下载文档第一篇：临床病理检验试验室技术人员
实验动物饲养与技术人员
实验动物饲养管理人员协助研究人员做饲养管理和一些基本的实验操作。协同其他员工例如兽医的工作人员，技术研究人员和部门经理等。
岗位职责：
日常实验动物的健康检查，喂水喂料，笼具更换清洗等 动物设施设备的清洁卫生 动物的接收运送 正确记录日常活动
工作中符合实验动物相关法规
协同其他员工的工作例如实验技术人员和部门经理等进行相关的实验
任职要求：
动物相关学科专科以上，考虑到工作性质和一定体力要求，优先考虑男性 读懂英文操作规范，英文好的优先 有实验动物抓取保定经验的优先考虑 能吃苦耐劳，身体健康
Animal Care Technician Animal Care Technicians are needed to assist research personnel by performing routine care and handling of laboratory animals and basic research techniques.Animal Care Technicians will interact with a variety of positions including supervisors/managers, veterinarians, technicians and research personnel.Responsibilities will include Daily health checks, feeding, watering, changing/cleaning cages for rodents, rabbits, dogs and primates Sanitize equipment and facilities Receive animal shipments and house animals appropriately Document work accurately Comply with all animal handling and animal welfare regulations and with regulatory
Qualifications and Experience Qualifications and Experience
Certificate of college biology technology or animal science Some animal handling experience Ability to follow written procedures Some lifting required
临床病理（检验）实验室技术人员
岗位职责：
临床病理实验室主要从事GLP实验中血液、尿液及骨髓标本的检验及分析。
岗位要求：
1.临床检验专业本科或兽医学、兽医病理学、兽医病理学与病理生理学硕士； 2.有临床检验实验室工作经验优先； 3.熟练操作计算机能力
4.良好的英语交流及读写能力；
5.优秀的团队精神、工作踏实，具有较强事业心。
Clinical Pathology Technician – Beijing, PRC The Clinical Pathology Tech provides services to animal toxicology studies by examining and analyzing biological fluids in support of preclinical research and development projects.He/she is responsible for assisting in all aspects of clinical pathology and be supervised by the head of clinical pathology to process specimens for clinical pathology evaluation.Responsibilities will include: Operate the instruments including Advia 2120 hematology system, clinitek Atlas automated urine chemistry analyzer, Hitachi 7080 serum chemistry analyzer and ACL 9000 coagulation system and relevant instruments to analyze specimens.1.Prepare the blood smear and bone marrow smear and have ability in methanol fixative and Wright-Giemsa stain.2.Participate in reports on serum chemistry, coagulation, urinalysis and hematology findings.3.Maintain legible permanent record of all results obtained together with supporting data.4.Ensure all job assignments are performed in compliance with GLP regulations.Qualifications and Experience 1.Veterinarian MS in biological science or Clinical pathology related field BS 2.Experience in animal pathology is preferred 3.Experience in pharmaceutical industry and GLP requirements 4.Verbal and written communications skills 5.Experience in handling biological samples
生物分析技术员 I
生物分析技术员I，将在FDA的相关指导下进行临床前期的生物分析和制剂分析研究中样品的提取和分析仪器的维护。生物分析技术员I 应遵循GLP规定，进行规范的数据记录的实验文件保存。该职位向药代动力技术主管汇报。
职位描述：
1.制剂分析（稳定性、均一性和浓度验证）；
2.样品的提取，例如在生物体液和组织中，用蛋白沉淀法、液液萃取、和固相萃取法提取生物样品；
3.负责分析仪器的操作、维护和故障维修； 4.遵守所有相关GLP的要求；
5.能够独立工作并具有团队合作精神，有良好的人际沟通技巧。
任职要求：
1.应具有药代动力学，药学、分析化学或相关领域的大专或本科学位； 2.在生物样品（血浆、组织等）提取方面有0-5年的工作经验。
Associate I, Analysis and Bioanalysis – Beijing, PRC
The Associate I, Analysis and Bioanalysis, will assist in sample processing per FDA guidance, implementing and maintaining analytical and bioanalytical assays and automated systems to support preclinical analytical and bioanalytical studies.The Associate I, Analysis and Bioanalysis, must maintain GLP compliance in supporting preclinical studies and accurately document all work.This Associate I, Analysis and Bioanalysis, will report to the DMPK Technical Supervisor.Responsibilities will include:
1.Conduct dose formulation analysis(stability, homogeneity and
concentration verification).2.Conduct sample preparation and extraction such as protein precipitation，liquid-liquid extraction and solid-phase extraction in biological fluids and tissues.3.Take the responsibility for operation, maintenance and trouble-shooting of analytical instruments.4.Comply with all applicable GLP requirements.5.Work either inpidually or in an interdisciplinary team and possess excellent communication and interpersonal skills.Qualifications: 1.B.S 或Junior college in the pharmacokinetic analysis, pharmaceutical sciences, analytical chemistry or related fields 2.With 0-5 years of experiences of sample processing for biological samples(plasma, tissues, etc)
配药制剂技术员I Associate Formulation
主要职责描述：
进行日常性口服和灌胃用药化合物的制剂的准备和配制，以支持对生物体内的药物代谢动力学，毒物学和药理学的相关实验； 执行英文实验数据记录和操作步骤的撰写； 在团队中进行有效的内部协作和沟通；
支持供试药品的管理和保证配药流程符合GLP要求。
任职要求：
应聘者应具有药学，药剂学或者或分析化学大专或本科学位； 具有小分子和大分子（蛋白或多肽）制剂配制者优先考虑； 有相关GLP经验和知识背景的优先；
良好的英语书写和口语沟通能力及熟练的计算机操作能力。
Main Responsibility Description Conduct routine formulation preparations and developments for oral and parenteral dosage forms to support in vivo pharmacokinetics, toxicology and pharmacology studies.Perform data record and formulation procedure in English.Effectively interact and communicate within a dynamic team environment.Support test article logistic and formulation procedures in GLP practice environment.Requirements the ideal candidate should possess at least college diploma in pharmaceutical sciences/pharmacy/analytical chemistry with 0-5 years of experience.Experience with formulation preparation both for small molecules and protein/peptides are highly desirable.Demonstrated ability to work independently and in a team environment, and excellent written and verbal communication and good computer skills are required.A candidate with a good understanding about GLP regulations is preferred.Knowledge of pharmacokinetics and drug metabolism in drug research and development are desirable, but not required.Associate I, Pharmacology The Associate I Pharmacology will collect, document, and manage pertinent data including animal observations, test material administration, clinical sample collection, animal surgery and measurement of ECG, respiratory function and CNS FOB and test, etc in compliance with appropriate SOPs, GLPs.He or she will assist the study director in the conduct of pharmacology and safety pharmacology studies.Responsibilities will include:
