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xx医院检验科检验技术操作规程
目录
第一节 全自动血液细胞分析仪操作规程 第二节 尿液分析仪使用规程 第三节 自动凝血仪操作规程 第四节 半自动生化分析仪操作规程 第五节 血常规检验操作规程 第六节 尿常规检验操作规程 第七节 肝功能检验操作规程
第八节 肾功能检验操作规程
第九节 血脂检验操作规程
第十节 血液葡萄糖测定技术操作规程
第十一节 凝血四项检验操作规程
第十二节AB0血型正、反血型鉴定技术操作规程
第一节 全自动血液细胞分析仪操作规程
1、样品分析前准备 1.1开机前的检查、准备
在开启分析仪电源之前，操作者须按以下要求进行检查: 1.1.1检查稀释液、清洗液、溶血素是否充足，有无过期;试剂管路是否弯折，连接是否可靠。1.1.2 电源线是否正确连接。1.1.3 废液桶是否清空。
1.1.4 UPS电是否足够，打印纸安装是否正确，是否足够。1.1.5 确保键盘正确连接到键盘接口上。1.2.开机
1.2.1 打开分析仪后面的电源开关,电源指示灯亮，屏幕上显示“Initializing…”.1.2.2 分析仪进行初始化，整个初始化过程持续约4～7分钟。1.2.3 初始化过程结束后，系统自动进入“计数”界面。1.3 动物类型选择
1.3.1 按[菜单]键，移动光标，选择“动物”，按[确认]进入“动物”界面。1.3.2 操作者根据测量的动物类型，选择需要分析的动物类型。2.1.1 按[菜单]键，选择“计数”，进入“计数”界面。再按[模式]键，将当前模式设置为“全血”模式。
2.1.2 确认状态指示区的计数状态为“就绪”，工作模式为“全血”。
2.1.3 将准备好的全血样本放到采样针下，使采样针可以吸到样本且针头与容器底保持一定距离。
2.1.4 按计数键，启动样本分析过程。此时，状态指示区的计数状态为“运行”。2.1.5 采样针自动吸取13ul的样本后蜂鸣器响，在采样针抬起后，移开样本。
2.1.6 分析完成后，按[F4]键进入“样本信息编辑”界面。按[F9]键进入汉字状态。在汉字状态下，按[F8]键在全拼和五笔输入法之间进行切换，输入样本信息，输入完成后，点击“确认”，保存输入的内容并返回到“计数”界面。2.1.7 按[打印]键打印样本分析报告。
2.1.8 按照此操作过程进行其余样本的分析。2.2 预稀释样本分析
2.2.1 按[菜单]键，选择“计数”，进入“计数”界面。再按[模式]键，将当前模式设置为“预稀释”模式。按[稀释]键，屏幕弹出“加稀释液”对话框，取一个干净的样本杯放在采样针下，按计数键，微倾斜样本杯一定角度让分析仪自动排出的1.6ml稀释液沿管壁流入样本杯中，避免产生气泡或溅出。
2.2.2 加完稀释液后，按[确认]键，“加稀释液”对话框关闭，分析仪自动清洗采样针。2.2.3 采集20ul血液迅速注入盛有稀释液的样本杯中混匀。2.2.4 确认状态指示区的计数状态为“就绪”，工作模式为“预稀释”。
2.2.5将准备好的预稀释样本放到采样针下，使采样针可以吸到样本且针头与容器底保持一定距离。
2.2.6 按计数键，启动样本分析过程。此时，状态指示区的计数状态为“运行”。2.2.7 采样针自动吸取0.7ml的样本后蜂鸣器响，在采样针抬起后，移开样本。
2.2.8分析完成后，按[F4]键进入“样本信息编辑”界面。按[F9]键进入汉字状态。在汉字状态下，按[F8]键在全拼和五笔输入法之间进行切换，输入样本信息，输入完成后，点击“确认”，保存输入的内容并返回到“计数”界面。2.2.9按[打印]键打印样本分析报告。
2.2.10按照此操作过程进行其余样本的分析。
3、样品分析结束后
3.1 按[菜单]键，弹出系统菜单，选择“关机”。
3.2界面弹出“关机”对话框，点击“确认”进入关机界面。
3.3 将E-Z清洗液放到采样针下，按计数键，采样针将自动吸取E-Z清洗液，执行液路和计数池的清洗。
3.4 按照界面提示信息，将E-Z清洗液放到采样针下，按计数键，采样针将再次自动吸取E-Z清洗液，执行液路和计数池的清洗。3.5 执行完成后，界面提示“请关闭电源”是，关闭分析仪的电源开关。
3.6 关闭电源后检查分析仪是否有渗漏，并将血液分析仪的周边环境打扫干净。
第二节 尿液分析仪使用规程
