结果可靠的重要前提,根据检测项目的不同,添加适当的防腐剂。24小时尿标本收集方法如下:
告知病人标本收集的具体步骤,尽可能提供书面说明; 在开始收集标本的第一天(如晨8:00),病人排空膀胱中的尿液,弃去该部分尿液。将此后连续24小时的尿液收集于盛尿容器内;
在结束收集标本的第二天(如晨8:00),病人排空膀胱中的尿液,收集于盛尿容器内;
送到实验室前,充分混匀全部标本,准确测量并记录尿总量; 取出一定量尿液用于实验,弃去剩余尿液。3.4 尿液标本收集相关注意事项:
应留取新鲜尿,以清晨第一次尿为宜。急诊病人可随时留取。收集计时尿液标本时应告知病人时间段的起点和终点;
使用清洁有盖容器(一次性容器为佳),透明且不与尿液发生反应的惰性材料制成。容器不可重复使用。运送容器具有安全稳妥的密封装置,其密封装置易于操作和开启;
尿液标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。此外,还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入;
标本留取后,应及时送检,以免细菌繁殖、细胞溶解等;
尿胆红素和尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。标本送检时应避光。3.5 尿液防腐与保存:标本收集2小时内无法进行尿液分析,或尿液中所要分析的成分不稳定,标本可加入特定的化学防腐剂,常用尿液防腐方法。①冷藏 不干扰常规筛查,放在4℃冰箱可保存6小时,在24小时内可抑制细菌生长。
主要检测:电解质、肌酐、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、重金属、药物筛查、促卵泡激素、雌三醇等。
②甲醛 具有还原性,不适合尿糖等化学成份检查。
主要检测:管型、细胞检查,用法:每100mL尿加入400g/L的甲醛0.5mL。③甲苯
主要检测:尿糖、尿蛋白的防腐,用法:每100mL尿加入甲苯0.5mL。
④硼酸 保护蛋白质和有形成份,在24小时内可抑制细菌生长。有尿酸盐沉淀。干扰常规筛查的PH。
主要检测:蛋白质(白蛋白、氨基酸等)、尿酸、5-羟吲哚乙酸、羟脯氨酸、皮质醇、雌激素、类固醇等检查。用法:每L尿中约加10g。
⑤盐酸 不能用于常规筛查,破坏有形成份,沉淀溶质,杀菌。
主要检测:钙、磷酸盐、δ-氨基乙酰丙酸、草酸盐、尿17酮类固醇、儿茶酚胺等。
用法:每L尿中加10mL浓盐酸。
⑥氟化钠 能防止糖酵解,不能用于常规筛查。主要检测:尿葡萄糖。
⑦碳酸钠 保护卟啉和尿胆原,不能用于常规筛查。主要检测:卟啉和尿胆原。
用法:24小时尿中加碳酸钠4g。
⑧麝香草酚 保护有形成份、干扰蛋白沉淀试验、抑制细菌和霉菌。主要检测:有形成份。
用法:每100mL加入量<0.1g。⑨冰醋酸
主要检测:24小时尿醛固酮。
用法:每24小时尿加入约5~10mL。
4.痰液标本采集
4.1 痰液的一般检查应收集新鲜痰,病人起床后刷牙,漱口(用3%H2O2及清水3次),用力咳出气管深处真正呼吸道分泌物,而勿混入唾液及鼻咽分泌物;
4.2 幼儿痰液收集困难时,可用消毒棉拭纸刺激喉部反射,用棉拭子采取标本; 4.3 痰液标本收集容器须加盖,痰液勿污染容器外(用不吸水容器盛留)。
5.粪便标本采集
5.1 收集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别,一般检验留取指头大小(约5g)新鲜粪便即可,放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检。容器最好用内层涂脂的硬纸盒,便于检查后焚毁;
5.2 血吸虫毛蚴孵化则留新鲜粪便不少于3g。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其他化学药品,并立即送检检查;
5.3 检查蛲虫卵需要用软粘透明纸拭子,在清晨排便前由肛门四周拭取标本,也可用棉拭子拭取,但均须立即镜检;
