第一篇:血球分析仪基本原理
血球分析仪基本原理
血球分析仪是用来测量血细胞(RBC、WBC、PLT等)数量;测定血细胞的Hb浓度,对白细胞(WBC)进行分类并通过计算给出血细胞参数(HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PCT、PDW等)的自动化仪器。它是临床检验科室使用率最高的必备的常规装备之一。选择一台功能完善,质优价廉的血球分析仪对医院的临床工作具有极其重要的意义,了解血球分析仪的基本原理及购置时的技术评估要点是搞好仪器选型工作的基础。
一、血球分析仪的基本原理
早在50年代初,美国的W#H#Coulter就对血细胞的计数方法进行了卓有成效的研究,发明了利用电阻法计数血细胞的技术,人们称之为库尔特原理。是在计数管内外各置一支铂金电极,两电极间施加一个恒定的电流,测试时先将待测血用洁净的电解液充分稀释,使血细胞在电解液中成为游散状态,然后在计数管上端施以负压,利用血细胞经过计数管宝石孔(管内、外的唯一通道)时的电阻改变而获得电脉冲,脉冲数代表血细胞个数,从而达到计数的目的。
1.1红细胞(RBC)和血小板(PLT)的测定和识别适当稀释的全血细胞(大量的是PLT和RBC)经过计数管宝石孔时,血小板体积较小,对孔电流的阻碍小,形成的电脉冲小;红细胞较大,形成的脉冲较大。在计数红细胞时,利用一个脉冲幅度甄别器,将幅度较小的血小板脉冲去掉,保留红细胞和白细胞脉冲,因血液中白细胞的数量不足红细胞的1/500,故其总数可认为是红细胞计数。在计数血小板时,将脉冲幅度甄别器的阈值调低,计出血小板的总数,再减去红细胞的计数,剩下的即为血小板数。
2.1白细胞(WBC)的测定和分类
(1)/三分类0分析仪的分类方法在计数白细胞(WBC)时,利用溶血剂使红细胞(RBC)溶解,再对剩下的白细胞计数,由于溶血剂可使白细胞的胞浆发生绕核皱缩,白细胞的体积变小,淋巴细胞(Lym)约为35~90fL。包括正常和异常淋巴细胞;中间细胞(MID)约为90~160fL,包括单核细胞(Mon),嗜酸(Eos)和嗜碱(Bas)性细胞以及原始和早期的粒细胞;中性粒细胞(Neu)由于胞浆中的颗粒被压在核周围,比其他细胞都大,约为160~450fL。这些细胞在经过计数宝石孔时形成的电脉大小不同,从而可推知细胞的大小和类别。电阻法是通过测量细胞的大小进行血细胞的分类计数,只能对白细胞进行/三分类0,即分成淋巴细胞、中间细胞和中性粒细胞。这种简单的分类方法只适用于血常规检查和作规模较大的过筛检查,要进行更细致的分类有赖于新的检测技术。
(2)/五分类0分析仪的分类方法单独使用电阻法的最大问题是中间细胞(MID)无法进一步区分。从80年代中期开始,对白细胞的分类从/三分类0发展到/五分类0,即可以分成淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和中性粒细胞。进入90年代,高档的分析仪还可以检测出幼稚细胞和T淋巴细胞,能对细胞进行免疫分型,能进行网织红细胞计数。目前可进行/五分类0的高档分析仪的检测技术有四种,即电阻抗、高频电导和激光散射联合检测法;电阻抗和射频电导联合检测法;激光散射和细胞化学染色联合检测法,以及多角度激光偏振光散射检测法。
a、电阻抗、高频电导和激光散射联合检测法亦即VCS(Volume, Conduetivity, Light Scatter)技术。电阻法可检测不同体积的细胞,但不能区分体积相同的细胞,使用高频电导法和激光散射法可以弥补这一缺陷。细胞壁对低频电流产生很高的阻抗,但能通过高频电流;而细胞核的大小不同和细胞器不同,细胞内颗粒的大小和密度不同,它们对高频电流的阻抗也不同,因此可以用来区分白细胞。激光散射技术主要用来检测细胞表面及内部颗粒的结构差异。激光散射对细胞颗粒的构型和密度的区别能力强,粗颗粒产生的光散射比细颗粒强,可以借此将粒细胞区分开。
b、电阻抗和射频电导联合检测法在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,对白细胞进行电阻抗法(测量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密度)的联合检测,从而将白细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。在细胞悬浮液中加入特异的溶血剂(检测嗜酸性细胞的系统加入Stromatolyzer-EO),检测嗜碱性细胞的系统加入Stromatolyzer-BA),使嗜酸性细胞或嗜碱性细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱性细胞进行计数。以硫化氨基酸与幼稚细胞结合而使之不被溶血剂溶解,还可对幼稚细胞进行计数和初步分类。