1.Comprehend and follow study protocols and SOPs for GLP / Non-GLP studies.2.Comply with GLP documentation requirements, including data recording, reviewing and correcting.3.Animal handling, observation, dosing, blood withdrawing, weighing, necropsy, anesthesia, euthanization, surgery and measurement of ECG, respiratory function and CNS FOB and test, etc.4.Record observations and collect other relevant data via data acquisition system and hand-generated forms.5.Report to technical supervisor or Study Director in a timely manner regarding any deviations from protocols or unexpected results.6.Contribute to quality control the raw data from studies.Requirements:
1.B.S degree in life science or diploma in life science with strong animal work and /or surgery skills 2.Work experience in related fields preferred 3.Basic lab and animal work skills are required.组织病理学实验室技术人员
组织病理学实验室主要从事GLP实验中组织切片的制备。
职位要求：
1.病理学、兽医学、实验动物医学或医学专业本科或硕士； 2.有病理技术工作经验优先； 3.熟练操作计算机能力； 4.良好的英语读写能力；
5.优秀的团队精神、工作踏实，具有较强事业心。
Histopathology Technicians participate in the technical aspects of cell and tissue-based visualization assays in support of preclinical research and development projects.They will assist the pathologist and be supervised by the head of histopathology to process histological slides for histopathologic evaluations.Responsibilities will include 1.Identify tissues preserved in formalin solution and trim the preserved tissues for histopathology slides.2.Prepare paraffin tissue blocks and handle the microtone instrumentation during slide preparation.3.Will also involve in the handling of instrumentation for dehydration and staining.4.Frozen tissue sectioning
5.Immunostaining and conjugation of antibodies an and proteins with biotin and/or dyes
6.Microscopy and digital imaging
7.Ensure all job assignments are performed in compliance with GLP regulations
Qualifications and Experience 1.BS or MS in biological science, preferably molecular and cell biology or biochemistry
2.Experience in histology/pathology laboratory work with animal models is preferred
3.Previous experience with immunofluorescence and multi-target detection methodologies preferred
4.Must be able to work in small group setting
Pharmacologist /Associate III, Pharmacology– Beijing, PRC
The Pharmacologist or Associate III, pharmacology will adhere to Pharmaron SOPs, comply with GLP, ICH and other guidelines and maintain the highest standards to ensure the integrity of preclinical study data.Under the guidance from the Director of Pharmacology, the inpidual will be responsible for preclinical pharmacology, safety pharmacology and related safety studies.Responsibilities will include but not limited to: 1.Development of various disease models and technical procedures for study purposes.2.Act as study director for pharmacology, safety pharmacology and related safety studies.3.Provide data and analysis for study reports 4.Prepare study protocols and study reports Qualifications and Experience: 1.MS or PhD in life sciences
2.Experience in animal ECG or surgery preferred 3.Knowledge of regulatory requirements 4.Able to use English for work activities
第二篇：病理检验技术
荧光原位杂交 FISH 用DNA探针与组织切片上互补的DNA杂交，通过观察荧光信号在染色体上的位置和颜色来反映相应基因的情况。
第一章 病理检验技术概述
病理学的作用：
1、研究疾病的病因、发病机制，认识
疾病的发生发展规律
2、为临床诊断疾病、治疗疾病、分析预
后提供依据等。
病理检验的定义：
------在临床医疗实践中，通过对患者病变组织或细胞进行检查，以协助临床诊断疾病的方法称为病理检验。
一、病理检验的主要任务
（一）确定疾病的诊断
（二）为临床选择治疗方案提供依据
（三）提供有关预后因素的信息。（最正确、最可靠、最后的诊断）
（四）了解疾病的发展及分析疗效
（五）为科学研究积累资料
（六）为提高临床诊断水平服务
二、病理检验分类
（一）细胞学检验（脱落细胞、细针穿刺吸取）
（二）组织学检验---最后的诊断
活体组织检验、手术标本检验、手术中病理检验
（三）尸体剖验
病理学技术：
在病理学临床及科学研究工作中使用的各种技术方法统称为病理学技术。病理检验技术的质量和水平是临床病理诊断工作中至关重要的因素。“技术是病理学之母。”
第二节、病理检验技术常规工作 收发工作
协助取材和尸体剖检工作 制作制作切片及细胞学涂片 病理资料管理及检索
药品、物资的管理及仪器维护 大体标本的收集和制作
第六章 组织制片技术 P39 常规石蜡切片制作程序 组织固定→取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→染色→封片→观察
第一节 组织块的处理
（一）组织切片制作过程中的各种操作：
1、取材与固定：合理取材、及时固定；
2、洗涤、脱水、透明；
4、浸蜡、包埋；
5、切片、贴片（展片、捞片）和染色：
6、封片：长期保存。
一、取材：
-------按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块，用于制作组织切片的过程。
注意事项：
部位、大小、形状、方向
二、固定和固定液
生理盐水或10%甲醛。
固定：将组织浸入某些化学试剂，使
4、蒸汽固定法：为了固定组织中可溶性物组织细胞内的物质尽量保持在生活状态时质、的形态结构和位置过程。
血液、细胞涂片等；
（一）固定目的：
（三）固定液的特性：
（1）防止组织、细胞的自溶与腐败；
1、渗透力强，迅速渗入组织内部
（2）凝固或沉淀细胞内物质；
2、不会使组织过度收缩或膨胀
（3）增加组织硬度，便于制片；
3、能硬化组织，保持细胞形态和位置
（4）产生不同的折光率，有利于染色后观
4、使组织对染料产生亲和力，产生折光率 察辨认。
（四）组织固定注意事项：
（二）固 定 方 法：
1、及时固定
1、浸泡固定法：病理外检一般均用此法；
2、固定容器宜大
2、注射、灌注法：体积过大或整个脏器或
3、固定液应足量：固定组织体积的10-20尸体的固定； 倍
3、微波固定法：应用于临床病理快速诊断，4、防止组织变形 微波固定组织温度至关重要。微波固定介质
5、确定恰当的固定时间 可用
（五）组织固定液 常用固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）：配置为市售的40%甲醛1份加水9份混合即成；
2、酒精（乙醇）：高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定；
3、中性缓冲甲醛液：可提高免疫组化阳性率。
4、酒精-甲醛液（A-F固定液）：
5、Zenker固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）：
久置能产生白色沉淀（三聚甲醛），容易氧化变成甲酸，严重影响细胞核着色。固定陈旧多血脏器如肝脾，易产生黑色色素，叫甲醛色素。
2、酒精（乙醇）：
高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定；
50%以上浓度的乙醇可溶解脂肪和类脂质，也可以溶解血色素和损害其他色素。
中性甲醛液