5.4 检查寄生虫及虫卵计数,可用清洁、无尿污染的便盆收集24小时粪便送检; 5.5 隐血试验,应嘱患者于收集标本前3天前起禁食动物性食物,连续检查3天,并取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检测,以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低;
5.6粪胆原定量检查应收集3天的粪便,混合称量,从其中取出约20g送检。查胆汁成份的粪便不应在室温中长时间放置,以免阳性率减低; 5.7细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。
收集容器须加盖,勿污染容器外(用不吸水容器盛留),立即送检。
6.体液标本采集
6.1 脑脊液:标本收集后应立即送检,一般不超过1小时。收到标本后应立即检验,久置后可致细胞破坏,影响细胞计数及分类检查;葡萄糖含量降低;病原菌破坏或溶解。细胞计数应避免标本凝固,遇高蛋白标本时,可用EDTA抗凝。6.2 浆膜腔积液:穿刺取得的标本为防止细胞变性、出现凝块或细菌破坏溶解等,送检及检查必须及时;为防止凝固,最好加入EDTA抗凝,每0.1mL可抗凝6mL积液;PH测定应用肝素抗凝专用采样器。6.3 滑膜液:应用消毒注射器,正常时滑膜液量甚少,病理时则可多达3~10mL,因检查项目不同、容器不同,故应事先准备有关标本容器,微生物培养应置于灭菌消毒试管,显微镜镜检应用肝素抗凝标本,每mL约用肝素钠25单位(不可采用肝素锂、草酸盐或EDTA干粉,以免人为形成晶体,干扰显微镜检查),收集后立即送检。6.4 精液标本:
①在3个月内检查2次至数次,2次之间间隔应>7天,但不超过3周; ②采样前至少禁欲3天,但不超过7天; ③采样后1小时内送检;
④用清洁干燥广口塑料或玻璃小瓶收集精液,不宜采用避孕套内的精液; ⑤应将射清清液全部送检; ⑥传送时温度应在20~40℃; ⑦和所有体液一样,精液也必须按照潜在生物危害物质处理,因为精液内可能含有肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒和疱疹病毒等。
7.微生物学检验标本
7.1 标本采集、运送这、验收和处理注意事项 ①标本采集:
A.申请单必须清楚(姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等),以便实验室合理选用培养基。B.尽量在抗生素应用前采集标本。C.标本采集应严格执行无菌操作。
D.采集标本的容器必须经灭菌处理或使用一次性无菌专用容器。②标本运送
标本采集后尽快送微生物室。③标本验收
A.实验室只能接收和处理合格标本。
B.实验室对不合格标本退回时,须注明原因,并及时与临床联系。7.2 微生物检验标本采集和处理 ⑴尿液标本采集和处理:通常留取晨起第一次心潮澎湃 液,及时送检,并保证2小时内接种,不能及时送检时,标本应置冰箱保存,并于8小时内送检。怀疑沙门氏菌感染时,应于发病2周左右采集标本;怀疑钩端螺旋体感染时,应于发病后2周左右采集标本。常用的标本采集方法如下:
A.中段尿采集法:成年男性和女性分别用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用灭菌水冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿液,于带盖的无菌试管中留取中段尿液5~10mL。
B.尿尿法:用导尿法取5~10mL尿液于无菌试管中,长期留置导尿管者应更换导尿管留尿;留置导尿时,用无菌消毒法消毒导尿管外部及导管口,用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检,不可采集尿液收集袋中的尿液送检。C.其它方法:膀胱穿刺或肾盂尿采集法须由临床医师采集。⑵粪便标本采集和处理:
A.采集时间:腹泻患者处于急性期,尽量在用药前采集;怀疑伤寒患者在发病前两周以后采集;怀疑霍乱时应立即采集送检。