c、激光散射和细胞化学染色联合检测法这种技术是利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。以过氧化氢酶染色技术使嗜酸性细胞强染色,中性粒细胞次强染色,单核细胞着色,而淋巴细胞和嗜碱性粒细胞不着色;以单抗使T细胞着色而非T的淋巴细胞不着色,借助于对着色强度和激光散射的检测并结合特异性溶血剂,不仅可对白细胞分类,还可检出异常白细胞。
d、多角度激光偏振光散射检测法仪器同时从四个角度测量通过激光束的细胞所产生的散射光, 0b前角光散射检测细胞的体积,10b狭角光散射用来测定细胞结构的复杂性, 90b垂直光散射对细胞内部颗粒及细胞质量进行测量,90b消偏振光散射将嗜酸性细胞从中性粒细胞和其它细胞中分离出来。
3.1血红蛋白(Hb)的测定用溶血剂将经过稀释的血液中的红细胞破坏,血红蛋白便溶解出来。在被溶解出来的血红蛋白中加入转化剂(一般用氰化钾),使之形成颜色稳定的氰化血红蛋白,再通过比色法测得血红蛋白的含量。
二、血球分析仪的防堵办法由于血液成份的污染,计数宝石孔很容易阻塞,通常仪器采用下列方法防堵:(1)高压瞬时沸腾电路去除孔内的有机物;(2)每做一次标本后,以稀释液反冲一次,冲去污染物;(3)操作者定期用清洁液清洗,做好保养维护。
三、血球分析仪购置选型时的技术评估要点
(1)仪器的档次、测试速度、自动化程度
(2)重复性和稳定性对同一标本或质控物(高、中、低值)进行批内或批间的重复检测,观察RBC、PLT、WBC的计数结果, Hb的测定结果及WBC的分类结果,计算CV值,与仪器说明书中质量保证的CV值比较,应符合质量标准。其中PLT是敏感指标, PLT在20g/1时的CV值很能反映仪器的计数性能。仪器长时间开机的稳定性以及对室温的适应性亦是重要的观察指标。
(3)机器的线性范围将血样浓缩并用稀释液稀释成不同浓度,使其最低值和最高值均能含盖生理和病理范围。用仪器进行测定,以稀释度为横坐标,以测定值为纵坐标,计算并绘制回归直线。各数值点应基本在直线上,相关良好,特别要注意直线两端各点的相关性。
(4)WBC分类结果与镜检分类的一致性
(5)防污染性能取高值标本连续检测(RBC、WBC、PLT和Hb)三次(A1、A2、A3),接着再取低值标本连续检测三次(B1、B2、B3),按下式计算:携带污染率=B1)B3A3)B3@100%携带污染率应越低越好。
(6)采样针的清洗情况以滤纸擦拭仪器自动清洗过的采样针,应无肉眼可见的红色血痕。
(7)防堵性能仪器最好同时具有沸腾电路和反冲功能,在正确维护的情况下,正常使用时,应无堵塞情况发生。
(8)软件水平好的血球计数仪其资料存储量要大,要能Lev-erg jenning图质控分析和X)B分析;要能在打印结果时提供正常值;对异常标本和异常项目能报警并具解释或提示功能;打印报告的形式具有可编排性;尽量避免热敏打印。
第二篇:血球分析仪基本原理及购置时的技术评估要点
血球分析仪基本原理及购置时的技术评估要点
血球分析仪是用来测量血细胞(RBC、WBC、PLT等)数量;血球分析仪测定血细胞的Hb浓度,对白细胞(WBC)进行分类并通过计算给出血细胞参数(HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PCT、PDW等)的自动化仪器。它是临床检验科室使用率最高的必备的常规装备之一。选择一台功能完善,质优价廉的血球分析仪对医院的临床工作具有极其重要的意义,了解血球分析仪的基本原理及购置时的技术评估要点是搞好仪器选型工作的基础。
一、血球分析仪的基本原理
早在50年代初,美国的W#H#Coulter就对血细胞的计数方法进行了卓有成效的研究,发明了利用电阻法计数血细胞的技术,人们称之为库尔特原理。是在计数管内外各置一支铂金电极,两电极间施加一个恒定的电流,测试时先将待测血用洁净的电解液充分稀释,使血细胞在电解液中成为游散状态,然后在计数管上端施以负压,利用血细胞经过计数管宝石孔(管内、外的唯一通道)时的电阻改变而获得电脉冲,脉冲数代表血细胞个数,从而达到计数的目的。
1.1红细胞(RBC)和血小板(PLT)的测定和识别适当稀释的全血细胞(大量的是PLT和RBC)经过计数管宝石孔时,血小板体积较小,对孔电流的阻碍小,形成的电脉冲小;红细胞较大,形成的脉冲较大。在计数红细胞时,利用一个脉冲幅度甄别器,将幅度较小的血小板脉冲去掉,保留红细胞和白细胞脉冲,因血液中白细胞的数量不足红细胞的1/500,故其总数可认为是红细胞计数。在计数血小板时,将脉冲幅度甄别器的阈值调低,计出血小板的总数,再减去红细胞的计数,剩下的即为血小板数。
2.1白细胞(WBC)的测定和分类