本测试仪是一项精密仪器，为了更好的维护和使用本仪器必须遵照以下操作规程。
一、操作步骤
1.尿液分析仪的通讯电缆与电脑背面的通讯端口相连，接通电源，先打开电脑，再打开分析仪；仪器启动，风扇转动，推进器移动，屏幕显示 “系统正在测试……”，此时系统正在自检，显示屏显示主菜单，工作台检条区有红色光交替闪烁，用户可以开始测试 2.点击电脑桌面尿液分析软件；
3.将试纸条的试剂区完全浸入新鲜的、充分混合的、未离心的样本中立即取出，将试纸条的侧边沿尿样容器的管壁刮去多余尿液；
4.将蘸有尿液的试纸平放在工作台的检条区，确保试纸同工作台前壁接触； 5.仪器检测到试纸存在后，推进器将试纸推到测试区进行测试； 6.当推进器退回原位，放下一条试纸……，这样实现连续测试；
7.当工作台上所有的试纸条测试完毕，打印结果输出结束后，按菜单键进入仪器设置，将电源开关拨到 “ 断（○）”位置，关闭仪器电源。
二、仪器维护
1.不要在仪器通电状态下清洁仪器；
2.不要用汽油、油漆稀释剂、苯化合物等可能腐蚀仪器的有机溶剂擦拭仪器； 3.不要用水清洗液晶屏，不要用任何会擦伤工作台和白基准的物质擦拭工作台； 4.不要用任何溶剂清洁白基准，如果白基准有明显划痕或损坏，请与供应商联系； 5.用柔软干布或沾有温和去污剂的软布擦拭仪器，保持仪器清洁； 6.用柔软、无磨损的布擦拭液晶屏；
7.为使仪器正常运行并提供准确的测试结果，必须定期从仪器中取下推进器、工作台、步进板、用清水冲洗，用软布依次擦干保持工作台的清洁。
三、注意事项
1.测试时不要将仪器放置在阳光直射的地方,以免影响测试精度；
2.请在测试前核对尿液分析试纸型号，避免因使用的尿液分析试纸型号不正确而导致测试结果错误；
3.请勿使用过有效期或变质的尿液分析试纸； 4.尿样本中血的浓度高时，可影响测试的准确性，仪器能够识别出高浓度血尿并打印出 “结果无效”的提示；
5.必须在推进器动作前，将待测试纸条放好；
6.在放置试纸条时应确保试纸条前端接触工作台前壁；
7.如果仪器测试头下发生故障导致纸条运行受阻。关掉仪器，拉出工作台，取出受阻试纸条后，重新安装工作台。开机自检后，对未得出结果的样本重测。
第三节 自动凝血仪操作规程
1、仪器的常规操作 1.1打开电源开关前的检查。
检查废液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面过低，请用蒸馏水或去离子水将罐充满。清空废液瓶。
管道连接 检查各种管线的连接。确保没有管子脱落或扭结，电源线被安全的插入交流插座。确保打印机中有足够的纸张以供打印当天所需处理的所有样本结果。
补充反应杯 丢弃用过的反应杯，加入适量的干净的反应杯。
1.2打开电源
开机顺序：打印机 →压力单元→电源单元和主单元（右侧）。
打开电源后，仪器自动进入自检。
将病人样本，质控与试剂分别按要求准备就绪，进入分析过程：
试剂准备 →Set Reagent → 输入确认试剂体积 → 补充反应杯 → 安放样本架
1.3样本分析:
Work List → ID No.Entry → 输入样本号 → ENTER → 选择所需检测的项目(－变为○),确认所有的设置结束后 → ENTER → 按屏幕右上方“Start”键,执行分析。
分析完毕,仪器进入准备状态。
1.4关机前的工作
每日清洁所有样本针和试剂针：
在主菜单屏上按下【Rinse probe】键。将出现清洗针屏。按下【Excute】键。
1.5关机
关闭电源。
2.仪器保养 2.1每日保养 清洗样品针
每次做完试验都必须清洗样品针，主要是预防堵针，执行[Rinse Probe]→[Excute] 清空垃圾箱 2.2清空废液
查看仪器后面防逆流瓶Trap Chamber有无水，防止因为有水而导致真空泵不能抽真空
在洗液瓶中注蒸馏水，最高不要超过上面的凹槽，防止因水过满，工作时水回流到压力泵和压力传感器上导致人为破坏。2.3每周保养
做一次管路清洁，执行[Special Operate] →[Rinse&Prepare] 清洁仪器
2.4每半年保养
清洗洗液瓶内部，清洗洗液瓶出水管上的过滤网一次。2.5每三或六个月保养
清洁传动滑轨(X轴、Y轴)并上润滑油。防止因积尘而使样品针运行不到位，向下扎错位置造成样品针弯曲或断裂
第四节 半自动生化分析仪操作规程 【操作规程】