配置：40%甲醛150-200ml，蒸馏水800-850ml，磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠13g。常用的固定液或标本保存液，是免疫组化最常用的固定液。
选择性固定液：
1、丙酮：广泛用于组织化学中酶的固定；
2、戊二醛固定液：广泛用于电镜标本的固定，应采用缓冲液配制固定液
3、醋酸：不能保存糖，也不能固定脂肪及类脂，5%醋酸pH2～3可抑制细菌和酶的活性；
4、苦味酸：强酸，易燃易爆，酒精溶液可固定糖类；
5、氯化汞：只宜固定薄片组织，2mm～3mm厚的组织需固定6～18小时；
6、重铬酸钾：固定高尔基体、线粒体，对酸性染料着色良好；
7、锇酸：浓度为1%～2%水溶液用于电镜制片；
骨组织脱钙液：
在脱钙前，先将骨或钙化组织锯成4mm～5mm厚的簿片，按常规充分固定，然后进行脱钙。
组织脱钙的方法及应用：
（一）酸性溶液脱钙：
1、脱钙液配制：
（1）5%～10%硝酸水溶液：浓硝酸5ml～10ml，蒸馏水加至100ml；（2）硝酸甲醛液：浓硝酸10ml，10%福尔马林90ml；
（3）Schridde液：浓硝酸20ml，10%福尔马林100ml。对组织无明显损害，迅速、安全；（4）5%～10%甲酸水溶液：甲酸5ml～10ml，蒸馏水加至100ml（5）甲酸酒精液：脱钙速度较硝酸慢，但破坏组织也轻。（6）Plank-Rychlo液：脱钙比5%硝酸液快3倍。
Jenkins混合酸脱钙液、盐酸氯化钠液、枸橼酸钠、甲酸脱钙液等
2、脱钙方法：骨片悬于脱钙液中，敞开瓶口，每日更换一次新液，最好早晚各一次。
（二）螯合剂脱钙：速度很慢，但对组织成分几乎没有损害。用于免疫组化染色较理想。
1、脱钙液配制：取乙二胺四乙酸二钠（EDTA）25g，溶解于200ml蒸馏水中，氢氧化钠（NaOH）调整pH至7.0（大约加2.5g NaOH）。EDTA与钙可形成一种可溶性非离子化的复合物。
2、脱钙法：将骨片浸入脱钙液中，每周更换一次新液。一般致密骨脱钙需要6～8周，含有少量骨渣的组织约需一周。
（三）电解脱钙法： 此法即在脱钙液中通过电流，电解加速脱钙。
1、电解脱钙液配制：
25%盐酸50ml，25%甲酸200ml，蒸馏水750ml；
2、脱钙方法：直径30cm电解槽内盛大量电解液，将骨组织放在一个四周多孔的塑料小容器内放入电解液内，此容器通入白金丝或钨丝作阳极，在电解液内再放一白金丝或钨丝作阴极，通入6V直流电，电流强度1A～2A，调节两电极的距离来控制。电解液温度不超30℃～45℃，一般2～6小时即可脱尽。
脱钙后的处理
1、脱钙后的组织经流水冲洗4～12小时，除去残留的脱钙剂；
2、修去锯面的薄层组织，切成适当大小的组织块，进行常规脱水、透明、浸蜡及包埋；
3、用酸性液脱钙后的组织，苏木素染色时间应适当延长，在伊红中的时间应该缩短；
4、脱钙后组织切片在染色中较易脱落，充分烤片，染色前滴加2%～5%的火棉胶液，以使之粘贴牢固。
三、洗涤、脱水、透明
（一）组织的洗涤
1、洗涤的目的：防止组织中留有较多的固定液而影响脱水剂；
2、洗涤的方法：
（1）固定剂以水配制者：常用的固定剂是甲醛溶液（10%福尔马林溶液），用流水冲洗。大组织冲洗24小时，小组织冲洗2～4小时。
（2）固定剂含酒精者：一般不用冲洗，如需要冲洗必须用与固定剂中的酒精浓度相近或略低的酒精冲洗。
（二）组 织 脱 水
1、脱水的目的及原则：用某些溶剂逐渐将组织内吸收的水分置换出来，以利于透明剂和石蜡或火棉胶的渗入。
2、脱水剂的种类及特征：
特征：能与水在任何比例下混合；能与透明剂在任何比例下混合；
单纯脱水剂：脱水后再经二甲苯透明才浸蜡；
酒精：最常见的脱水剂。脱水能力强，但易使组织收缩、脆。
单纯脱水剂：脱水后再经二甲苯透明才浸蜡； 丙酮：脱水强，组织收缩严重，价格高。异丙醇：可代替无水酒精使用。价格贵。脱水兼透明剂：脱水后即可直接浸蜡。
正丁醇：为脱水剂兼有透明剂作用。用于植物标本的处理效果较好。叔丁醇：脱水兼透明。电镜标本制作时常用作中间脱水剂。
（三）组织透明或媒浸
目的是使石蜡能浸入组织块便于包埋。
1、二甲苯：最常用的透明剂，有毒、易挥发，透明力强，但组织易收缩变脆，小块组织以30分钟。
2、苯和甲苯：组织收缩小、不易变脆。
3、氯仿：即三氯甲烷。易发挥，透明力比二甲苯差，时间长，多用于大块组织的透明。
4、香柏油：为柏树树脂，收缩小，透明时间长，常用于染色后切片的透明。
四、组织浸蜡（透蜡）P48
（一）浸蜡的目的和方法：除去组织中的透明剂而代之以石蜡，以便切片。
（二）浸蜡剂的种类：
1、石蜡：经56℃～58℃石蜡浸蜡的组织包埋，有利于组织切片的连续性，对蜡块资料保存可靠，一般为3-4小时。
2、火棉胶：目前使用火棉胶浸入组织较少，多用于染色前的覆盖液。
3、碳蜡；
4、明胶。
五、组 织 包 埋 P49
（一）石蜡包埋法：为最常用的包埋法。
1、常规石蜡包埋法:包埋过程、包埋面的选择；
2、体液标本一般不做包埋和切片。
（二）快速石蜡包埋法：
1、操作过程：全程均加热，20～30分钟完成。（1）取材、固定：薄片1cmⅹ0.5cmⅹ0.3cm,在快速固定液（95%酒精、40%甲醛、冰醋酸）内加热煮沸1～2分钟。（2）脱水：组织厚度不超1.5mm，加入丙酮5 ～ 8ml，煮沸5～6分钟。（3）透明：加二甲苯加热1～2分钟。（4）包埋：石蜡包埋冰水冷却硬化。
3、碳蜡包埋法：即聚乙烯二醇。包埋熔点为38℃和52℃左右的分子量为1500和4000两种。适用于脂肪及脂类组织的制片。
4、明胶包埋法：
5、石蜡半薄切片包埋法：常根据组织类型进行脱水、透明和浸蜡。
6、树脂包埋法：适用于不脱钙骨髓活检组织、肝、肾穿刺活检和淋巴结组织等。
第二节 切片器具与切片
一、切片机：制作组织切片的主要仪器设备。
（一）切片机的种类及使用：
1、石蜡切片机：能将石蜡包埋的组织切出一定厚薄的切片。分为旋转式、滑动式、摆动式等。最常用的为旋转式。
2、冷冻切片机：多为恒冷箱切片机用于组织化学、免疫组化及病理诊断。
3、火棉胶切片机：多用于眼球、内耳、脊髓和脑的切片，切片厚度可达20µm～50µ。
二、组织切片刀 P58
（一）切片刀的种类： 其长度一般有 4cm、8cm、14cm、18cm、20cm、24cm等。
1、平凹型：一侧为直线，另一侧为凹度，大凹度刀适用于火棉胶切片，小凹度刀适于石蜡切片。
2、双平型：刀身两侧均无凹度，两面是平面。适用于冷冻切片和轮转式切片机的石蜡切片。
3、双凹型：刀身两侧均有凹度，适用于轮转式石蜡切片。
4、一次性刀片：需配置专用刀架。
（二）刀背套与刀柄：刀背套供磨刀时用，刀背套有金属和塑料两种。刀柄有木制及塑料制两种。
（三）磨刀与被刀：
1、手工磨刀法：
①磨刀前用软布试净磨刀石面尘垢；
②装上刀背和刀柄，滴磨刀油于磨刀石上；
③右手紧握刀柄，左手紧按刀背另一端，刀刃向前，逐渐推动刀片至磨刀的一端，从右到左全部磨完。
2、被刀：用被刀皮革被刀，与磨刀的动作相反；
三、石蜡切片制作 P60
（一）切片前的准备：
修整蜡块，然后置于冷水或冰箱中冷却，以增加硬度；
准备毛笔、眼科弯镊子；
载玻片均匀涂上薄层蛋清甘油，占2/3；
接通摊片机电源，调节摊片（42℃～48℃）
烤片（60-70℃左右）的温度；
（二）快速石蜡切片 P63 快速石蜡切片时，组织取材应薄，厚度一般不超过2mm，组织固定后要重新修正至1.5mm左右厚度，以利脱水，将组织块埋入预制的蜡块内，冷却硬化后方可切片（取材、脱水、透明浸蜡、包埋见）。
切片捞至载波片上，用酒精灯略加烘烤，再入二甲苯脱蜡，经95%酒精后即刻入水水化，随后即可进行常规快速苏木素伊红染色。
（三）冷冻切片制作 P64 组织经过冷冻后，其内的水分结冰，使组织变硬，有利于切成薄片。
一、设备要求：
（一）冷冻切片机：一般由转轮式切片机或推拉式切片机加上制冷装置而成：
1、二氧化碳制冷器；
2、半导体制冷器；
（二）恒冷箱冷冻却片机：利用压缩机通过制冷剂循环制冷。
冰冻切片机
二、制作过程
（一）取材、固定：选取有代表性的组织制片，厚度1～2mm。一般病理急诊、组织化学显示酶和免疫病理学进行荧光抗体研究等，多数都用新鲜组织直接冷冻，切片后再进行固定、染色或直接染色或孵化。采用二氧化碳冷冻设备制作须先固定。
（二）冷冻切片方法：
1、恒温箱冷冻切片法
（1）开机预冷：切片前2～3小时，所需温度如下： 各种新鲜组织冷冻切片参考温度（℃）脑、淋巴结、肝、肾、脾、睾丸-12--16 肌肉、肾上腺、甲状腺、子宫、卵巢-18--22 乳腺、皮肤、前列腺-22--28（2）放入、速冻、修整组织，待恒冷箱内温度降至要求温度后，将组织用OT包埋，再速冻1～2分钟，装于机样本夹上，修平；（3）调节抗卷板，以与刀刃平行对齐；
（4）切片：所需厚度为4µm～8µm，用毛笔展平，贴于洁净玻片上，晾干或吹干后染色；（5）切片后处理：清洁保养。
2、半导体冷冻切片法
3、二氧化碳冷冻切片法
（三）冷冻切片粘片法
1、蛋白甘油粘片法：
按石蜡切片的粘片法处理，但温度不宜超过40℃。烤干后即取出，70%酒精和自来水洗后即可染色。
2、Lillie明胶粘片法：切片放入1%明胶水溶液数分钟，捞到载玻片上，5%甲醛水溶液固定5分钟，水洗10分钟，即可染色。
3、酒精明胶粘片法：切片浸入0.1%或0.75%明胶溶液（用40%酒精配制）数分钟，用载玻片捞起后，室温干燥，入氯仿1分钟，经95%和75%酒精洗去氯仿，再经蒸馏水洗后即可染色。
三、注意事项
1、冷冻切片的组织不用固定；
2、组织尽可能新鲜，不能用湿的盐水纱布包裹和放入10℃冰箱内缓慢冷却，否则组织内水分可逐渐析出形成水晶，造成组织结构破坏；
3、冷冻包埋剂应适量；
4、组织太小，不能做冷冻切片；
5、冷冻时间太久的组织不能马上切片，以免损伤切片刀；
6、一般来说骨组织和钙化组织不能做冷冻切片。观察
第七章组织切片染色技术
第一节 病理切片染色概述 P68
一、概念：用染液对组织切片进行处理，使组织中的不同成分被染上相应的颜色，产生不同的折射率，以利于显微镜观察和分析。
三、染色的原理
染色就是染色剂和组织细胞相结合的过程。
（一）染色的化学反应：组织细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子相结合，碱性物质与酸性染料的阴离子相结合。具有酸性的细胞核被碱性苏木素液所染色，碱性的胞质与酸性染料伊红所染色。
（二）染色的物理作用：
1、渗透作用：染料进入组织；
2、吸附作用：把另一种物质的分子、原子、离子集中在界面上的过程；
3、吸收作用（溶解作用）。
三、常用染料概述：
（一）染料的性质：有色的无机物或有机化合物
1、发色团：能使染料分子产生颜色的基团，叫发色团；
2、助色团：能使染料分子颜色加深，并与被染物质分子形成亲和力的基团。
（二）染料的分类：
1、据染料来源：天然、合成染料和无机化合物
2、根据染料化学反应：酸性、碱性和中性染料
3、据染色对象：（1）组织染料： 1）结缔组织和肌纤维染料：有胶原纤维、网状纤维、弹力纤维和肌原纤维等染料； 2）神经组织的染料：尼氏体、神经轴突、神经髓鞘、神经胶质细胞等染料；（2）细胞染料：细胞核、细胞质染料等
常用染色剂简介见附录一。
五、常用染色术语的概念
一、普通染色：最常应用的是苏木素-伊红染色法，简称HE染色。
二、特殊染色：特染是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分。
三、单一染色：选用一种染料染色。
四、复染色：用两种不同性质的染料染色方法。
五、多种染色法：用两种以上染料的染色法。
第三节 染色前后的处理 P74
一、染色前的处理：
1、脱蜡至水：必须经过二甲苯脱蜡、各级酒精（100%、95%、85%、75%）至水洗的过程。
2、脱汞盐结晶：切片在脱蜡后用0.2%～0.5%碘酒精处理5～15分钟，使汞盐沉淀物溶解。
3、脱甲醛色素：在切片脱蜡至水后，用Verocay液（1%氢氧化钾水溶液1ml，80%酒精100ml）处理10分钟，然后流水冲洗5分钟再常规染色。
（二）染色后的处理：
1、分化作用：必须用1%盐酸酒精脱去所吸附的染料。
2、蓝化作用：分化后，用碱性水使细胞核变成蓝色。
3、染色后的脱水：低度到高度酒精逐步脱水。
4、染色后的透明：透明剂用二甲苯。
三、封固：
1、封固剂：
（1）甘油明胶封固剂
配制方法：明胶10g，蒸馏水60ml，甘油70ml，石炭酸0.25g。（用前将甘油明胶置于温箱内融化后即可封片）。（2）中性树胶（二甲苯树胶液）：属油性封固剂，组织切片需彻底脱水、透明。优良封固剂，可直接封片。
七、染色的注意事项
（1）具备实验室基本设备和染色准备工作（2）正确完成固定、脱水、透明、脱蜡步骤；
（3）染色过程中，既要按书本的方法进行操作，又要根据实际情况进行灵活运用。