(1)/三分类0分析仪的分类方法在计数白细胞(WBC)时,利用溶血剂使红细胞(RBC)溶解,再对剩下的白细胞计数,由于溶血剂可使白细胞的胞浆发生绕核皱缩,白细胞的体积变小,淋巴细胞(Lym)约为35~90fL。包括正常和异常淋巴细胞;中间细胞(MID)约为90~160fL,包括单核细胞(Mon),嗜酸(Eos)和嗜碱(Bas)性细胞以及原始和早期的粒细胞;中性粒细胞(Neu)由于胞浆中的颗粒被压在核周围,比其他细胞都大,约为160~450fL。这些细胞在经过计数宝石孔时形成的电脉大小不同,从而可推知细胞的大小和类别。电阻法是通过测量细胞的大小进行血细胞的分类计数,只能对白细胞进行/三分类0,即分成淋巴细胞、中间细胞和中性粒细胞。这种简单的分类方法只适用于血常规检查和作规模较大的过筛检查,要进行更细致的分类有赖于新的检测技术。
(2)/五分类0分析仪的分类方法单独使用电阻法的最大问题是中间细胞(MID)无法进一步区分。从80年代中期开始,对白细胞的分类从/三分类0发展到/五分类0,即可以分成淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和中性粒细胞。进入90年代,高档的分析仪还可以检测出幼稚细胞和T淋巴细胞,能对细胞进行免疫分型,能进行网织红细胞计数。目前可进行/五分类0的高档分析仪的检测技术有四种,即电阻抗、高频电导和激光散射联合检测法;电阻抗和射频电导联合检测法;激光散射和细胞化学染色联合检测法,以及多角度激光偏振光散射检测法。
a、电阻抗、高频电导和激光散射联合检测法亦即VCS(Volume, Conduetivity, Light Scatter)技术。电阻法可检测不同体积的细胞,但不能区分体积相同的细胞,使用高频电导法和激光散射法可以弥补这一缺陷。细胞壁对低频电流产生很高的阻抗,但能通过高频电流;而细胞核的大小不同和细胞器不同,细胞内颗粒的大小和密度不同,它们对高频电流的阻抗也不同,因此可以用来区分白细胞。激光散射技术主要用来检测细胞表面及内部颗粒的结构差异。激光散射对细胞颗粒的构型和密度的区别能力强,粗颗粒产生的光散射比细颗粒强,可以借此将粒细胞区分开。
b、电阻抗和射频电导联合检测法在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,对白细胞进行电阻抗法(测量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密度)的联合检测,从而将白细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。在细胞悬浮液中加入特异的溶血剂(检测嗜酸性细胞的系统加入Stromatolyzer-EO),检测嗜碱性细胞的系统加入Stromatolyzer-BA),使嗜酸性细胞或嗜碱性细胞以外的所有细胞溶解或萎缩,再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱性细胞进行计数。以硫化氨基酸与幼稚细胞结合而使之不被溶血剂溶解,还可对幼稚细胞进行计数和初步分类。
c、激光散射和细胞化学染色联合检测法这种技术是利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。以过氧化氢酶染色技术使嗜酸性细胞强染色,中性粒细胞次强染色,单核细胞着色,而淋巴细胞和嗜碱性粒细胞不着色;以单抗使T细胞着色而非T的淋巴细胞不着色,借助于对着色强度和激光散射的检测并结合特异性溶血剂,不仅可对白细胞分类,还可检出异常白细胞。
d、多角度激光偏振光散射检测法仪器同时从四个角度测量通过激光束的细胞所产生的散射光, 0b前角光散射检测细胞的体积,10b狭角光散射用来测定细胞结构的复杂性, 90b垂直光散射对细胞内部颗粒及细胞质量进行测量,90b消偏振光散射将嗜酸性细胞从中性粒细胞和其它细胞中分离出来。
3.1血红蛋白(Hb)的测定用溶血剂将经过稀释的血液中的红细胞破坏,血红蛋白便溶解出来。在被溶解出来的血红蛋白中加入转化剂(一般用氰化钾),使之形成颜色稳定的氰化血红蛋白,再通过比色法测得血红蛋白的含量。
二、血球分析仪的防堵办法由于血液成份的污染,计数宝石孔很容易阻塞,通常仪器采用下列方法防堵:(1)高压瞬时沸腾电路去除孔内的有机物;(2)每做一次标本后,以稀释液反冲一次,冲去污染物;(3)操作者定期用清洁液清洗,做好保养维护。
三、血球分析仪购置选型时的技术评估要点
(1)仪器的档次、测试速度、自动化程度
(2)重复性和稳定性对同一标本或质控物(高、中、低值)进行批内或批间的重复检测,观察RBC、PLT、WBC的计数结果, Hb的测定结果及WBC的分类结果,计算CV值,与仪器说明书中质量保证的CV值比较,应符合质量标准。其中PLT是敏感指标, PLT在20g/1时的CV值很能反映仪器的计数性能。仪器长时间开机的稳定性以及对室温的适应性亦是重要的观察指标。
(3)机器的线性范围将血样浓缩并用稀释液稀释成不同浓度,使其最低值和最高值均能含盖生理和病理范围。用仪器进行测定,以稀释度为横坐标,以测定值为纵坐标,计算并绘制回归直线。各数值点应基本在直线上,相关良好,特别要注意直线两端各点的相关性。