1.开机之前检查电源线是否连接无误，电源要求接地良好;连接打印机电源线，接通打印机电源开关;将废液管插入废液容器内;接通显示器开关及主机背部电源开关。
2.开机→自检后→键入Enter，确定已设定测试参数→键入Enter，进入编制工作表→在设置栏，开启联机打印→仪器预热20分钟后，调用已设定测试项目进行样品测定→打印结果→清洗仪器→关机。
3.吸液口由不锈钢保护管和钢管内聚四氟乙烯吸液管组成，应注意保护，不要碰弯。4.切忌在带电状态下连接任何连接口。【仪器的保养与维护】
1.日常保养工作主要是清洗流动比色皿，每天工作结束后，要用蒸馏水清洗。具体方法如下：将吸液管插入蒸馏水中，向上扳动吸液开关，反复冲洗流动比色皿，直到蒸馏水的吸光度值正常为止。
2.每周要用专门的清洗剂清洗一次流动比色皿，清洗时，让清洗剂停留在比色皿中约半小时，然后排掉，再用蒸馏水冲洗干净，最后注入蒸馏水。3.不使用仪器时，流动比色皿内一定要保证充满蒸馏水。
4.更换打印机色带时，严格遵照打印机操作手册，避免不规范操作。
5.光源灯更换时一定要先切断仪器的电源，手不可触摸光源灯的玻璃部分，万一光源灯的玻璃部分弄脏了，可用无水乙醇将污物除去。
6.更换的蠕动泵管尺寸材料应与原泵管一致，如不一致则要重新调整吸液量。
第五节 血常规检验操作规程
【 标 本 】
抗凝静脉血（有些仪器也可用末梢血）。
【 方 法 】
血液细胞自动分析仪测定法。
【 试 剂 】
血液细胞自动分析仪配套试剂。
【 操 作 】
详见血液细胞自动分析仪使用手册。
【 附 注 】
1.血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比积、血小板计数等项目。这些项目亦有相应的手工方法，详见有关资料。
2.半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血。其优点为：
（1）静脉血能正确地反映病人实际情况，重复性好；
（2）利于延长仪器的使用寿命；
（3）解决了采血盘的交叉感染问题等。
3.血细胞计数应用EDTA•K2：为抗凝剂（EDTA•K2•2 H2O 1.5～2.2mg可抗凝1ml血）。
4.贮血容器应选用有盖塑料管。抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h；如需制作血涂片应在2h内完成。
5.测定前必须将EDTA•K2抗凝血充分混匀。
6.血细胞分析仪测定最适温度为18～22℃，低于15℃或高于30℃，均可使细胞体积发生改变，影响各参数的结果。
7.血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段，当白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显
升高或降低；白细胞分类出现异常结果（中间细胞群百分率≥8.0%）；红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况，须用显微镜检查及分类。
第六节 尿常规检验操作规程
【 标 本 】
新鲜尿液。
【 方 法 】
化学试带法。
【 试 剂 】
各型号尿液化学分析仪配套试带。
【 操 作 】
详见尿液化学分析仪使用手册。
【 附 注 】
1.尿常规检查使用尿液化学分析仪，目前能进行8～10项检测（PH、蛋白、葡萄糖、酮体、隐血、尿胆红素、尿胆素原、亚硝酸盐、比重、白细胞）。这些项目亦有相应的手工方法，详见有关资料。
2.必须了解所用试带各膜块注意事项、药物干扰。
3.要注意尿液化学分析仪测定结果与手工法的差异，必要时用手工法复查。
4.尿液化学分析仪检测仅是一个过筛手段，当蛋白、隐血、白细胞等出现异常结果（如尿蛋白“＋”或以上）时，应进行镜检。
5.尿液颜色、透明度等一般性状异常时也应报告。
第七节 肝功能检验操作规程
血清总胆红素（TBIL）和结合胆红素（DBIL）测定
改良J~G法
【 试 剂 】
参照书刊文献（如《全国临床检验操作规程》第二版）自配，配制标准液的胆红素应符合如下标准，纯胆红素的氯仿溶液在25℃当光径1.000±0.001Cm,波长453nm条件下其摩尔吸光系数应在60700±1600范围内，偶氮胆红素的摩尔吸光系数应在74380±866范围内，配制标准液的稀释剂须含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。标准液应贮於棕色瓶中避光保存，在市售试剂中以含碱性酒石酸的灵敏度特异性高。