B.采集方法:一般患者,取新鲜粪便的粘液、脓血或絮状物等有意义成份2~3g或1~3mL,盛无菌容器内送检;难以获得粪便或排便困难的患者和婴幼儿,可用直肠拭子采集,再插入灭菌试管中送检。⑶痰及下呼吸道标本采集和处理:
A.自然咳痰法:晨痰为佳;先嗽口,清洁牙齿和口腔;再用力咳出呼吸道深部的痰;痰量不得少1mL;咳痰困难者可先做雾化处理。
B.小儿取痰法:用弯压舌向后压舌,将拭子深入咽部,小儿因压舌板刺激引起咳嗽,喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上送检。C.支气管镜、支气管穿刺、支气管肺泡灌洗等采集法:,由临床医师实施。⑷血液及骨髓培养标本:
A.抗生素治疗前,严格无菌静脉采血3~5mL(儿童1~4mL);骨髓1~2mL。B.无菌注入专用培养瓶中送检。
C.如已用抗生素不能停用时,可在48小时内分别于下次抗生素使用前,多次采集血液标本送检。
D.疑为心内膜炎时,为提高阳性检出率,可酌情不同部位、不同时间多次采血送检。
⑸脑脊液培养标本:
A.怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液,最好在抗生素使用前采集。B.无菌腰穿采集脑脊液1~2mL,立即送检。⑹穿刺液培养标本:
A.包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等。
B.在抗生素使用前采集或在停用抗生素2~3天后采集。无菌穿刺采集,可在无菌容器中加入适量灭菌肝素。⑺胃液及胆汁培养:
A.采集方法:抽取空腹胃液5 mL,置无菌管内送检;胆汁培养标本由十二指肠引流法、胆囊穿刺法或手术中留取胆汁5 mL,置无菌管内送检。B.标本采集后必须立即送检。⑻脓汁和病灶分泌物培养:
A.标本采集前,先对病灶周围消毒,然后用无菌法采取脓汁或病灶分泌物和组织。B.标本采集后立即置无菌管内送检。⑼眼、耳、鼻、咽拭子分泌物培养标本: A.用无菌拭子常规采集标本。
B.标本采集过程中应注意避免被粘膜上正常菌群污染。C.标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。⑽泌尿生殖道培养标本:
A.尿道分泌物:清洗尿道后采取尿道溢出的脓性分泌物,或用无菌拭子插入尿道2~4 mL处轻轻转动后取出,置无菌试管中立即送检。
B.阴道、宫颈分泌物:通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管1~2 mL处分泌物,置无菌试管中送检。
C.前列腺液:清洗尿道、膀胱后用前列腺按摩法采集前列腺液于无菌试管中,立即送检。
D.精液:受检者应5天以上未排精,清洗尿道后用手淫法或体外排精法,射精于无菌管中立即送检。
E.溃疡分泌物:灭菌生理盐水清洗患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物,置无菌试管中立即送检。⑾烧伤感染培养标本:
烧伤12小时后用无菌棉拭子采集标本:要注意从多个创面取样;烧伤严重感染时易发生败血症,创面取样的同时应采集血样做血培养。⑿真菌感染培养标本:
浅部真菌感染标本采集:皮癣者常规消毒皮肤,从皮损边缘刮取鳞屑,置无菌平皿中送检;皮肤溃疡则采集皮损周围脓汁或组织;毛发则采集其根部折断处,至少5~6根送检;指(趾)甲;消毒指(趾)甲并去掉其表面部分,取可疑病变部分,用刀片修成小薄片5~6片,置无菌容器中送检。深部真菌感染标本采集:
血液:无菌采集血3~5 mL,注入血培养瓶中,立即送检;如不能立刻送检时血培养瓶应放室温,但不可超过8小时。
及脊液:采样量不少于3 mL,分别注入两支无菌试管中送检(一支做真菌培养和墨汁染色,另一支做普通培养)。
呼吸道及泌尿生殖道标本:采集方法同普通培养。⒀厌氧菌感染培养标本: 标本采集:严格执行无菌操作,避免标本污染和与空气接触;用注射器抽取胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液或无菌手术抽取脓液;抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。