(4)WBC分类结果与镜检分类的一致性
(5)防污染性能取高值标本连续检测(RBC、WBC、PLT和Hb)三次(A1、A2、A3),接着再取低值标本连续检测三次(B1、B2、B3),按下式计算:携带污染率=B1)B3A3)B3@100%携带污染率应越低越好。
(6)采样针的清洗情况以滤纸擦拭仪器自动清洗过的采样针,应无肉眼可见的红色血痕。
(7)防堵性能仪器最好同时具有沸腾电路和反冲功能,在正确维护的情况下,正常使用时,应无堵塞情况发生。
(8)软件水平好的血球计数仪其资料存储量要大,要能Lev-erg jenning图质控分析和X)B分析;要能在打印结果时提供正常值;对异常标本和异常项目能报警并具解释或提示功能;打印报告的形式具有可编排性;尽量避免热敏打印。
第三篇:全自动五分类血球分析仪参数
全自动五分类血球分析仪参数
数量 1台
1.仪器检测原理:采用多角度半导体激光散射分析法结合细胞化学染色进行白细胞分类检测,电阻抗法进行白细胞、红细胞及血小板计数,无氰化物试剂结合比色法检测血红蛋白浓度。2.白细胞分类通道:≥2个,应具备单独的嗜碱性粒细胞检测通道 3.输出参数≥31项参数,报告参数(不含散点图和直方图)≥27项 4.输出4种及以上图形
5.自动进样测试速度:≥90样本/小时 6.内置条码扫描仪:标配
7.血样模式:静脉全血、末梢预稀释血、末梢全血 8.进样方式:既能自动进样也能手动开放进样
9.自动进样:配备轨道式自动进样架,一次可同时装载≥50个样本,并可不间断追加样本。
10.显示屏:≥10″彩色液晶触摸屏,无需外接电脑即可操作 11.采样针有防抵死功能,可以减少堵孔及提高吸样准确性 12.具有可视化的方式监测仪器关键器部件或状态的自检功能。13.能提供一键维护功能,包括更换试剂、液路灌注、排堵、整机清洗、打包、排空、样本池浸泡等操作一键完成。14.具备人工校准,自动校准及新鲜血校准三种校准方式。15.中文操作界面。支持LIS传输功能,并支持远程维护和升级 16.报警功能:具备异常标本实时报警,试剂检测报警、故障提示报警功能能够存储至少8万条样本记录(包含散点图、直方图、患者信息、分析数据)
17.输出全中文打印报告,可根据需求自定义设置多种报告格式。18.配置:品牌电脑和激光打印机
紫外线空气消毒器参数
数量 4台
1.应用场所:适用于普通手术室、产房、血液病区、烧伤病区、保护性隔离病区、重症监护病区;消毒供应中心检查包装灭菌区和无菌物品存放区;检查室、治疗室、感染性疾病诊室等空间的空气消毒。
2.安装方式:落地移动柜式
3.外型尺寸:(L×W×H):500×300×990(mm³)
4.重量:23 Kg
5.消毒方法:物理方式协同紫外线进行消毒。
6.最大适用体积:100 m3 7.噪声:≤50 dB 8.循环风量:≥1200m³/h 8.机内紫外线辐射照度:≥17000uw/cm2 9.紫外线杀菌灯寿命:≥8000 小时.消毒效果:对空气中自然菌平均消亡率均大于90%,对白色葡萄球菌的杀灭率≥99.9%,提供权威机构检测报告 11.手动定时消毒、人体红外线感应自动监控消毒、程控定时自动消毒。远红外线遥控操作.抗菌除异味,采用电镜平均粒径≤10nm的锐钛型二氧化钛做光触媒,可有效地降解甲醛、苯、甲苯、二甲苯、氨、TVOC等污染物,并具有高效广谱的消毒性能,能够杀灭和抑制细菌、真菌和病毒的存活。
13.选用优质、大容量的颗粒状活性炭组成的复合净化板专利技术,可有效去除有机气体和医院药水等各种异味。16.负氧离子清新净化空气,促进人体新陈代谢。18.自动累时维护报警,过滤器自动清洗报警,负离子正常工作指示功能 19.输入功率:220W 20.电源:AC 220V 50Hz.产品证件:卫生安全评价报告。
数字化超声引导妇科宫腔手术仪参数
数量 1台
一、用途:适用于医疗单位进行人工流产、取放宫内节育器妇科宫腔手术。
二、技术参数:
1.台车式一体化,负压吸引器内置于超声主机内(1)聚焦方式:数字声束形成,实现逐点接收聚焦;发射四段聚焦且焦点位置可调
(2)数字化B超,全数字波束形成器具有32路A/D采样通道显示方式:B、B/B、4B、B/M、M 2.96阵元R10可视人流专用探头,探头频率5.0/6.5/7.5/8.0MHz扫描角度120°四段宽频变频微凸阵探头,探头采用卡按方式固定在一种专用阴道扩张器内,通过调节专用扩张器的手柄调整探头扫查方向;探头超宽扫描角度,仅需一种专用扩张器与探头卡接足够扫查不同位置子宫,医生无需根据不同位置的子宫来判断使用扩张器的类型,手术时更方便;卡接固定方式使探头很稳固不会在术中脱落,采用一次性无菌胶套隔离探头,避免感染也无需再消毒探头,适合于手术医生单独操作,极少占用腔内空间,不影响常规手术器械的使用。深度≥90mm(探头在7.5MMHz频率)(1)15″医用专用液晶显示器