【 操 作 】
按试剂盒说明书或相应书刊文献规程手工操作，比色测定，波长600nm.制作准曲线。血样测定，从标准曲线上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L报告。
也可按厂家提供的试剂及仪器使用的说明书的要求将相应的程序及参数设入，用自动生化分析仪测定。
【 标 本 】
血清，空腹血为宜，脂血、脂溶性色素及严重溶血干扰此测定，暂不能测定的标本应避光保存，室温可稳定8h，2~8℃可保存48h。
含叠氮钠作防腐剂的质控血清不宜用此法测定胆红素。
胆红素氧化酶（BOD）法
【 试 剂 】
市售成套试剂。BOD试剂复溶后2~8℃可保存一周。
【 操 作 】
按厂家提供的试剂及仪器说明书要求设置程序输入参数用自动生化分析仪测定。波长450或460nm。
【 标 本 】
血清要求与改良J一G法相似。
二甲亚枫（DMSO）法
【 试 剂 】
市售现成试剂。
【 操 作 】
按试剂盒说明书手工操作比色测定或用自动生化仪测定。波长560nm。
【 标 本 】
血清、轻度脂血，溶血标本对结果无明显影响、重度脂血、溶血标本须作标本空白进行较正。
血氨测定
【 方 法 】
酶两点法。
【 试 剂 】
市售成套试剂。
【 操 作 】
按试剂及仪器使用说明书要求，设入相应的程序及各项参数、用自动生化分析仪测定。波长340nm。
【 标 本 】
EDTA.Na2抗凝血浆。静脉采血后与EDTA.Na2混匀，立即置冰水中尽快分离出血浆，加塞置2~4℃保存，在2~3h内分析，-20℃可稳定24h。溶血标本忌用。
第八节 肾功能检验操作规程
尿素氮
1.检测目的：
检测血清、血浆或尿液中尿素的含量，为临床对相关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果，以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值。2.标本要求：
2.1病人准备：空腹12小时。
2.2标本类型：血清、肝素化的血浆或24小时尿。3.设备和试剂：
3.1仪器设备：迈瑞半自动生化分析仪 3.2试剂材料：试剂 3.3试剂的贮存： 3.3.1 2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期。3.3.2开盖上机2～8℃避光稳定30天。
3.3.3变质指示：试剂混浊变色或空白吸光度值<1.000时，不能继续使用。
3.4注意：此试剂为体外诊断用，禁止入口，吞下有害。试剂含有叠氮化钠，误入眼、口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗，必要时到医院就诊。叠氮化钠可以和铜、铅等金属反应形成爆炸性化合物，故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管。3.5试剂准备：即开即用的，无需特殊准备。4.操作步骤：
见生化分析仪操作流程。5.质量控制：
5.1质控物：RANDOX多项人基质血清 5.2质控措施：
5.2.1室内质控：每日日常工作前进行。
5.2.2室间质控：参加北京临床检验中心临床化学室间质评。6.干扰因素：
总胆红素≤40mg/dL，血红蛋白≤450mg/dL，抗坏血酸≤400mg/dL对本法无干扰。7.参考区间及可报区间：
7.1参考范围：血清/血浆 2.86～8.20mmol/L 24小时尿 15～35g/24h 7.2可报范围：0.00～35.00mmol/L。样品Urea含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做，结果乘以稀释倍数。8.异常结果处理：
结果异常、与临床诊断不符，应复查或与临床联络。
肌酐
1.检测目的：
检测血清、血浆或尿液中肌酐的含量，为临床对相关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果，以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值。3.标本要求：