第八章 组织切片常规染色技术 第一节 常规染色的概念
一、染色原理
（一）苏木素染色原理：苏木红和铝结合形成带正电的 蓝色色精，带负电的细胞核与带正电的蓝色色精以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
（二）伊红染色原理：伊红Y是一种化学合成的酸性染料。在伊红Y染料液中加入醋酸，使胞质中蛋白质带正电荷，可被带负电的伊红染料染色，从而使细胞质及红细胞等染成红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。
二、染液的配制 P80
（一）苏木素液：从苏木素的树中提炼的天然染料。
1、Harris苏木素液：最常用。
苏木素 1g 蒸馏水 200ml 无水酒精 10ml 氧化汞 0.5g 硫酸铝钾 20g 配置方法见书81页。染色3～4分钟。保存时间为一年。
（二）伊红染液：
0.5%伊红酒精染液:醇溶伊红Y0.5g，95%酒精100ml。染色时间1～3分钟。水溶性伊红酒精液： 沉淀酸化伊红Y酒精液：
2、Mayer苏木素改良配法：
（1）A液：苏木素2g，无水酒精40ml加热溶解；
（2）B液：硫酸铝钾100g，蒸馏水600ml，稍加热使硫酸铝钾在水中溶解，再将A与B液混合2分钟。用蒸馏水补足600ml，加入400mg碘酸钠充分混匀，苏木素染液呈紫红色即可。染色时间为10～20分钟。
3、Ehrlich苏木素液：苏木素2g，无水酒精100ml，甘油100ml，硫酸铝钾15g，蒸馏水100ml，冰醋酸10ml。（染色时间为10～20分钟）。
4、Gill改良苏木素液：苏木素2g，无水酒精250ml，硫酸铝钾17.6g，蒸馏水750ml，碘酸钠0.2g,冰醋酸20ml。染色时间为5分钟。
（三）0.5%～1%盐酸酒精分化液：
盐酸 0.5ml～1ml, 75%酒精99ml。此液用一段时间后需要延长时间或更换液体，新液体分化时间要短。
（四）蓝化液：“蓝化”是指苏木素液染细胞核后，通过盐酸酒精分化，切片由酸性转入弱碱性液体，使之变蓝的过程。1、50℃温水
2、稀氨水（1%氢氧化铵液）3 蒸馏水 100ml，氨水1ml。
三、染色方法 P83
（一）人工操作苏木素-伊红染色方法：
1、脱蜡至水：
（1）二甲苯Ⅰ脱蜡（脱蜡2-5分钟）；（2）二甲苯Ⅱ（2-5分钟）；（3）无水酒精Ⅰ（1-2分钟）；（4）95%酒精1分钟；（5）85%酒精1分钟；（6）75%酒精1分钟；（7）自来水洗2分钟；
2、苏木素染色：苏木素液染色5-10分钟；自来水洗1分钟；
3、分化返蓝：0.5%～1%盐酸酒精分化数秒至30分钟呈紫红色；自来水1分钟；用温水(50℃)蓝化5～15分钟(或稀氨水蓝化30秒，自来水洗5～10分钟)；
4、伊红染色：水溶性伊红可直接入伊红液，1分钟；自来水洗1分钟；
5、脱水、透明：
（1）85%酒精（20秒）；（2）95%酒精Ⅰ（1分钟）；（3）无水酒精Ⅰ（1分钟）；（4）二甲苯Ⅰ（1～2分钟）；（5）二甲苯Ⅱ（1～2分钟）。
6、封固：
（1）用中性树胶封片；
（2）附贴标签可书写病理编号。
（二）冷冻切片HE染色：
冷冻切片贴片后，用95%酒精和冰醋酸5ml的混合液固定1分钟，自来水洗30秒～1分钟，HE染色。
（三）快速石蜡切片染色：脱蜡至水、HE染色
第三节 染色中常见问题及注意事项 P85 HE染色结果：
细胞核被苏木素染成明显的蓝色；
细胞质被伊红染成红色。
第九章 组织切片特殊染色 P87 为了显示特定的组织结构或组织细胞特殊成分，采用特定的染料和方法对组织切片进行染色。第一节 结缔组织染色 P88
一、胶原纤维染色
Van Gieson染色法（简称VG染色）（书上无）
1、染料配制：
（1）铁苏木素液：见Masson三色染色（2）Van Gieson苦味酸酸性品液：
甲液：1.22%苦味酸饱和水溶液90ml，乙液 ： 1%酸性品红水溶液10ml。
两液提前配制，临用前混合使用。
2、染色步骤：
（1）切片脱蜡至水（2）蒸馏水洗（3）Weigert铁苏木素液染5～10分钟（4）自来水洗2分钟
（5）据情况可用0.5%盐酸酒精分化（6）自来水洗至变蓝再用蒸馏水洗（7）Van Gieson液染色3～5分钟（8）去染液，用95%酒精分化脱水
（9）无水酒精脱水（10）二甲苯透明（11）中性树胶封固。
3、染色结果：胶原纤维红色,肌纤维黄色, 细胞核黑色.4、胶原纤维染色的应用 P88（1）对梭形细胞肿瘤来源、性质提供诊断和鉴别诊断的依据；
（2）显示各种组织、器官病变时的修复情况与纤维化程度，如肝穿组织中纤维组织的含量与分布的观察；
（3）鉴定心肌坏死后疤痕的形成；
（4）鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化。
三、网状纤维染色 Gomori银染法: P92
1、染液配制：银氨溶液：甲液：硝酸银10.2g,蒸馏水100ml；乙液:氢氧化纳3.1g,蒸馏水100ml
2、染色步骤：（1）切片脱蜡至水（2）高锰酸钾氧化液（高锰酸钾0.5g,蒸馏水95ml,再加3%硫酸5ml)5分钟(3)水洗1分钟(4)2%草酸漂白2分钟,水洗2分钟(5)2%硫酸铁铵媒染2分钟(6)蒸馏水充分洗(7)氨银溶液染色1分钟(8)蒸馏水洗3次(9)20%福尔马林液还原5分钟(10)蒸馏水洗2次(11)入0.2%氯化金液中调色2分钟,蒸馏水洗2次(12)2%硫代硫酸钠固定2分钟,自来水、蒸馏水洗（13）必要时用VG或伊红复染（14）无水酒精脱水（15）二甲苯透明（16）中性树脂封固。
3、染色结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色。
4、网状纤维染色的应用
（1）区分上皮性与非上皮性肿瘤；（2）区分血管内皮瘤与血管外皮瘤；（3）判断原位癌与早期浸润癌；
（4）观察肝脏病变处的网状支架塌陷或增生的情况，判断病变性质、程度及发展与转归。
四、多色染色： P93
（一）Masson三色染色法： P93
1、染液配制：
（1）丽春红酸性品红液：丽春红0.7g，酸性品红0.3g，冰醋酸1ml，蒸馏水99ml（先配好醋酸溶液后，分别溶解丽春红或酸性品红）；亮绿液：亮绿1.0g，冰醋酸1ml，蒸馏水99ml。（2）苯胺蓝液：苯胺蓝2g，冰醋酸2ml，蒸馏水加至100ml。
（3）Weigert铁苏木素液：甲液：苏木素1g，95%酒精或无水酒精100ml；乙液：29%三氯化铁水溶液4ml，纯盐酸1ml，蒸馏水95ml（临用前取甲、乙两液混合即可，24小时内使用有效。）
2、Masson三色的染色步骤：（1）切片脱蜡至蒸馏水；
（2）Weigert铁苏木素染色5～10分钟；（3）流水稍洗；（4）盐酸酒精分化；（5）流水冲洗数分钟；
（6）丽春红酸性品红液染色5分钟；（7）蒸馏水稍冲洗；
（8）1%磷钼酸水溶液处理5分钟，镜下见肌肉纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可；（9）不经水而直接用苯胺蓝液或亮绿液染5分钟；（10）1%冰醋酸处理1分钟；（11）95%酒精、无水酒精脱水；（12）二甲苯透明；（13）中性树胶封固。
3、染色结果：胶原纤维呈蓝色（用苯胺蓝染）或绿色（用亮绿染），肌纤维、细胞质呈红色，细胞核呈蓝褐色。
（二）Mallory三色染色法 P94
1、染液配制：
（1）0.5%酸性品红水溶液；
（2）苯胺蓝橙黄G液：苯胺蓝0.5g，橙黄G 2g，磷钨酸1g，蒸馏水100ml。（先将1%的磷钨酸溶液配好，一半用于溶解苯胺蓝，另一半用于溶解橙黄G，加热溶解，冷却后分别过滤，可长期保存。临用前将两液混合）。（3）重铬酸钾液；
2、染色步骤：
（1）切片脱蜡至水；（2）Zenker固定液固定1小时；（3）充分水洗；（4）0.5%碘酒精处理5～10分钟；（5）0.5%硫代硫酸纳处理2～5分钟；（6）充分水洗，再用蒸馏水浸洗；（7）酸性品红液染5分钟；（8）水洗、蒸馏水洗；（9）苯胺蓝橙黄-G液染20～30分钟；（10）直接95%酒精快速分化；（11）无水酒精脱水；（12）二甲苯透明；（13）中性树胶封固。
3、染色结果：胶原纤维、网状纤维呈蓝色，心机纤 维橘红色，红细胞呈浅黄色，细胞核呈黑色。
结缔组织复合染色的应用（1）区分各种纤维成分；
（2）判定各种组织、器官的病变程度和修复情况；（3）鉴别某些梭形细胞软组织肿瘤的来源的判断（4）用于肾小球肾炎的诊断。
第二节 肌肉组织染色 P95
（一）Mallory磷钨酸苏木素染色法（简称PTAH）：
1、染液配制
（1）磷钨酸苏木素：苏木素0.1g, 磷钨酸2g, 蒸馏水100ml。
将苏木素加入20ml蒸馏水中,加热溶解，再将磷钨酸溶于80ml蒸馏水中。苏木素冷却后将两液混合放置3～3月后使用。此液可保存数年。急用时可加高锰酸钾0.15g促成熟,12～24小时即可用。
（2）酸性高锰酸钾液：5%高锰酸钾水溶液50ml；
0.5 硫酸水溶液50ml。
2、染色步骤：
（1）组织以Zenker液固定最佳；如用甲醛固定则先要用Zenker液处理（37℃温箱内）3小时；
（2）切片脱蜡至水，用碘液除汞，用95%酒精脱碘；（3）充分水洗；（4）酸性高锰酸钾液处理5～10分钟（5）自来水洗2分钟；（6）1%草酸漂白1分钟；（7）自来水洗，蒸馏水洗2次；
（8）磷钨酸苏木素液浸染24～48小时；（9）直接用95%酒精分化；（10）无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。
3、染色结果：横纹肌纤维、细胞核呈紫蓝色，胶原纤维、网状纤维呈玫瑰红色。
4、肌肉组织染色
常用于Mallory磷钨酸-苏木素染色法能显示与区分：(1)横纹肌纤维的正常与异常形态；
(2)诊断心肌损伤早期病变及全身弥漫性血管内凝血有一定参考价值；(3)用于横纹肌肉瘤时显示横纹，(4)用于显示神经胶质。
第三节 脂肪染色 P96 苏丹Ⅲ染色法：(书上无)
1、染料配制：
（1）苏丹Ⅲ染液：苏丹Ⅲ 0.15g,60%～70%酒精100ml。（将苏丹Ⅲ染料溶于60%～70%酒精形成饱和液，作长期备用液。临时配制时需要过滤才可使用。备用液仅用上清液。密封容器存放备用液）。
（2）甘油明胶液：明胶 5g，甘油35ml，蒸馏水 35ml。（先将明胶溶于蒸馏水中加热溶解，再加甘油充分混合，加1～2粒石炭酸。冷却后4℃保存，用时水浴加热）。
2、苏丹Ⅲ染色步骤：
（1）冷冻切片厚8µm～10µm；（2）蒸馏水稍洗；（3）Harris苏木素1～2分钟；（4）自来水洗，盐酸酒精分化、反蓝；（5）水洗、蒸馏水洗；（6）70%酒精浸洗；
（7）苏丹Ⅲ染液30～60分钟（如置于56℃温箱中可缩短时间）；（8）70%酒精分化数秒；（9）蒸馏水洗；（10）在空气中稍晾干；（11）甘油明胶液封固。
3、注意事项：采用冰冻切片染色。苏丹Ⅲ染液温浸时应加盖，防止染液中的酒精或丙酮挥发。在封固前，甘油明胶液应放置56℃温箱中加温，避免摇荡，防止封固时出现气泡。切片染色后不能长期保存，应尽快观察或照相。
4、染色结果：脂肪呈橘红色，脂肪酸不作色，细胞核呈淡蓝色。
5、脂肪染色的应用（1）鉴别细胞内空泡的性质（水样变性、脂肪变性或糖原）；
（2）显示动脉粥样斑块病灶内的脂质沉积、脂肪栓塞。
（3）神经系统一些变性、脱髓鞘疾病的诊断有极为重要的作用。
（4）脂肪染色主要用于卵巢纤维瘤与卵泡膜细胞瘤、肾母细胞瘤、皮脂腺癌的诊断和鉴别诊断。
第四节 糖原染色与粘液染色
一、过碘酸雪夫染色法（PAS法）：P98
1、染色配制：
（1）过碘酸氧化液：过碘酸0.5g，蒸馏水100g。（此溶液应放4℃冰箱保存）。（2）Schiff液：碱性品红 1g，1mol/L盐酸 20ml，偏重亚硫酸钠（钾）1g，双蒸馏水200ml。（先将双蒸馏水200ml煮沸，加入1g碱性品红，再煮沸2分钟。冷却至50℃加1mol/L的盐酸20ml，待温度降低至25℃时，加入偏重亚硫酸钠（钾）1g～1.5g,温室2小时后碱稍带红色，5小时后为无色液体，如有颜色应加入活性炭1g～1.5g,用双层滤纸过滤,盛于棕色磨口瓶内,放入4℃冰箱保存。
2、染色步骤：
（1）切片脱蜡至水；（2）蒸馏水洗；（3）0.5%过碘酸氧化液10～20分钟；(4)充分蒸馏水洗；（5）进入Schiff液染色10分钟（如室温低于15℃可稍加温）；（6）自来水洗10分钟；（7）用Mayer或 Harris明矾苏木素染细胞核3～5分钟；（8）盐酸酒精分化；（9）水洗；（10）无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。
3、染色结果：糖原及其它PAS反应阳性物质 染成红色，细胞核染成蓝色。
4、糖原染色的应用
（1）用于显示糖原，对明确细胞空泡的性质、糖原贮积病和糖尿病的诊断及某些透明细胞肿瘤的鉴别诊断方面具有重要作用。