(2)横向分辨率:≤1mm(深度≤40 mm)7.5M频率时测(3)纵向分辨率:≤0.5mm(深度≤80 mm)7.5M频率时测(4)可选配128阵元2.5/3.5/5.0MHz宽频变频高密度腹部探头;且具备二次谐波功能,具备穿刺引导线功能, 穿刺引导线的位置可较准。(5)图像倍率:21级深度可调,4倍声学放大,画中画,回放动态放大
(6)增益:0~100db连续可调,1段总增益,8段TGC控制(7)图像存储:机内可永久存储至少110幅图像,电影回放≥350 幅
(8)具有产科、妇科、泌尿科、心脏科、小器官、腹部软件包,可进行GS、CRL、BPD、HC、AC、FL、HL、TAD、APAD、CER、FTA、OFD、THD、AFI、LV、NT以及LMP计算EDCB等产科指标测量,估算胎龄、胎重和预产期;子宫、左/右卵巢、子宫内膜厚度、卵泡;膀胱、左/右肾、前列腺;心室、左心房、二尖瓣、主动脉瓣和肺瓣膜、及甲状腺、肝、胆、脾、胰相关参数测量,并自动生成报告具有胎儿生长曲线和胎儿生理评分功能
3、负压值与超声影像可同屏显示(1)内置式负压系统技术参数
a、负压系统极限负压值:≥0.09Mpa b、负压系统瞬时抽气速率:≥20L/min c、贮液瓶容量:1000mL d、工作噪声:≤60dB
4、三个探头接口,电子切换,自由选择
(1)具有常用功能单独设置快捷按键或结合功能键快速进入功能
(2)具有符合人机工程学原理的带背景灯的硅胶键盘设计(3)USB接口(支持图像存储、软件升级、图像传输等)(4)可选配以下功能: a.DICOM3.0接接口实现远程网络传输功能 b.内置工作站 C、可选配激光、喷墨、视频打印机
5.多参数智能宫内节育器的自动选择(智能IUD优选功能):根据子宫的超声图像测得的子宫横径和纵径这两个参数自动推荐合适的宫内节育器型号(提供专利证书复印件)
6.手术用压力可在设定范围内自动控制(提供专利证书复印件)
三、标准配置要求
1.台式主机一台 2.15″专用显示器一台
3.96阵元R10/120°,5.0/6.5/7.5/8.0MHz四段宽频变频专用微凸探头1支
4.采用黄铜镀铬材质的超声专用阴道扩张器20个(提供专用阴道扩张器注册证)
5.专用一次性无菌探头套500个 6.无菌耦合剂20盒
采购联系人 王卫 ***
第四篇:希森美康血球分析仪KX21标准操作规程
血常规检验
一、【检验方法】: KX—21血细胞分析仪
二、【原理及意义】:
(一)Hb
1、原理:
红细胞被溶血素溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白被SLS的亲水性的烷基部分所改变,由亚铁血红蛋白形态转变为高铁血红蛋白形态,形成SLS-Hb的正铁血红蛋白化合物,在555nm处有吸收峰,通过仪器内部的比色系统比色,可以测定Hb的浓度。该方法利用了氧化血红蛋白法和氰化血红蛋白法的优点。一方面,SLS-Hb法具有和氧化血红蛋白法一样的检测快速、无毒性成分的优点;另一方面也具有氰化血红蛋白法检测结果精确、重复性好的特点。
(二)RBC、MCV、MCH、MCHC、HCT、RDW-CV、RDW-SD
1、原理:
血液被稀释液稀释后,细胞一个一个通过狭缝,狭缝内外是有直流电的电解质环境,当细胞通过时会引起瞬时的电位变化,形成电脉冲,电脉冲的个数反应细胞的个数,大小反应细胞的大小。细胞体积在一定范围内划为红细胞;在某个范围划为血小板。同时通过仪器内部的数据分析系统换算出MCV、MCH、MCHC、Hct 和统计学处理得出RDW-CV、RDW-SD分析数据。
(三)WBC计数、及其分类
1、原理(电阻检测法): 仪器吸取样本,用一定量的试剂和稀释液稀释后,在溶解剂(STROMATOLYZER-3WP)用下消除红细胞基质,让白细胞一个个依次通过计数池的微孔,利用细胞通过微孔时瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数。脉冲信号经放大、甄别后,微机处理数据得到其体积分布直方图。淋巴细胞群为:35-90fl 中间细胞群为:90-160fl 粒细胞群为:160-300fl
三、【试剂品牌】:
稀释液: CELLPACK(PK-30L)氯化钠6.38g/L 硼酸1.0g/L 四硼酸钠0.2g/L EDTA-2K 0.2g/L Hb溶血素:SULFOLYSER(SLS-200A)月桂洗硫酸钠 1.7g/L 白细胞溶解剂:STROMATOLYZER-3WP 清洗液:CELLCLEAN STACCLEANER-SYS 次氯酸盐 5%
5、抗凝剂: KEDTA·2HO(1.5-2.2mg每毫升血液)
四、【仪器】:
KX—21N血细胞分析仪
五、【操作步骤】: ㈠开机: 插上电源,打开 KX—21血细胞分析仪电源开关
仪器进入自动检测系统,自动检测各系统参数,同时测定本底参数。
当仪器显示窗口出现“Ready No:1“,说明仪器处于待测标本状态,可以正常测定血常规标本。
打开电脑和打印机,连接数据接口。㈡关机:
仪器使用完毕,按“Shut Down”键。
将仪器测试针插入专用清洗液中,按开始键,当停止吸液时移去清洗液。自动血细胞计数仪进入自动冲洗状态,当自动血细胞仪显示窗口出现“Turn Power OFF”时可以安全关机,关闭仪器开关,关闭电脑。
㈢血细胞分析仪的保养(每周一次)
按“Select”键,用上下移动键选择Maintenance项,按“ENTER”键。再键“上下”移动键选择“Rinsing”项,按“ENTER”键。
在“RBC”和“WBC”计数池中各加1毫升专用清洁液,按“1”键 仪器自动清洁保养,全过程约需5分钟。仪器表面需经常擦洗,保持仪器整体清洁。㈣每日质控
在每天样本检测前,取质控品及临检中心质控品进行检测,并做好登记。若检测结果均在范围内,则可进行样本检测,若有失控出现,则需重新定标。
六、【参考范围】:
(1)白细胞(WBC)计数:成人(4 –10)×109/L 儿童(5-12)×109/L 新生儿(15-20)×109/L
(2)白细胞分类(成人):中性粒细胞 50-70% 淋巴细胞
20-40% 嗜酸性粒细胞 0.5-5% 嗜碱性粒细胞 0-1% 单核细胞 3-8% 2.红细胞(RBC):男(4-5.5)×1012/L
女(3.5-5)×1012/L
新生儿(6-7)×1012/L 血红蛋白(HGB):男120-160g/L 女110-150g/L 新生儿170-200g/L 4.血小板(PLT):(100-300)×109/L 5.血球压积(HCT):男0.42-0.49 L/L 女0.37-0.43 L/L 6.平均红细胞体积(MCV):82-95fl MCV(fl)=
每升血液中血细胞比容(L/L)×1015
每升血液中红细胞总数
7.平均红细胞血红蛋白含量(MCH):27-31pg MCH(g/L)=
每升血液中血红蛋白浓度(g/L)
每升血液中红细胞总数
平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):320-360g/L
MCHC(g/L)=
每升血液中血红蛋白浓度(g/L)
升血液中血细胞比容(L/L)
9.RDW-CV、RDW-SD: RDW-CV:11.6%-14.0%; RDW-SD:39.0-46.0fL。10.PDW(15.05-18.1)% MPV(9.4-12.5)fl;
P-LCR(13-43)%。
七、【临床意义】: 1.白细胞
(1)白细胞计数
①生理性增加新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。
②病理性增加类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。
③减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎(亦可增多)、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败血症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Che^diak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。(2)白细胞分类计数:见下表 各种白细胞增多、减少的临床意义 细胞类别
增多
减少
中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞
类白血病、白血病、化脓性细胞感染、溶血性贫血、急性出血、急性溶血、手术后、恶性肿瘤、组织损伤、皮肤病、真性红细胞增多症、脾切除术后。参见嗜酸性粒细胞计数
慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等。
百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病
单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染
伤寒、副伤寒、流感、麻疹、再生障碍性贫血、黑热病、病毒感染、原虫感染、病毒性肝炎、脾功能亢进、贫血、原发性中性粒细胞减少症、肝硬化
急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷 使用皮质类固醇激素、再生障碍性贫血、多毛细胞白血病.2.红细胞(RBC):
①生理性减少见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。
②病理性减少造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。③相对性增多主要因血浆容量减少所致,见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。