标本运送:标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送检;标本运送可采用注射器(已驱氧)或含运送培养基的无氧小瓶以及厌氧罐。⒁特殊项目的标本采集要求 A.糖耐量试验:
①病人准备:试验前3日,每日食物总糖含量不低于150g,维持正常活动,影响试验的药物(如:咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3日前停用,试验前病人应10~16小时不进食。
②标本采集:临床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75g无水葡萄糖,再于给糖后0.5、1、1.5、2小时各采血1次,每次采集2mL,尽快分离血清。B.人乳头瘤病毒DNA(HPV-DNA)分型检测: ①病人准备:3天内不能做阴道冲洗或使用阴道内药物,24小时内不能有性生活,非月经期采样检测。②标本采集:放置阴道扩张器,用专用取样刷置于子宫颈口与粘膜交界处逆时针转三圈,停留10秒钟;
③将取样刷放于专用试管中,在切口处折断多余部分; ④拧紧盖子送检。尽量避免保存液在取样过程中溢出,否则样本量不够无法检测。标本保存:4℃可保存3周,-20℃可保存半年。C.高血压项目:
①病人准备:β-阻断剂、血管扩张药、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平,一般要在停药后3周测定。不适合停药的病人改服胍乙啶等的影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PRA水平,故病人测定PRA前3天应适当减少盐报入量,最好同时测定取血前24小时的尿钠含量,以供分析PRA结果时参考。
②标本采集:肘静脉取血5mL,迅速注入放在水浴冷却的酶抑制剂的专用抗凝管中,摇匀,即刻现放回冰水浴中冷却,待离心时取出。1000rpm离心5分钟(最好4℃离心)分离血浆。此操作应在15分钟内完成。(外送时,取2mL血浆送检)。③标本保存:低温冰箱保存(-20℃以下),可保存2个月。④注意事项:卧位血是指病人早晨醒来未下床活动前采集的血标本:立位血是指病人早晨下床活动3小时后采集的血标本。
标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝剂均可影响结果。
四、标本送出前的处理和保存
1.标本的交接检查:本科工作人员与送检者当场交接样本,履行交接程序。不合格的样本当场拒收,对有疑义的样本,与临床协商后处理。样本上条码与检验申请单上条码是否一致 样本是否溶血 抗凝血有无凝块
检验申请单填写是否完整 血液样本有无脂血 样本量是否符合要求
样本使用容器是否正确(是否抗凝、所用抗凝剂种类,特殊项目是否使用专用容器或采集管)。2.样本离心
绝大多数血液中成份在不分离血细胞的情况下能够在24小时内保持稳定,但外送检验项目必须分离血清或血浆后送检。溶血对一些项目影响很大,发生中度以上溶血的下列项目不能检验:钾、钠、氯、钙、镁、磷、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胰岛素、C肽、肌酸激酶、神经元特异性烯醇化酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、叶酸、血常规等。
注:因许多成份在红细胞和血清/血浆间浓度有差异,有的差异很大,样本在运输、储存过程中,血细胞代谢、微生物降解等会影响标本质量,另如标本在运输过程中处理不慎(颠簸等)易引起溶血。
3.样本保存:不能及时送检的样本,一般情况下应放冰箱冷藏,但部分项目要室温保存。.4.样本密封:为保护样本不挥发、污染、溢出和生物安全考虑,盛样本的容器应密封,所有样本都应按照生物安全的要求谨慎处理。
建议:对于要外送检验的项目,将血液样本分离血清/血浆后送检(需要用全血检测的项目除外)。