（2）用于中性黏液物质，对低分化腺癌的诊断也有一定价值。
（3）清楚地显示基底膜（肾炎的诊断）、网状纤维、真菌菌丝、寄生虫及腺泡状软组织肉瘤中胞质内结晶体。
（4）观察缺血缺氧早期心肌坏死或梗死区的糖原减少情况。
粘液染色
二、奥辛蓝染色法（简称AB染色）：P99
1、染液配制：（1）AB液：（pH 2.5)奥辛蓝8GS 1g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml，麝香草酚2粒（防腐）。（先配好3%冰醋酸，然后溶解奥辛蓝。过滤后使用。pH值2.5～3.0之间.(2)0.5%中性红水溶液: 中性红 0.5g,蒸馏水加至 100ml。
2、奥辛蓝染色步骤：
(1）石蜡切片脱蜡至水；(2)AB液染色20～30分钟；（3）快速蒸馏水洗；（4）0.5%中性红染1～2分钟；（5）快速只能流水洗；
（6）95%酒精、无水酒精脱水；（7）二甲苯透明；（8）中性树胶封固。
3、染色结果：酸性粘液物质（及真菌菌丝、隐 球菌的夹膜）呈蓝色，中性粘液呈红色，混合 粘液呈紫红色，细胞核呈红色。
4、粘液染色的应用
（1）黏液性肿瘤的诊断和鉴别诊断，如黏液瘤、黏液肉瘤、脂肪瘤、胃肠道低分化腺癌、软骨黏液样纤维瘤；
（2）用于结缔组织疾病及慢性胃炎肠上皮化生等的诊断。
第五节 病原微生物染色 P100 石炭酸品红抗酸杆菌染色法：P101
1、染色配制：
石炭酸品红液：碱性品红 1g，无水酒精 10ml，石炭酸（5%）水溶液100ml。
（首先将碱性品红溶于无水酒精，然后与石炭酸水溶液混合，临使用前过滤）。
2、抗酸杆菌染色步骤：（1）石蜡切片脱蜡至水；
（2）将石炭酸品红液滴切片上，文火热至蒸气出现，离火染15～20分钟；（3）蒸馏水洗；
（4）1%盐酸酒精液分化，至无红色染料流下止；（5）蒸馏水洗；（6）1%美蓝液复染2分钟；（7）95%酒精分化，美蓝脱色，以示清楚；（8）无水酒精脱水；（9）二甲苯透明；（10）中性树胶封固。
3、染色结果：抗酸杆菌(如结核杆菌、麻风杆菌 等）呈红色，细胞核呈淡蓝色。
4、病原微生物染色的应用
用于结核病的干酪样坏死灶及麻风病中泡沫状细胞（瘤型麻风）内的抗酸杆菌，其形态特点是：结核分支杆菌弯曲细长，长短粗细不一；而麻风杆菌短粗成堆，数量较多（称为麻风团）。
淀粉样物质的染色（书上无）Bennhola刚果红染色法：
1、染色配制：
（1）1%刚果红水溶液： 刚果红 1g，蒸馏水100ml。（2）碳酸锂饱和水溶液：碳酸锂 1.25g，蒸馏水100ml。
2、染色结果：
淀粉样物质呈红色，其它组织呈浅红色，细胞核呈蓝色。
3、Bennhola刚果红染色步骤：（1）石蜡切片脱蜡至水；（2）明矾苏木素染液淡染细胞核3～5分钟；（3）1%盐酸酒精液稍分化。水洗1～2分钟；（4）充分水洗返蓝；（5）蒸馏水稍洗；
（6）1%刚果红溶液染色10～30分钟或更长；（7）经碳酸锂饱和溶液处理1～2分钟；
（8）80%酒精液急速分化至无红色染液流下为止；（9）水洗1～2分钟；
（10）95%酒精脱水及无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。
4、淀粉样物质的染色的应用
（1）淀粉样物质染色能显示变性程度:如全身淀粉样变性；（2）用于全身消耗性疾病的观察:如结核病、甲状腺髓样癌等；（3）用于肿瘤的诊断和鉴别诊断:如内分泌肿瘤的间质常出现淀粉样物质沉着，又如甲状腺髓样癌、胰岛细胞瘤、肺小细胞癌等，淀粉样物质染色阳性可作为诊断重要依据；
（4）为某些疾病的诊断与鉴别诊断提供依据:钙化上皮瘤、声带息肉等常出现淀粉样变性，可为诊断依据。
黑色素染色
Masson-Fontana染色法：
1、染液配制：
（1）Masson-Fontana染：10%硝酸银 15ml，蒸馏水 15ml。（将浓氨水逐滴加入10%硝酸银液中直至微乳白色，并加入蒸馏水15ml，过滤后静置1～2小时后使用。4℃冰箱保存，恢复室温后使用，每次使用前应重新过滤）。（2）5%硫代硫酸钠水溶液。
2、染色结果：黑色素、嗜银细胞颗粒呈黑色，细胞核、胶原纤维呈红色。
3、黑色素（Masson-Fontana）染色步骤：（1）10%福尔马林固定组织，石蜡包埋；（2）切片脱蜡至水；（3）蒸馏水充分洗；
（4）用Masson-Fontana液室温染18～48小时；（5）蒸馏水细数次；
（6）用5%硫代硫酸钠水溶液固定5～10分钟；（7）蒸馏水洗数次；
（8）用0.5%中性红对比染色1～2分钟；（9）蒸馏水洗5～10分钟；（10）无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。
4、黑色素染色的应用 主要用于黑色素瘤的诊断，尤其是无色素性的分化差的黑色素瘤的诊断极为重要；对淋巴结内转移的肿瘤细胞，证实有无黑色素的存在对肿瘤的诊断可提供有利的证据；还有一些肿瘤及疾病中也存在色素，如色素性神经瘤、透明细胞肉瘤、黑色棘皮病、老年疣等等均可提供诊断依据。
第十五章 病理检验技术进展 P177
一、计算机图像分析技术
二、流式细胞仪技术
三、分子病理学技术
第十六章 病理档案管理 P190
二、组织制片常用玻璃器具：（1）染色缸：
（2）标本瓶：用于脱水、透明及染色；（3）培养皿：盛装蛋清甘油；
（4）配制试剂用具：量筒、量杯、烧杯、三角烧瓶、漏斗、吸管、滴管、滴瓶、试剂瓶、蒸馏水瓶、玻璃棒及研钵等；（5）酒精灯：用于染液配制等；（6）载玻片：（7）盖玻片：
3、免疫组化常用设备：（1）微波炉或高压锅；（2）微量加样器；（3）微波震荡器；
（4）恒温水浴箱或湿盒；
4、常用器械盒工具：
（1）标本巨检器械：解剖刀、手术刀、手术剪、镊子、血管钳、不绣钢尺、搪瓷盘等；（2）尸体剖验器械；
三、常用玻璃器材的清洗方法
（一）新购玻璃器皿的处理: 先用洗衣粉浸泡洗刷,自来水洗后再用1%～2%盐酸水溶液浸泡数小时后，用自来水冲洗干净，再用蒸馏水洗2次。
（二）使用后玻璃器皿的清洗方法：
（1）自来水冲洗；
（2）毛刷蘸洗衣粉洗擦干净；
（3）自来水冲洗；
（4）凉干后放入清洁液内浸泡24小时；
（5）自来水冲洗干净，最后用蒸馏水洗2次；
（6）把器皿置于有孔架上凉干或温箱中烤干，备用。
清洁液的配制：重铬酸钾+浓硫酸+蒸馏水
（三）新购载玻片的处理：
高质量的已经处理，可直接使用。对不净的可放入清洁液浸泡5～12小时以上，流水冲洗，蒸馏水清洗，95%酒精浸泡，擦干备用
（四）新购盖玻片的清洗：
投入清洁液中浸泡1～2小时左右，经流水反复冲洗，蒸馏水洗，后投入95%酒精浸泡数分钟，再转入纯酒精中浸泡，使用前用洁净绸布擦干或在温箱中烤干备用。
（五）旧载玻片的清洗：
用洗衣粉液煮沸30分钟。
（六）旧盖玻片的清洗：
先置入1%洗衣粉液中煮沸1分钟，离火，待沸腾水泡平下后，再行煮沸，反复2～3次即可。基层医院病理科（室）应完成：
1、常规石蜡切片：按常规，在3~5天发出报告；
2、冷冻切片或快速石蜡切片：术中快速病理诊断。
3、常用特殊染色和免疫组织化学检查：据临床病理诊断的需要。
4、诊断细胞学检查：完成临床脱落细胞学及穿刺组织涂片检查。
5、尸体剖验检查：与临床医师密切结合，开展新生儿及成人尸检，提高诊断治疗水平。
第三篇：《临床基因扩增检验试验室管理暂行办法》
卫医发[202_]10号
卫生部关于印发《临床基因扩增检验试验室管理暂行办法》的通知
各省、自治区、直辖市卫生厅局、新疆生产建设兵团卫生局,部各直属单位、卫生部临床检验中心:
为加强临床基因扩增检验实验室管理,规范临床基因扩增检验行为,防止滥用,保证临床诊断、治疗的科学性、合理性,保障患者合法权益,特制定《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》。现印发给你们,请遵照
执行。
请有关省、直辖市卫生厅局将此文件传达至部管医院（即原卫生部直属医科大学附属医院）。
临床基因扩增检验实验室管理暂行办法
第一章 总 则
第一条 为规范临床基因扩增检验实验室管理,保证临床基因扩增检验质量,使临床诊断和治疗更为科学、合理,特制定本办法。
第二条 临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的,以扩增检测DNA或RNA为方法的检测技术,如聚合酶链反应(PCR)、连接酶链反应(LCR)、转录依赖的放大系统(TAS)、自主序列复制系统(3SR)和链替代扩
增(SDA)等。
第三条 本办法适用于开展临床基因扩增检验的实验室。临床基因扩增检验实验室设立在二级以上医院。第四条 临床基因扩增检验实验室必须使用经国家药品监督管理局批准的临床检验试剂开展临床基因扩增
检验项目。
第五条 卫生部临床检验中心(以下简称卫生部临检中心)和省、自治区、直辖市临床检验中心(以下简称省临检中心)负责对所辖行政区域内临床基因扩增检验实验室的质量监督管理工作。
第二章 实验室设置和验收
第六条 拟设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》(见附件)筹建实验室;筹建完成后,由其法定代表人向卫生部临检中心提出技术验收申请。申请时需提交以下材料:
(一)《医疗机构执业许可证》复印件;
(二)可行性研究报告:
1、拟设临床基因扩增检验实验室医疗机构的所在地医疗卫生资源状况、本机构的基本情况、对临床基因扩增检验的需求情况以及临床基因扩增检验实验室运行的预测分析;
2、拟设临床基因扩增检验实验室的设置平面图;
3、拟设临床基因扩增检验实验室将开展的检测项目、实验设备条件和有关技术人员资料。
第七条 卫生部临检中心和省临检中心共同组织相关专业的专家组(以下简称专家组),按照《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》对提出申请的临床基因扩增检验实验室进行技术验收。验收完成后,在20日内将
验收报告寄送至申请机构。
第八条 经专家组技术验收合格的,医疗机构将本办法第六条规定的材料及专家组验收报告送省级卫生行政部门备案。在将符合规定的全部材料送达省级卫生行政部门备案后15日内,未收到省级卫生行政部门不同意的意见,方可开展专家组技术验收合格的临床基因扩增检验项目。第九条 未经专家组验收合格并报省级卫生行政部门备案,医疗机构不得擅自开展临床基因扩增检验项目。第三章 实验室监督管理
第十条 临床基因扩增检验实验室必须按照《临床基因扩增检验实验室工作规范》(另发)开展临床基因扩增检验工作。
第十一条 临床基因扩增检验实验室技术人员必须进行上岗培训。经培训合格者,由培训单位发给合格证书,并将培训合格人员名单报卫生部临检中心备案。获得培训合格证书者方可从事临床基因扩增检验工作。培训单位为卫生部临检中心,或由省级卫生行政部门指定并经卫生部临检中心认定的机构。培训时使用规定的统一教材。
第十二条 以科研为目的的基因扩增检验项目,不得向临床出具检验报告,不得向病人收取任何费用。第十三条 临床基因扩增检验实验室必须按照《临床基因扩增检验实验室工作规范》开展室内质量控制,并参加卫生部临检中心组织的室间质量评价。
第十四条 卫生部临检中心按照本办法和《临床基因扩增检验实验室工作规范》协调、组织省临检中心对临床基因扩增检验实验室的检验质量进行监测。监测结果报省级卫生行政部门,同时抄送被监测的临床基因扩增检验实验室所在医疗机构。
第十五条 卫生部临检中心或省临检中心受省级以上卫生行政部门委托可对临床基因扩增检验实验室进行现场检查,现场检查工作人员在履行职责时应当出示证件。在进行现场检查时,检查人员有权调阅有关资料,被检查机构不得拒绝或隐瞒。
第十六条 卫生部临检中心对在室间质量评价中不合格的临床基因扩增检验实验室提出警告;对连续二次或三次中有二次发现临床基因扩增检验结果不合格的临床基因扩增检验实验室,卫生部临检中心报省级以上卫生行政部门,由省级以上卫生行政部门责令其暂停有关临床基因扩增检验项目,限期整改。经专家组进行再次技术验收并合格,并报省级卫生行政部门核准后,方可重新开展被暂停的临床基因扩增检验项目。第十七条 对于未经卫生部临检中心组织的专家组技术验收合格并报省级卫生行政部门备案,擅自开展临床基因扩增检验项目的医疗机构,由省级卫生行政部门依据《医疗机构管理条例》第四十七条和《医疗机构管理条例实施细则》第八十条予以处罚,并予以公告。公告所需费用由被公告机构支付。
第十八条 出现下列情况之一的临床基因扩增检验实验室,由省级卫生行政部门责令其停止开展临床基因扩增检验,并对其所在医疗机构予以公告。公告所需费用由被公告机构支付:
(一)开展超出卫生部临检中心组织的技术验收合格并报省级卫生行政部门备案的临床基因扩增检验项目的;
(二)使用未经国家药品监督管理局批准的试剂开展临床基因扩增检验的;
(三)在临床基因扩增检验中未开展室内质量控制的;