④代偿性增多主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。
⑤绝对性增多克隆性真性红细胞增多;非隆性红细胞增多,与促红细胞生成素产生过多有关,见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。
3、血红蛋白(Hb):
生理性增加:新生儿、高原居住者。
病理性增加:真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症(如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水)。
减少:各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。
红细胞比积(HCT):与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同。血小板(PLT):
(1)生理性正常人血小板在一天内可有6%-10%变化;表现为早晨低,午后较高;春季低,冬季略高;平原较低,高原较高;静脉血比毛细血管血高10%;月经前低,后升高;妊娠中晚期升高,分娩后减低;运动后升高,休息后恢复。(2)病理性 减少:除创伤之外,血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有:①、血小板生成障碍,如急性白血病、再生障碍性贫血;②、血小板破坏过多,如ITP、脾功能亢进,系统性红斑狼疮;③、血小板消耗过多,如DIC、血栓性血小板减少性紫癜。增多(血小板大于400×109/L):①、骨髓增生性疾病:慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症;②、原发性血小板增多症;③、急性大出血,急性溶血,急性化脓性感染;④、脾切除手术后。
6.MCV、MCH、MCHC 主要用于贫血的形态学分类,见下表: 贫血的形态学分类
MCV(fL)
MCH(pg)
MCHC(g/L)
大红细胞性贫血 正红细胞性贫血 单纯小细胞性贫血 小细胞低色素性贫血
100-160 80-100 72-80 50-80
35-50 27-35 21-26 12-30
310-370 310-370 300-370 240-300
7.RDW-CV、RDW-SD:(1)用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察,缺铁性贫血时RDW增大,经治疗后可恢复正常。(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别,缺铁性贫血时RDW增大,而轻型珠蛋白生成障碍性贫血时RDW正常。
(3)RDW与MCV结合可将贫血分为6种。①小细胞均一性:MCV下降,RDW正常,如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。②小细胞不均一性:MCV下降,RDW增大,如缺铁性贫血。③正常细胞均一性:MCV、RDW均正常,如某些慢性疾病。④正常细胞不均一性:MCV正常,RDW增大,如早期缺铁性贫血。⑤大细胞均一性:MCV增大,RDW正常,如再生障碍性贫血。⑥大细胞不均一性:MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。8.MPV、PDW、P-LCR:
①MPV 其临床意义要结合PLT的变化才有价值。①、鉴别血小板减少的原因:当骨髓造血功能损伤致血小板减少时,MPV减少;当血小板在周围血液中破坏增多时,导致血小板减少,MPV增大;血小板分布异常致血小板减少时,MPC正常。②、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,MPV越小;当造血功能恢复时,MPV增大常先于PLT升高。③、其它:MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血;MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。
②PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数,增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等;可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症,前者PDW增加,后者PDW正常。
③P-LCR 代表血小板计数中体积>12fL的血小板的比值或数量,有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片,并可监测骨髓的造血功能。