3.1病人准备：空腹12小时。
3.2标本类型：血清、肝素化的血浆或尿液。4.设备和试剂：
4.1仪器设备：迈瑞半自动生化分析仪 4.2试剂材料：试剂 4.3试剂的贮存：
4.3.1 2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期。4.3.2开盖上机2～8℃避光稳定30天。
4.3.3变质指示：试剂混浊变色或空白吸光度值>0.050时，不能继续使用。
4.4注意：此试剂为体外诊断用，禁止入口，吞下有害。试剂含有叠氮化钠，误入眼、口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗，必要时到医院就诊。叠氮化钠可以和铜、铅等金属反应形成爆炸性化合物，故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管。4.5试剂准备：即开即用的，无需特殊准备。5.操作步骤：
见半自动生化分析仪操作流程。6.质量控制：
6.1质控物：RANDOX多项人基质血清 6.2质控措施：
6.2.1室内质控：每日日常工作前进行。6.2.2室间质控：参加临床化学室间质评。7.干扰因素：
直接胆红素≤257μmol/L，血红蛋白≤0.5g/L，抗坏血酸≤3mmol/L,甘油三酯≤15.0mmol/L,肝素≤50KU/L，枸橼酸钠≤10g/L对本法无干扰。8.参考区间及可报区间：
8.1参考范围：血清/血浆53.0～123.0μmol/L(男性)44.0～106.0μmol/L(女性)首次晨尿
1530～15320μmol/L 24小时尿
6.6～15.0mmol/24h 8.2可报范围：0.0～8840.0μmol/L。样品Crea含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做，结果乘以稀释倍数。9.异常结果处理：
结果异常、与临床诊断不符，应复查或与临床联络。9.危急值及处理方法：
>177μmol/L。及时与临床联络。10.实验室解释：
增高：严重肾功能不全、各种肾障碍、肢端肥大症等。降低：营养不良、多尿等。
第九节 血脂检验操作规程
标本采集与处理
1．受检者抽血前二周应保持平衡的饮食习惯，近期体重稳定无外伤，手术等意外情况。并注意如有使用降糖、降脂、降压、避孕药，β-受体阻滞剂，免疫抑制剂，激素药物等，则应根据所用药物特性停药数天或数周后再作血液脂类检测。
2．空腹抽血，TG，脂蛋白，载脂蛋白测定应至少禁食12小时（仅作胆固醇测定不必强求空腹）24小时内不作剧烈运动。抽血前不要久站立。至少应静坐5分钟。抽血时止血带使用不可超过1分钟。
3．标本用血清，也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血浆。EDTA.Na2浓度不宜太高。
4．血标本室温放置不得超过3h，放置30~45分钟后应即时分离出血清（浆）盖封於4℃冰箱中可稳定至少4天，如需长期保存，应於-70℃中冰冻存放，不可反复冻融。
血清总胆固醇（TC）测定
酶法（CHOD~PAP法）
【 试 剂 】
市售现成试剂。
【 操 作 】
按试剂及仪器使用说明书要求设定程序，输入参数用自动或半自动生化分析仪测定（速率法）终点法可手工操作，用普通分光光度计比色测定。波长500nm或520nm。
【 标 本 】
血清（浆）参看本节的标本采集与处理。
【 附 注 】
本法为中华医学会检验学会推荐的TC测定常规方法（中华医学检验杂志，1995、18：185）。
胆固醇标准液以定值参考血清为宜，而不宜用Chol的水溶液作标准。Chol定值质控血清亦不应用作标准液。
主要技术指标：终点法批内CV＜1.5%、批间CV≤2.5%。灵敏度：显色剂用酚时，TC5.2mmo1/L(200mg/dl)时的吸光度（A 500nm）约0.30~0.35，故A 500nm=0.005时TC浓度约为0.08mmo1/L(3mg/dL)。测定范围：当血清与试剂用量之比为1:100时其测定的上界为13mmo1/L(500ng/dL)。
血清甘油三酯（TG）测定
酶法（GPO~PAP法）
【 试 剂 】