(四)在临床基因扩增检验中未参加室间质量评价的;
(五)在临床基因扩增检验中弄虚作假的;
(六)以科研为目的的基因扩增检验项目向临床出具报告并向病人收取费用的;
(七)使用未经培训合格的专业技术人员从事临床基因扩增检验的。
第四章 附 则
第十九条 对采供血机构的基因扩增检验实验室开展基因扩增检验项目的管理,参照本办法执行。第二十条 卫生部临检中心和省临检中心组织的专家组对申请开展临床基因扩增检验的实验室进行技术验收所需费用按国家有关规定执行。第二十一条 本办法由卫生部负责解释。第二十二条 本办法自发布之日起施行。临床基因扩增检验实验室基本设置标准
根据《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》，制定本标准。
一、临床基因扩增检验实验室区域设置原则
(一)临床基因扩增检验实验室原则上分为四个分隔开的工作区域：
1、试剂贮存和准备区
2、标本制备区
3、扩增反应混合物配制和扩增区
4、扩增产物分析区
如使用全自动分析仪,区域可适当合并。
（二）各工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品混用。
(三)进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,即试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
(四)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出。
二、工作区域仪器设备配置标准(一)试剂贮存和准备区 1、2～8℃和-15℃冰箱
2、混匀器
3、微量加样器(覆盖l～1000ul)
4、移动紫外灯(近工作台面)
5、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)
6、专用工作服和工作鞋
7、专用办公用品(二)标本制备区 1、2～8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱
2、高速台式冷冻离心机
3、混匀器
4、水浴箱或加热模块
5、微量加样器(覆盖1～1000ul)
6、可移动紫外灯(近工作台面)
7、超净工作台
8、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)
9、专用工作服和工作鞋
10、专用办公用品
如需处理大分子DNA,应备有超声波水浴仪。
（三）扩增反应混合物配制和扩增区
1、核酸扩增仪
2、微量加样器(覆盖1～1000ul)
3、可移动紫外灯(近工作台面)
4、消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)
5、专用工作服和工作鞋
6、专用办公用品
（四）扩增产物分析区
视检测方法不同而定。基本仪器设备如下：
1、微量加样器(覆盖1～200ul)
2、可移动紫外灯(近工作台面)
3、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头(带滤心)
4、专用工作服和工作鞋
5、专用办公用品
介绍一下瑞典的一个临床检验实验室：（与颠牛兄的帖子对照，红色为该实验室情况）、临床基因扩增检验实验室区域设置原则
(一)临床基因扩增检验实验室原则上分为四个分隔开的工作区域：
1、试剂贮存和准备区
2、标本制备区间
3、扩增反应混合物配制和扩增区
4、扩增产物分析区
如使用全自动分析仪,区域可适当合并。按此原则分成不同房间，该实验室分为
1。标本处理室，处理血样、组织标本，提取DNA RNA 2。试剂储存、反应混合物配置室，这是“最干净”的的房间，任何DNA、RNA不准进入此房间 3。DNA操作室，DNA、cDNA储存、反应混合物配好后加样。但是PCR扩增产物不准进入此房间。4。PCR反应室，进行pcr反应扩增
5。post pcr室：产物分析，与上述房间离得很远，不在一层楼上，进行产物电泳、测序、酶切等。
（二）各工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品混用。
(三)进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,即试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。除此之外，在post pcr操作之后如果想再进入前面的区域操作，必须换衣服。原则上不允许同一天内在post pcr之后再进入前面的区域操作，只有紧急情况下可以，比如急症检验。(四)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出。除了上班穿的工作服工作鞋，还要套上有点像手术衣的长袍。
二、工作区域仪器设备配置标准
除了牛兄帖子上的配置和规则外，进工作台面的紫外灯每天消毒9个小时；微量枪最迟每半年测量一次（感觉人家的排枪跟国内实验室的微量枪一样多，每个操作台都有一个排枪，一般是5－50ul）；在试剂储存、反应混合物配置室，不准用任何此房间外的东西（接手机也不行算机都要定期进行磁盘碎片整理。
他们在每个pcr反应中都检测每个房间有没有污染，如果配反应混合液的房间有污染了，该房间所有的东西必须拿出去专门消毒，包括所有仪器、家具、冰箱、办公用品。
另外获得临床检验资格比较难，全瑞典只有三个实验室有资格，不知道卡洛林斯卡有没有（因为我知道的两个实验室都不是卡洛林斯卡的，一个在歌德堡的，一个在乌普萨拉）。获得资格后，每年审核一次，每四年大审一次，所以他们都很小心。
他们的检验收费都很贵，APO E的基因型分析大概相当于人民币600－800，用real time做BCR定量分析，一个血样要4000左右。，任何参观者如果不换衣服鞋子，只能在门外看一眼。不过他们不用超净工作台。此外还有很多规则，连计
第四篇：临床检验
【抗凝剂原理适用范围】枸橼酸钠/EDTA盐/肝素①原理：与钙螯合/与钙螯合/加强AT-Ⅲ，阻止凝血酶形成，抑制血小板聚集②范围：血栓止血、血液保养液,（109mmol/L 1：9）ESR（106mmol/L 1：4）/多项血液检查尤其PLT，血细胞分析仪/多数检查项目③不适用范围：溶解度低/血栓与止血检查，血小板功能检查/ CBC 特别是WBC和DC。【显微法和血细胞分析仪】①显微镜法优点：设备简单、价低，适用于基层和分散就诊者。缺点：费时、重复性较差，准确性取决于操作者技术水平，误差散在。②血细胞分析仪法优点：操作简便，效率高，重复性好，适合于大批标本检测。缺点：仪器较贵，准确性取决于仪器的性能及工作状态。如质控差，成批误差。【红细胞和血红蛋白意义】1.减少：贫血。1）生理性①6个月-2岁婴幼儿（原料不足）②妊娠中、晚期（稀释）③老年人（功能减退）；2）病理性①骨髓造血功能低下：再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移②原料缺乏：缺铁性贫血、巨幼贫③破坏增加：各种溶血性贫血④丢失过多：急、慢性失血。2.增多：1）生理：新生儿、高原生活、剧烈运动；男性比女性高。2）病理①相对：血液浓缩所致。剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤②绝对：慢性心肺疾病、真红。【HiCN）测定原理及注意事项】溶血 Hb(除SHb外)高铁氰化钾Hi+CN-HiCN(棕红色)特定条件下，ε=44L/(mmol·cm)，直接计算。注意①分光光度计必须符合WHO标准。否则需用： HiCN参考液制作标准曲线or计算K值；带标准直接计算②优点：操作简便；结果稳定可靠；可测多种Hb（除SHb外）；直接定值③致命弱点：剧毒④不能测SHb，对HbCO转化慢⑤脂血、高球蛋白、高白细胞、血小板增多可致Hb假性增高。质量控制①技术误差 稀释倍数准确，分光光度计经常校正②HiCN转化液棕色玻璃瓶保存，塑料容器会使CN—丢失。（文-齐液）③HiCN参考液是制备标准曲线、计算K值、校正仪器及其它测定方法的关键物质。注意参考品质量标准。【血细胞比容测定HCT】红细胞在全血中所占体积的比值。影响：RBC数量、大小。①温氏法：血浆残留量较高，标本量大¸耗时长目前已逐渐为微量法所取代②微量法（首选）：残留血浆量较低，标本量小，简便、快捷。血细胞分析仪校正③血细胞分析仪测定：Hct = RBC ×MCV 避免血浆残留引起误差。注意：血浆渗透压异常，有误差。意义①与RBC相似②真红、输血及输液疗效观察指标③计算MCV和MCHC④血液流变学指标，增加表明血粘度增高。【MCV、MCH、MCHC】平均红细胞体积：Hct/RBC×1015（82~92）、平均红细胞血红蛋白含量：Hb/RBC×1012（27~31）、平均红细胞血红蛋白浓度：Hb/Hct（320~360）MCV/MCH/MCHC①正常细胞性贫血：正正正，急性失血、急性溶血、再生障碍性贫血、白血病②大细胞性贫血：增增正，叶酸、VB12缺乏或吸收障碍③单纯小细胞性贫血：减减正，慢性炎症、尿毒症④小细胞低色素性贫血：减减减，铁缺乏、VB6缺乏、球蛋白生成障碍、慢性失血。【网织红细胞计数（Ret）】未完全成熟的RBC（晚幼与成熟RBC），较大，含嗜碱性物质（核糖体和RNA），可被某些染料活体染成蓝色网状或颗粒状结构。评价骨髓造血功能。评价：1.显微镜①玻片法：涂片困难、染色时间短，结果不准。②试管法：染色时间可长，重复涂片，手工法推荐。③WHO推荐新亚甲蓝。④显微镜 简单、价廉，效率低，精密度低。ICSH推荐Miller窥盘。2.仪器 流式细胞仪法：测量细胞多、避免主观因素、方法易于标准化。可测Ret多个参数。缺点：晚幼红、幼稚白细胞、巨大血小板干扰。临床意义1.判断骨髓红系造血功能1）Ret增多：骨髓造血旺盛。①溶血性贫血↑↑②急性失血性贫血↑③缺铁贫和巨幼贫正常或轻度↑2）减少：骨髓造血功能低下绝对值＜15×109/L再障诊断标准之一。2.作为贫血治疗的疗效观察指标①缺铁贫和巨幼贫治疗后，先Ret↑，后RBC及Hb逐渐升高。②溶血和失血性贫血治疗后:·Ret逐渐降低，得到控制;·持续高值，未控制或加重。网织红细胞生成指数（RPI）=(Ret%×100/Ret成熟天数)×(病人HCT/正常人HCT)。RPI＞3，溶血性贫血或急性失血性贫血；RPI＜1，骨髓增生低下红系成熟障碍致贫血。【影响血沉】红细胞在一定条件下沉降速度1）血浆因素：①增快: 纤维蛋白原、球蛋白、胆固醇、甘油三酯②减慢: 清蛋白、糖蛋白及卵磷脂2）红细胞因素①数量②形态。3)其它①血沉管位置②温度③感染④药物。【WBC临床意义】1.中性粒细胞（1）生理性增多①年龄：DC：N与L之间2次交叉（6~9天，4~5岁）②日间变化：下午较高③剧烈运动、激动、严寒、暴热④妊娠、分娩（2）病理性增多①急性感染：化脓性球菌②严重组织损伤及大量血细胞破坏：严重烧伤、大手术后、心肌梗死、急性溶血③急性大出血：内脏破裂、宫外孕破裂④急性中毒：化学药物、代谢性中毒⑤恶性肿瘤⑥白血病（3）减少①某些感染：伤寒、副伤寒、流感②某些血液病：再障③慢性理化损伤：X射线、氯霉素④自身免疫性疾病：SLE⑤脾功能亢进。2.淋巴细胞(１)增多：婴幼儿期较成人高①绝对：病毒或细菌传染病，传染病恢复期，肾移植排异反应前期，急淋、慢淋，慢性感染②相对：再障、粒缺(2)减少：放射线、肾上腺皮质激素；N↑可导致L↓。3.单核细胞(1)增多：婴幼儿较成人稍高。①感染：亚急性感染性心内膜炎、急性感染恢复期、肺结核②血液病：单核细胞性白血病、恶性组织细胞病、淋巴瘤及MDS。4.嗜酸性粒细胞（1）增多①超敏反应性疾病②寄生虫病③皮肤病④血液病：如慢粒（2）减少①伤寒、副伤寒、大手术后②长期使用肾上腺皮质激素。5.嗜碱性粒细胞（1）增多：慢粒、嗜碱性粒细胞性白血病 【嗜多色性细胞polychromatic】稍大，属于未完全熟细胞。活体染色即网织红细胞，增多反映骨髓造血功能旺盛，增生性贫血。【染色质小体】紫红色圆形小体，位于成熟或晚幼红细胞胞质中，核残余物。溶贫、巨贫、脾切除及红白血病。【有核细胞】正常成人外周血无。增生性贫血，尤其溶贫。也可见于红白血病、髓外造血、骨髓纤维化。【核左移】外周血液的中性杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒，中幼粒细胞，甚至早幼粒细胞的现象，常伴中毒颗粒等毒性变化。急性化脓性感染。【异型淋巴细胞】在病毒、原虫、感染，药物反应，结蹄组织疾病，应激状态或过敏等因素刺激下，淋巴细胞增生并发生形态上的变化，变现为胞体增大，胞质增多，嗜碱性增强、细胞核母细胞变化。分：Ⅰ型(空泡型)：Ⅱ型(不规则型)：Ⅲ型(幼稚型)：一般病毒感染<5%，传单>10%。