八、【标本采集】: 随机采取病人静脉血,用40g/L EDTA-K2 抗凝(50ul抗凝1ml血,相当于2mgEDTAK2/1ml血)。
九、【注意事项】:
1、血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂,用量为EDTA-K2*2H2O1.5—2.0mg可抗凝1ml血,不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂。
2、采集后在室温中贮存不应超出6h;如需制用血涂片应在2h内完成。
3、测定前抗凝血应充混匀,任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。
4、注意病理因素对血液分析仪使用的影响,特别是各系统的报警提示。如是否有大血小板对血小板计数的影响;有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。
5、如有冷凝集现象,将血置37℃水浴箱10min后立即测试。
十、【质量控制】:
每日工作开始应先做sysmex质控或临床检验中心的全血质控品。出现失控,应校正后并重做质控,直至符合质控要求。按要求做好仪器校正和仪器对比工作。做好质控、失控和校正登记。
十一、【报告复查】:对以下情况的样本进行复查(仪器及手工);(1)白细胞低于3.0×109/L;
(2)红细胞数与血红蛋白明显不符;(3)血小板低于50×109/L;
(4)白细胞分类时,中间细胞>15%,以及机器未能分出的样本需手工分类。白细胞计数: 原理:血液经稀酸溶液稀释后,红细胞被破坏,放入血细胞计数池内,置显微镜下计数,求得每微升中的白细胞数。试剂:
冰醋酸
10ml 蒸馏水
加至500ml 10g/L美蓝
3滴
器材:20微升吸管,血细胞计数板,显微镜。
操作:加计数试剂0.38ml于小试管内,取血20微升吹入试剂,混匀。静置1-2分钟。低倍计数,计数4角得4大方格,计数总数乘以50即为白细胞/微升。血小板计数: 原理:血液用血小板计数试剂稀释后,在显微镜下计数。试剂
草酸铵稀释液草酸铵1.0g,乙二胺四乙酸二钠0.014g,40%甲醛溶液0.1ml加水至100ml,加亚甲蓝少许,过滤后置冰箱备用。
许汝和稀释液尿素9g,乙二胺四乙酸二钠0.5g,巴比妥钠0.3g,加蒸馏水水至100ml,过滤后置冰箱备用。
Barr稀释液白皂素0.25g,枸橼酸钠3.5g,煌焦油蓝0.1g,40%甲醛溶液1.0ml,加水至100ml,过滤后置冰箱备用。操作
选上述任一试剂(本科室用2液),每管加0.38ml,加入全血20微升,充分混匀。
用改良牛鲍计数板,将血液稀释液充池后,置于有滤纸得培养皿内,放置至少10min,待血小板沉降后计数。
计数中央大方格内5个中方格得血小板数,其结果乘1000,即得每微升血液中血小板数。手工白细胞分类计数: ㈠、原理
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色,根据各类白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),以观察数量、形态和质量的变化,对疾病有辅助诊断意义。㈡、试剂
瑞姬氏复合染色液 Ⅰ液:取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g,置洁净研钵中,加少量甲醇(分析纯),研磨片刻,吸出上层染液。再加少量甲醇,继续研磨,再吸出上液。如此连续几次,共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中,每天早、晚各振摇3分钟,共5天,以后存放一周即能使用。Ⅱ液:pH 6.4-6.8磷酸盐缓冲液 磷酸二氢钾(无水)6.64g 磷酸二氢钠(无水)2.56g 加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐调整pH,加水至1000ml ㈢、操作
采血后推制厚薄适宜的血膜片应呈舌状,头、体、尾清晰可分。
推好的血膜在空气中晃动,以促使快干。天气寒冷或潮湿时,应于37℃温箱中促干,以免细胞变形缩小。
染色。平置玻片于染色架上,滴加染液3-5滴,使其迅速盖满血膜,约1分钟后,滴加缓冲液5-10滴,轻轻摇动玻片或对准血片吹气,与染液充分混合,5-1分钟后用冲去染液,待干。选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数100个白细胞,按其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值(百分率)。
第五篇:主要厂家三分类血球
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