市售现成试剂。有两种。
一步酶法单一试剂，二步酶法双试剂。
标准液（参考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不适用於二步酶法。
【 操 作 】
按试剂及仪器使用说明书要求设定程序和参数，用自动或半自动生化分析仪测定，终点法可用普通分光光度计手工操作，比色测定。波长500nm。
【 标 本 】
血清（浆）参看本节标本采集与处理。
【 附 注 】
本法在操作程序上分为一步酶法与二步酶法，二步酶法为中华医学检验学会的推荐方法（中华医学检验杂志1995、18：249）。现阶段允许二法并存，要求逐步过渡到统一采用二步酶法，在方法尚未统一前，实验室报告TG测定结果时应注明“除FG值”或“未除FG值”。
主要枝术指标：酶试剂用缓冲液配制后，20~25℃应稳定1天，4℃可稳定3~7天，试剂空白为A500nm≤0.05；显色后稳定≥30min：测定上界11.3mmo1/L(100mg/dL)； 精密度：批内CV≤3%，批间CV≤5%：灵敏度：2mmo1/L TG A 500nm≥0.2。
血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定
磷钨酸镁沉淀法
【 试 剂 】
市售成套试剂，沉淀剂，酶试剂（同TG测定）。
【 操 作 】
按试剂盒说明书操作。
1．沉淀含apoB的脂蛋白。
2．测定上清液（只含HDL）的胆固醇含量（方法同酶法TC测定）。
【 标 本 】
血清（浆）。
硫酸葡聚糖一镁沉淀法
【 试 剂 】
市售成套试剂：总HDL试剂，HDL3试剂，酶试剂（同TC试剂）。
【 操 作 】
按试剂说明书操作：
1．沉淀含apoB的脂蛋白，（总HDL试剂）；
2．沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3试剂）；
3．测定总HDL~C及HDL3~C（同酶法TC测定），并计算出HDL2~C量。
【 标 本 】
血清（浆）血样在室温中不宜久放，应即时测定，原则应低温保存。
直接HDL~C测定法
【 试 剂 】
市售专门的试剂，无沉淀剂。酶试剂同TC测定。（如日本第一化学药品株式会社的产品）。
【 操 作 】
按试剂盒及仪器使用说明书要求设置程序，输入参数直接用自动或半自动生化分析仪测定，无须沉淀离心分离出HDL步骤。
【 标 本 】
血清（浆）。
血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）测定
1．Friedwald工式计算法：
（1）LDL-C=TC―HDL-C―TG/5（以mg/dl为单位计）；
（2）LDL-C=TC―HDL-C―TG/2.2(以mmo1/L为单位计)；
（3）只有当血TG＜4.52mmo/L结果才较准确；
（4）只有TC、TG、HDL-C三项测定都准确且符合标准化要求时，才可计算出LDL-C的近似值。
2．聚乙烯硫酸沉淀法
【 试 剂 】
沉淀剂市售，酶试剂同TC测定。
【 操 作 】
1．TC测定。
2．选择性沉淀血清中LDL，测定上清液之HDL－C与VLDL－C之和的量，（同TC测定）。
3．计算出LDL－C的含量。
【 标 本 】 血清。
血清载脂蛋白A1（apoA1）测定
免疫透射比浊法。波长340nm，本法批间CV＜5%。
【 试 剂 】
市售试剂盒，试剂2~8℃保存，不同批号试剂不能混合使用，抗血清效价不应低於16。
【 操 作 】
按试剂及仪器使用说明书要求，设定程序和参数用自动生化分析仪测定，也可用特定蛋白分析仪作速率法散射比浊测定，或用含340nm的分光光度计手工操作测定。
【 标 本 】
血清。
血清载脂蛋白B（apoB）测定
免疫透射比浊法。波长340nm，本法批间CV＜5%。
【 试 剂 】
市售试剂，2~8℃保存，不同批号试剂不能混合使用，抗血清效价不应低於1：128。
【 操 作 】
参看apoA1测定。
【 标 本 】
血清。
第十节 血液葡萄糖测定技术操作规程
1.检测目的：
检测血清或血浆中葡萄糖的含量，为临床对相关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果，以及对健康人群正常生理指标的监测提供重要的参考价值。
3.标本要求：