【RDW（红细胞体积分布宽度）】反映外周血红细胞体积大小异质性的参数，用红细胞体积的变异系数表示。意义①贫血形态学分类（RDW/MCV）②诊断缺铁贫。小细胞低色素贫血、RDW正常则缺铁贫可能不大③缺铁与轻型地贫：小细胞低色素，前RDW升高，后正常。【仪器性能评价】①空白检出限：本底②分析测量区间（AMI）：稀释效果，线性范围③检测下限与定量检测下限④精密度：分批内、批间及总精密度。标本老化⑤携带污染率：(l1-l3)/(h3-l3)·100%⑥准确性：与真值一致性。参考方法(校准品测)⑦对异常标本和干扰物灵敏度⑧可比性：与常规方法测定结果比较⑨白细胞分类：重复性、准确性。【病理因素影响】①高球蛋白血症、血栓性疾病存在冷纤维蛋白使血中非晶体物聚集，致使WBC、PLT增加②低色素性贫血、某些肝病RBC溶血不全影响Hb测定、WBC增加③高脂血症致Hb增加④有核红细胞、WBC过高影响。【出血时间测定BT】将皮肤刺破后，血液自然流出到自然停止所需的时间。影响：1.血小板数量和质量2.血管壁完整性。方法①出血时间测定器法(TBT首选)伤口长度和深度固定，结果准确、敏感、重复性好。病人不易接受。高度怀疑血管因素异常时才做。②Ivy法：长度和深度难于控制，可靠性较差，淘汰。【活化部分凝血活酶时间测定（APTT）】（延长10s以上）1.内凝筛选。2.延长①Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ减低，能检出Ⅷ:小于25％的轻型血友病②Ⅰ、Ⅱ、V、X严重缺乏，如肝病，维生素K缺乏③抗凝物质：口服抗凝剂、血循环中存在病理性抗凝物质④纤溶活性增强。3.缩短①高凝状态，DIC高凝期②血栓性疾病，心、脑血管病变，深静脉血栓。4.监测肝素治疗。【血浆凝血酶原时间（PT）】（超过正常3s）（外凝）。意义1.延长①先天性凝血因子I、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏②获得性凝血因子缺乏，严重肝病、维生素K缺乏纤溶亢进、DIC晚期③血中抗凝物质增加，口服抗凝剂、肝素。2.缩短DIC早期，心肌梗死、脑血栓形成。3．INR（国际标准化比值）监测口服抗凝药首选。质控1．采血顺利，避免溶血、凝固，抗凝剂比例准确。2.及时离心，务必除去血小板。3．2h内测定，4℃不超过4h。4．组织凝血活酶试剂ISI值以1.0~1.5为宜。5.37±1℃。6.双份PT相差＜5%，否重做。【血浆凝血酶时间测定（TT）】在待检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后，血浆凝固所需时间。共同途径、抗凝或纤溶亢进。超过3s。意义：循环抗凝物质检查1.延长①肝素或肝素类抗凝物质存在②低（无）Fg血症、异常Fg病、FDP增多。2.TT缩短标本中有微小凝块。3.链激酶、尿激酶作溶栓治疗的监护指标。【尿标本采集】患者准备1.一般要求①清洁标本采集部位；②新鲜尿、避免污染；③明确标记。２.特殊要求①采集清洁尿（中段尿、导尿标本等）②婴幼儿尿（消毒会阴部，塑料采集袋）。容器准备：１.惰性材料2.规格：容积＞50ml,开口直径＞4cm,平底（一次性尿杯）3.干燥洁净4.带密封口装置5.特殊容器。①尿三杯试验：适于泌尿系统疾病初步定位（出血、炎症）。第三杯：膀胱三角区、颈部、后尿道；第一杯：尿道或膀胱颈；三杯：膀胱颈以上部位。【检测后标本处理】①消毒后向下水道排放：检验后标本用过氧乙酸（10g/L）或漂白粉（30-50g/L）②交环卫部门处理③容器消毒回收：次氯酸钠（10g/L）浸泡2h④消毒后烧毁：耗材。【尿液标本保存】1.低温冷藏：2℃-8 ℃，6h内，有形成分保存。2.冰冻：－20℃-－70℃，离心，除去有形成分，冰冻上清液(化学成分)。3.化学防腐①甲醛: 浓度400g/L，用量5ml/L, 有形成分形态固定②甲苯: 用量5-20ml/L，尿化学成分定性或定量③麝香草酚：用量＜1g/L，有形成分镜检、尿浓缩T.B、化学成分④浓盐酸：用量5-10ml/L，化学成分（激素）定量⑤其他：冰乙酸: 儿茶酚胺、雌激素等；戊二醛: 尿沉淀物；碳酸钠: 卟啉尿、尿胆原 【血红蛋白尿hemoglobinuria】尿液游离Hb>0.3mg/L,而镜下未见完整RBC，外观为棕色或酱油色, OBT(+)。见于血管内溶血，蚕豆病、输血反应。【肌红蛋白尿（myoglobinuria）】尿中含Mb，外观呈暗红色，OBT(+)。肌肉组织广泛损伤、变性，如急性心梗等。硫酸铵溶液或单抗。【Hb尿与血尿】①上清液：红色/无色②OBT(上清)：强阳/阴，弱阳③尿蛋白定性(上清)：阳性/阴，弱阳④沉渣镜检：RBC碎片，无/RBC完整。【胆红素尿bilirubinuria】大量结合胆红素，呈深黄色，振荡后泡沫呈黄色。阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。【乳糜尿chyluria】深部淋巴管阻塞或泌尿系淋巴管破裂后乳糜液溢入尿中，尿液乳白色混浊。寄生虫（丝虫）或非寄生虫（结核、肿瘤、创伤、手术等）。【尿比密SG】尿液在4℃时与同体积纯水质量之比，是尿中所含溶质浓度的指标，可粗略反映肾脏浓缩稀释功能。评价①比重计法：需校正;操作繁、标本量大、影响（温度,蛋白,葡萄糖）②折射仪法：标准化，标本少，自动温度补偿；需校正蛋白、葡萄糖,标准参考方法③试带法: 简便，但干扰多，测定范围窄，精密度差，过筛试验④称重法⑤超声波法。【尿渗量(Osm)】尿渗透浓度简,指尿中具有渗透活性的全部溶质微粒总数量,只与溶质颗粒数目有关；与粒子种类、大小、电荷无关。精确反映肾脏浓缩稀释功能。【蛋白尿】尿蛋白排出量＞150mg/24h或浓度＞100mg/L(小儿＞4mg/m2/h)或尿蛋白定性（＋）评价①试带:简便,快速；影响因素多,仅A敏感；筛查②加热醋酸: 准确,A、G均敏感；灵敏度低, 操作繁③磺基水杨酸:简便，灵敏度高，多种蛋白均反应；确诊实验④SSA比浊法: 线性范围窄,影响多，欠准确⑤双缩脲比色: 对A/G均敏感；灵敏度较低，操作繁⑥丽春红S染料结合: 灵敏度很高，对A/G均敏感，线性范围宽，干扰少；操作繁⑦免疫法及电泳：灵敏、特异，前景好。干扰①pH：＞9.0 或＜3.0手工定性假（-）②离子强度：过低则加热乙酸法假（-）③药物：青霉素致磺柳酸假+，试带假-④标本量及反应时间⑤标本污染：如分泌物致假+。1.肾小球性：原发性肾小球损害性疾病、肾病综合征和继发性肾小球损害性疾病如糖尿病。Ａ.选择性：肾病综合征。Ｂ.非选择性原发性肾小球疾病或继发性如ＤＭ肾炎。2.肾小管：肾盂肾炎、间质性肾炎, 中毒，肾移植后排斥反应。3.混合性：肾小球或肾小管疾病后期、全身性疾病：糖尿病肾病4.溢出性：本周氏：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、血红蛋白尿、肌红蛋白尿、急性白血病(溶菌酶),胰腺炎(淀粉酶)。5.组织性：肾小管炎症、中毒。【糖尿】血糖浓度>8.88mmol/L（肾糖阈)或肾小管重吸收功能下降，尿糖定性试验（+）尿液。肾血流量、肾糖阈 肾糖阈。1.定性①班氏糖定性:利用葡萄糖还原性将硫酸铜还原;②试带：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD);③薄层层析:计算比移值(Rf).2.定量①葡萄糖氧化酶(GOD):同血糖测定, 先以班氏定性,再稀释至3g/L以下。②薄层层析: 斑点面积或颜色深浅计算。评价①班氏糖定性: 简便，灵敏,特异性差，有假+（VitC）②试带：特异、灵敏,简便快速,有假-③薄层层析: 确证糖种类，科研用。④GOD法定量:灵敏、特异，抗VitC干扰；用于治疗监测及用药调整。质控①标本新鲜②容器清洁、无污染，试带保存③干扰因素：VitC(煮沸),尿蛋白(加热)④检测中: 规范操作；⑤检测后：报告审核，联系临床。【尿酮体】①亚硝基铁氢化钠紫红色。Lange、改良Rothera、试带。②Gerhardt法:乙酰乙酸与高铁离子(FeCl3)螯合形成酒红色乙酰乙酸铁。评价①Lange法：各种亚硝基铁氢化钠法试剂和操作差异,灵敏度和特异性不同②试带法: 最常用筛检法,敏感、方便、快速；③Gerhardt法:仅测乙酰乙酸，标本久置则阳性↓。【尿胆红素bilirubin】①重氮法:强酸介质中,Bil与重氮盐偶联反应,产生红色偶氮化合物②氧化法:AHarrison法: 以钡盐吸附胆红素并浓缩，酸性三氯化铁氧化胆红素为胆绿素呈现绿色；ASmith碘环法:碘氧化胆红素呈绿色环。评价①试带法:灵敏度较低，简便、快速，多假(+)或假(-)，筛检。②Harrison法:灵敏、准确，为确证试验；操作较繁，假+(水杨酸等)。③Smith碘环法:简单,灵敏度低。质控①标本:新鲜、棕色容器避光保存（氧化）；②检测中:规范操作,试剂量准确;室内质控；③检测后:分析药物干扰;试带法结果可疑时,氧化法(Harrison法)验证。【尿胆原(urobilinogen)】①改良Ehrlich法:Uro在酸性条件下与对二氨基苯甲醛生成樱红色化合物.②试带法: Ehrlich醛反应或Uro与重氮盐偶联反应。评价①改良Ehrlich法:定性或定量, 简便, 但需先除去Bil，内源色素、药物影响(紫胆原、维C等);②试带法:简便,各种试带灵敏度不同，用于筛检,但不适合Uro减少患者。质控①标本收集:新鲜;提高检出率(餐后尿)。②检测中:碱化尿液需调回弱酸性;Ehrlich反应可以氯仿抽提Uro;规范操作,准时判读。③检测后: 正确分析药物影响，假(+)或假(-)。【尿血红蛋白】①湿化学: Hb亚铁血红素→催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色。②试带法：与化学法类似。③免疫：胶体金标记抗人Hb单克隆抗体。评价①湿化学:试剂不稳定，特异性较低,有假+/-。②试带：简便、快速，筛检；与游离Hb及RBC均反应；有假+③免疫：简便、特异、灵敏;抗原过剩则假阴性（带现象）。质控①容器、试剂，破坏尿中过氧化物酶(煮沸)。②免疫法,防抗原过剩(稀释)。③检测中质控；检测后分析审核。临床意义：血管内溶血、隐匿性肾炎等。用药、血尿、用药、血尿、Mb尿。【离心尿镜检法】取混匀新鲜尿10ml于刻度离心管→离心400g×5min →留沉渣约0.2ml,混匀→取20ul于载玻片,加盖片镜检：LPF，管型，20个视野→HPF，细胞，10个视野；结晶观察分布范围 【尿沉渣质控】检验前①标本要求：晨尿；及时分析,不加防腐剂,非冷藏放置2h以内；避免污染②器材标准化③.制定规范标准化操作程序④室内、室间质评：有形成分质控物。检验中①标准化操作②离心：有盖水平式离心机，机内温度15-25℃；标本量10ml，带刻度离心管，RCF400g, 时间5min③制作涂片或充计数板：留沉渣0.2ml，盖玻片18×18mm④镜检方法：湿片法，细胞10个高倍视野，管型20个低倍视野；计数板法计算1μl浓度⑤鉴别有形成分形态。检验后①综合分析结果(镜检/试带法)②报告单核对临床资料③结果及时反馈④检查结果备份、记录，回顾性分析。【管型(cast)】蛋白质、细胞或碎片在肾小管、集合管中凝固而成圆柱状小体,在尿沉渣中提示肾脏实质性损害。基本形态：圆柱形、两端钝圆，两边平行。形成条件：①白蛋白或T-H蛋白 基质②浓缩和酸化 沉淀蛋白质③可供交替使用的肾单位 足够时间。1.透明：急慢性肾炎、肾盂肾炎、恶性高血压。2.细胞：红细胞：急性肾小球肾炎、肾梗死。B．白细胞：急性肾盂肾炎、间质性肾炎。C.肾上皮细胞：急性肾小管坏死。3.颗粒：肾实质性病变,慢性肾炎或急性肾炎后期。4.蜡样：肾小管有严重病变。5.宽大（肾衰管型）：急、慢性肾衰.6.脂肪：肾病综合征。7.其它：细菌、结晶。【尿干化学试带法原理及影响因素】 1.蛋白质(PRO)指示剂蛋白误差法（溴酚蓝）。影响①pH＞9.0,假(+);pH＜3.0,假(-).②对各种尿蛋白敏感不同,A敏感,而G、Hb、BJP基本不反应,过筛实验。③药物假(-)（青霉素，庆大霉素，碘造影剂）。④标本含其它分泌物或较多细胞,可假（+）。2.葡萄糖（GLU）(GOD-POD)。影响①只与葡萄糖反应,特异性强,灵敏度更高.②强氧化剂或过氧化物污染可假(+).③标本久置, 维C等还原物质,高浓度酮体等可致假(-).④尿液SG↑或低pH,可致假(-).3.亚硝酸盐（NIT）亚硝酸盐还原。影响①尿NIT是用于尿路细菌感染的快速筛检法，尿NIT(+)有三个条件：感染细菌有硝酸盐还原酶；尿中含硝酸盐；尿液在膀胱中停留时间>4h。②含大量维生素C、使用利尿剂、抗菌素可致假(-)。③陈旧尿、尿含亚硝酸盐可致假(+)。4.尿比密(SG)多聚电解质离子解离法。影响①BTB变化范围pH 6.2-7.0,当pH>7.0时，SG↓；pH＜6.2，SG↑。