3.1病人准备：空腹12小时。
3.2标本类型：血清或NaF抗凝的血浆。采血后及时分离，以避免血清或血浆中葡萄糖被细胞利用而降低。
4.设备和试剂：
4.1仪器设备：奥林巴斯AU600生化分析仪 4.2试剂材料：四川迈克公司试剂 参与反应成份：
R1：酚（12.0mmol/L）R2：GOD（≥35KU/L）、POD（≥5KU/L）、4-AAP（1.20mmol/L）4.3试剂的贮存：
4.3.1 2～8℃密闭避光贮存至标签所注失效期。4.3.2开盖上机2～8℃避光稳定30天。
4.3.3变质指示：试剂混浊变色或空白吸光度值>0.150时，不能继续使用。
4.4注意：此试剂为体外诊断用，禁止入口，吞下有害。试剂含有叠氮化钠，误入眼、口中或沾染到皮肤上请立即用清水彻底冲洗，必要时到医院就诊。叠氮化钠可以和铜、铅等金属反应形成爆炸性化合物，故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管。4.5试剂准备：即开即用的，无需特殊准备。质量控制：
5.1质控物：RANDOX多项人基质血清 5.2质控措施：
5.2.1室内质控：每日日常工作前进行。
5.2.2室间质控：参加北京临床检验中心临床化学室间质评。6.参考区间及可报区间：
6.1参考范围：空腹
3.89～6.11mmol/L 餐后1小时 7.78～8.89mmol/L 餐后2小时 3.89～7.78mmol/L 6.2可报范围：0.00～22.30mmol/L。样品GLU含量超过线性范围应用生理盐水稀释重做，结果乘以稀释倍数。
7.危急值及处理方法：
<2.5mmol/L或>10mmol/L。及时与临床联络。
第十一节 凝血四项检验操作规程
全血凝固时间检验（CT）
【 标 本 】
静脉取血3ml。
【 方法与操作 】
试管法、硅管法操作参见《全国临床检验操作规程》（第二版）。
【 附 注 】
1.静脉取血要一针见血，尽量减少组织液和空气混入。
2.水浴箱温度要恒定，过高或过低，可影响结果。
活化部分凝血活酶时间测定（APTT）
【 标 本 】
自静脉取血，用109mmol/L枸椽酸钠作1:9抗凝。
【 试 剂 】
市售成套试剂。
【 方法与操作】
按试剂及有关仪器说明书要求进行。
【 附 注 】
1.标本应及时检测，最迟不超过2h。
2.分离血浆应在3000r/min，离心10min。
3.本试验较试管法全血凝血时间敏感，能检出因子Ⅷ：C＜25％轻型血友病。
血浆凝血酶原时间测定（PT，一期法）
【 标 本 】
静脉血1.8ml，用109mmol/L枸椽酸钠0.2ml抗凝。
【 试 剂 】
1.组织凝血活酶浸出液；
2.0.025mol/L CaCl2液；
【 方法与操作 】
见《全国临床检验操作规程》（第二版）。
【 附 注 】
1.采血后宜在1h内完成，置冰箱4℃保存,不应超过4h，-20℃下可放置2周，-70℃可放置6个月。
2.水温箱控制在37℃±1℃，过高过低均影响结果。
简易凝血活酶生成试验（STGT）
【 标 本 】
取全血0.04ml加5ml蒸馏水，混匀，即成溶血液，备用。
【 方法与操作 】
见《全国临床检验操作规程》（第二版）
第十二节 AB0血型正、反血型鉴定技术 操作规程 1.检测目的
用于检测患者血型，实施输血治疗和组织器官移植等。2.检测原理（正定型法）
根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上特异性抗原结合能够出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在室温条件下反应，若被检红细胞出现凝集现象，表明被检红细胞上有与血型抗体对应的抗原。3.标本要求 新鲜全血。4.试剂
标准抗A、抗B血清。5.操作步骤（玻片法）
5.1 标记：取一载玻片，用蜡笔画上直径2cm左右的两个圆圈，分别标记抗A、抗B。5.2 抗血清：在玻片蜡笔圈内按标记所示分别滴加抗A、抗B标准抗血清各一滴。
5.3 红细胞：在抗A、抗B圈内加被检者全血各一滴。用玻棒将红细胞与抗体充分混匀，室温下放置18～30min（为防止天气干燥造成玻片干涸，可把试验玻片放在有湿纱布的盖盘中）。