②尿蛋白↑，SG偏高③测定范围1.000-1.030,用于SG过高或过低，筛选，婴幼儿不宜④测定尿液离子浓度,非离干扰少。5.酸碱度(pH)酸碱指示剂法（甲基红和溴麝香草酚蓝），在pH4.5-9.0,橙红→黄绿→蓝。影响①尿液新鲜程度②试带浸泡时间③试剂块间相互“溢出”细菌 6.酮体(KET)膜块内含的亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与尿液中乙酰乙酸,丙酮起反应产生紫色化合物。影响①对酮体各组分灵敏度不一：乙酰乙酸＞丙酮，β-羟丁酸不反应；与酮体粉法存在差异。②糖尿病酮症酸中毒病程分析。③尿标本必须新鲜，及时送检。7.胆红素(BIL)重氮反应原理，由于试剂带组成不同，生成偶联产物不同。影响①尿标本避免阳光照射。②高浓度维生素C（250mg/L）和亚硝酸盐可致假(-)。③氯丙嗪、盐酸偶氮吡啶的代谢产物可致假(+)。8.尿胆原(URO)醛化反应或偶氮法。影响①避光②尿中含胆红素原、吲哚、胆红素假(+)。③预先给患者碱化尿液或收集午餐后2-4h尿标本，可提高检出率。9.红细胞/血红蛋白/隐血(ERY/Hb/OB)血红蛋白类过氧化物酶法。影响①肌红蛋白、次氯酸盐、细菌、不耐热过氧化酶污染，假（+）②高浓度VitC、高蛋白、高比重或pH<5.0，某些药物致假（-）。10.白细胞（LEU）白细胞酯酶法。影响①测粒细胞，不与L反应。②含甲醛、呋喃坦啶、大量胆红素、氧化型清洁剂, 或阴道分泌物污染可致假(+)。③含先锋霉素，庆大霉素等可致假(-)。④久置,试带与镜检不符。11.维生素C（VitC）还原法。影响①仅测还原型VitC，灵敏度50-70mg/L.②VitC在碱性尿中易分解。③意义: 评价BLD、BIL、GLU、NIT，防止假（-）。【干化学与镜检结果相关性】（干化学/镜检）红细胞①+/－标本久置, 低渗,肌红蛋白尿或菌尿, 过氧化物酶污染或肾病②－/+很少见, 大量VitC(＞100mg/L)或试带失效。白细胞①+/－标本久置,污染甲醛,高胆红素尿②－/+肾移植排异(L、M)或用大剂量头孢,庆大霉素 【粪便标本采集】1.常规标本（颜色和显微镜检查）新鲜（1h内）、少量（3-5g或稀便3ml）、采集部位（外观异常和无异常的粪便）。2.寄生虫检查标本：24h内送检，如为（—）连续送检3d（寄生虫有周期性排卵现象）“三送三检①阿米巴滋养体： 脓血、稀软部分取材，保温②血吸虫毛蚴： 量＞30g或全份送检③蛲虫卵 ：晚12时/晨排便前；肛门拭子法（录像）④虫体/虫卵计数： 24h粪便。3.化学法隐血实验：实验前3d禁食肉类、动物血和某些蔬菜等，禁服铁剂及维生素C等建议连续检查3d。【菌痢和阿米巴痢疾】①性状：脓血便，黏液和脓细胞为主/果酱色，红细胞为主②细胞：大量白细胞，成堆脓细胞，吞噬细胞，红细胞多散在分布，形态正常，数量少于白细胞/大量红细胞，成堆，形态破碎，多于白细胞③夏科－雷登结晶：无/有。【粪便隐血实验（FOBT）】消化道特别是上消化道少量出血（＜5ml），红细胞被破坏，以致粪便外观无异常改变，显微镜下也不能证实。这种肉眼和显微镜均不能证明的微量血液，需用化学法、免疫法才能证实的出血称为隐血。检查粪便隐血的方法称为粪便隐血实验。消化道出血的筛检，消化性溃疡与肿瘤出血的鉴别。【FOBT化学法和免疫法比较】化学法：灵敏度高，但特异性较差，易受食物和药物的因素影响，化学法有各种色原性反应底物，个反应产生的颜色不同，但反应基本原理相似。免疫法：特异性和灵敏性均较好，基本原理是采用抗人血红蛋白的单克隆抗体检测粪便隐血，主要测下消化道出血。【新型隐球菌与淋巴细胞、RBC】①新型隐球菌具有出芽现象②新型隐球菌不溶于乙酸，滴加0.35mol/L乙酸，红细胞溶解消失，淋巴细胞则胞核和胞质更为明显③滴加印度墨汁1滴，新型隐球菌有荚膜，不着色，而红细胞或淋巴细胞无此现象。【结核性与恶性积液鉴别】良性/恶性：①外观：黄色、血性/多血性②ＡＤＡ（U/L）：＞４０／＜２５③积液ＡＤＡ／血清ADA：＞１.０／＜１.０④ＬＤＨ（U/L）：＞２００／＞５００⑤ＣＥＡ（ug/L）：＜５／＞１５⑥积液ＣＥＡ／血清ＣＥＡ：＜１.０／＞１.０⑦铁蛋白（ug/L）＜５００／＞１０００⑧细菌：结核分枝杆菌／无⑨细胞：多为淋巴细胞／可见肿瘤细胞。【阴道清洁度】①阴道分泌物生理盐水涂片、镜检②根据阴道杆菌、上皮细胞、白细胞和杂菌的多少划分为4度③是阴道炎症和生育期妇女卵巢性激素分泌功能的判断指标④正常为Ⅰ、Ⅱ度。【细菌性阴道炎诊断指标】①阴道分泌物稀薄，呈灰白色奶油状②pH值>4.5③胺试验阳性：加10% KOH，因产胺而释放出鱼腥样臭味④线索细胞（粘附大量GV的鳞状上皮细胞）占上皮细胞数目20%。线索细胞＋任意两条即可诊断ＢＶ。【线索细胞】阴道鳞状上皮细胞黏附了大量加德纳菌及其他短小杆菌，而形成巨大的细胞团，上皮细胞表面毛糙，有斑点和大量细小颗粒。【精液外观及显微镜项目】①一般：凝固（精囊腺：碱）及液化时间（前列腺：酸）、外观、量、黏稠度、酸碱度②显微镜：有无精子、精子活力（活动率、存活率、活动力）、精子计数、精子形态、园细胞。【体内穿透试验PCT】排卵期性交后，检查一定时间内宫颈口粘液活精子数量、存活率及活动力，以评价精子对宫颈粘液的穿透能力。【精子低渗肿胀试验HOS】观察精子在低渗溶液中的变化以检测精子膜的完整性。操作简便、快速。与其他精子功能试验有良好的相关性临床上较为理想的精子功能测定方法。【增生（hyperplasia）】指非肿瘤增生，多由慢性炎症或其他理化因素刺激所致上皮细胞分裂繁殖增强，数目增多，常伴有细胞体积增大。共同特点：核增大，可见核仁；核分裂活跃；胞质嗜碱性，相对较少 【再生（regeneration）】上皮组织的损失由邻近健康上皮的生发层细胞分裂增生修复。涂片可见再生上皮细胞，增生活跃的基底层细胞。特点再生细胞核增大，染色深，可见染色质结块；核仁增大增多，可见有丝分裂；胞质略嗜碱性，可见双核/多核。【化生（metplasia）】在慢性炎症或其他理化因素作用下，柱状上皮细胞的储备细胞增生，逐渐向呈多边形，胞质丰富的鳞状上皮细胞分化；鳞状化生。急性炎症：退化变性和坏死为主慢性炎症：增生、再生和化生为主伴不同程度退化变性。【不典型增生/核异质】脱落细胞的核异常，表现为核的大小、形态及染色质的分布异常，核边增厚，核的边界不整齐，但胞质的质和量的分化正常。可由慢性炎症引起，部分可发展为癌细胞，见于癌前病变、原位癌，浸润癌的癌旁细胞。【异常角化】又称角化不良、不成熟角化或细胞内角化。系指鳞状上皮细胞的胞浆分化超过了细胞核的分化程度。表现为鳞状上皮的非角化层，即表层角化前细胞或中、底层细胞出现一些不连续的、程度不等的胞浆内角化，常伴有上皮不典型增生。意义：角化不良细胞出现在中、底层细胞时，癌前病变的表现（癌前角化）。老年期和更年期妇女阴道涂片中发现角化不良细胞时定期复查。1
第五篇：病理检验技术试题
一、名词解释: 1.病理检验技术 2.诊断细胞学 3.常规染色 4.核异质细胞 5.媒染剂
二、填空: 1.常用的组织切片法有____、____、____、树脂包埋切片法、碳蜡切片法、塑料包 埋切片法。2.染色的物理作用有 _________、_____________、_____________。3.组织固定的常用方法有___、____、___________和 ___________。4.诊断细胞学根据细胞标本来源的不同分为______和______。
5.细胞学制片的方法有 _________、____________、___________、__________。
6.常规石蜡切片制作的程序是取材、_______、固定后处理、___、____、浸蜡、___ _、切片、贴片等。
三、单项选择(选择最佳答案): 1.优质切片的先决条件是 A 固定 B 染色 C 透明 D 切片
2.下列哪种溶液被推荐为病理标本的首选固定液
A 10%福尔马林液 B 中性缓冲甲醛液 C 酒精 D Zenker固定液 3.配制中性缓冲甲醛液最好用 A 蒸馏水 B 自来水 C 磷酸盐 D 醋酸 4.常用的组织石蜡切片的透明剂是 A 乙醇 B 丙酮 C 乙酸 D 二甲苯 5.固定的目的下列哪项正确
A 增加组织硬度 B 防止细胞自溶 C 凝固细胞内物质 D 以上都对 6.最常用的石蜡切片机是
A 骨组织切片机 B 冰冻切片机 C 旋转式切片机 D 超薄切片机 7.具有剧毒作用的固定剂是
A 重铬酸钾 B 四氧化锇 C 铬酸 D 苦味酸 8.常用于脱钙的酸类是 A 硝酸 B 硫酸 C 醋酸 D 磷酸
9.下列哪项不是脱落细胞涂片常用的固定液
A 丙酮 B 95%乙醇 C 10%福尔马林 D 乙醚酒精固定液 10.在常规制片中(HE染色)细胞核的染色原理正确的是
A 细胞核带负电荷,呈酸性,易与带正电荷的苏木素酸性染料结合而染色 B 细胞核带负电荷,呈碱性,易与带正电荷的苏木素碱性染料结合而染色 C 细胞核带负电荷,呈酸性,易与带正电荷的苏木素碱性染料结合而染色 D 细胞核带正电荷,呈碱性,易与带正电荷的苏木素碱性染料结合而染色 11.组织石蜡切片过程中透明的主要作用
A 脱去多余水分 B 固定作用 C 媒介作用 D 使组织变硬 12.变移上皮主要分布在下列哪一器官 A 支气管 B 气管 C 膀胱 D 胸腔 13.福尔马林色素的形成是由于
A 还原作用 B 氧化作用产生蚁酸与血红蛋白结合 C 与粘液蛋白结合 D 与核酸结合 14.HE 染色中呈蓝色的成份是
A 红细胞 B 细胞核 C 嗜酸性颗粒 D 细胞质 15.用过碘酸雪夫染色法(PAS 法)把糖原染成 A 红色 B 蓝色 C 紫色 D 黄色 16.石蜡包埋时应注意
A 有无特殊包埋面 B 石蜡中有杂物应过滤后使用 C 包埋温度不宜过高 D 以上都对
17.在常规 HE 染色中细胞质的着色原理是 A 细胞质着色与 PH 值无关
B PH调至大于蛋白质等电点,被带负电荷染料染色 C PH调至蛋白质等电点时染色
D PH调至胞质等电点以下,带正电荷,被带负电荷染料染色 18.有关糖原的固定说法错误的是 A 尽可能选取小块新鲜组织 B 注意多次更换酒精混合固定液 C 用单一乙醇固定效果最佳
D 固定不透、不均时,表现为 “流水样人工假象” 19.冷冻切片的注意事项错误的是 A 一般来说骨组织不能做冷冻切片 B 送检组织尽可能新鲜
C 做冷冻切片的组织,切片前可用酒精固定 D 组织块复温时应在 37℃加温速融
20.细胞学诊断方式的间接诊断法中最常用的是 A 二级法 B 四级法 C 三级法 D 巴氏五级诊断法 21.酒精进行脱水的一般顺序是: A 70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、无水乙醇
B 70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、95%酒精、无水乙醇、无水乙醇 C 无水乙醇、无水乙醇、95%酒精、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精、D 无水乙醇、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精 22.Wathin-Starry 胃幽门螺杆菌染色法,螺杆菌显示什么颜色 A 棕黑色 B 红色 C 绿色 D 蓝色
23.Mallory 磷钨酸苏木素染色法主要用于显示 A 横纹肌 B 胶原纤维 C 弹力纤维 D 网状纤维
24.病理大体标本脂肪组织染色,配制苏丹染料所用的乙醇浓度为 A 30%B 50%C 95%D 70% 25.在巴氏染色的宫颈/阴道涂片中高度可疑的恶性细胞,应诊断为几级 A V B Ⅲ C Ⅳ D II 26.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)有丰富的双硫键, 被氧化形成磺酸后, 与染色液产生较强的亲和力 而着色,使用的氧化液是
A 过碘酸 B 酸性高锰酸钾 C 磷酸 D 铬酸 27.苏木精成为苏木红要经过 A 氧化 B 媒染 C 分化 D 蓝化
28.淋球菌是革兰阴性菌,在革兰(Gram)染色中呈 A 红色 B 蓝色 C 紫色 D 绿色 29.常规 HE 染色中分化液的配制
A 75%酒精 100ml 加 5 ml盐酸 B 75%酒精 99ml 加 l ml盐酸 C 无水乙醇 99ml 加 l ml盐酸 D 50%酒精 95ml 加 5 ml盐酸 30.在组织染色过程中促染剂的作用
A 有促进染色能力,对染料和组织都有亲和力 B 直接与组织结合 C 直接与染料结合 D 增强染料的染色能力 , 不参与染色反应
四、简答题: 1.简述合格切片的标准? 2.简述常规石蜡切片 HE 染色的程序? 3.细胞学检查的优缺点有哪些? 4.单个癌细胞的形态特点主要表现在细胞核上,可归纳为哪五大特征?