5.4 血型判读：摇动玻片，肉眼观察玻片蜡笔圈内有无颗粒状凝集及凝集程度，判定阴性、阳性和阳性程度。阴性指视野中红细胞程均匀散布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无聚集靠拢现象。阳性时红细胞出现凝集。
6.质量控制
6.1 分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。6.2 试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
6.3 按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以6℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温内进行试验，36℃可反应减弱。
6.4 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。7.干扰因素
7.1 分型血清效价太低、亲和力不强；
7.2 受检者红细胞上抗原位点过少或抗原性减弱； 7.3 受检者血清中缺乏应有的抗-A/抗-B抗体；
7.4 各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体； 7.5 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因； 7.6 血清中有意外抗体，如自身抗-I，常引起干扰； 7.7 老年人血清中抗体水平大幅度下降；
7.8 更换新批号抗血清或对试剂结果有怀疑时，可设定阳性、阴性和自身对照； 7.9 为避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用；
7.10 婴幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱；
7.11 有些疾病可能使红细胞定性出现困难，如：严重的肠道细菌感染；严重的细菌感染；血清中存在病理性冷凝集素与红细胞上抗原结合；部分高球蛋白和异常高球蛋白血症患者； 7.12 输入异型血或做过与受者血型不同的异体骨髓器官移植的病人在血型坚定时可能出现混合外观。
第二篇：医院检验科急诊检验制度
医院检验科急诊检验制度
1、检验科急诊化验室保证执行一天24小时值班制，接到急诊检验申请单或电话
告知或急诊病人前来化验，值班人员必须5分钟内给病人采血或接收标本，半小时之内出检验报告。
2、住院病人急诊检验，临床医生根据病情需要，填写合格急诊检验申请单，并
填写急诊申请时间，由护士采集或收集标本及时送急诊化验室检验，并填写
采集时间，护送队及时送检，检验科收到标本后记录接收时间，及时检验、及时电话报告临床，并记录报告时间及接收报告者姓名。
3、检验报告单于当日午后或次日早上，随同其他检验报告单一并送临床科室。
4、急诊检验范围：（1）．急诊病人和急诊观察病人。（2）．门诊中的急危重病人。（3）住院病人病情突然变化者。
5、急诊检验项目：三大常规、脑脊液及各种穿刺液常规检验、血型鉴定、潜血
试验、凝血酶原时间、部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、D-二聚
体、钾、钠、氯、钙、镁、磷、肌酐、尿素氮、尿酸、血糖、血气分析、血、尿淀粉酶、肌酸激酶、肌酸激酶同功酶、乳酸脱氢酶、肌钙蛋白、胆碱酯酶、CRP、糖化血红蛋白、肝功能等．其他项目可根据需要有条件开展都得开展。
6、做好本室室内质控、室间质评、仪器维护使用及记录，填写督查交接班情况。
第三篇：检验科资料
检验科在医院感染管理工作中的职责
一、负责感染病人相关化验，对送检的样本及时进行病原微生物的培养、分离、鉴定、药敏试验及特殊病原体的耐药性监测。
二、定期总结、分析病原微生物分布及其药敏试验结果，向临床医师和医院感染管理科反馈，并向全院公布。
三、负责医院感染常规微生物学监测，积极配合感染管理专职人员工作，反馈和上报有关信息，严格执行无菌操作技术和消毒隔离制度。
四、负责医院感染控制培训中相关微生物学知识的培训。
五、严格执行医院感染监控制度，按照国家法规要求做好生物安全工作。
六、发生医院感染流行或暴发时，承担相关检测工作。
七、负责医院感染科研工作中的实验室检测工作。
检验科医院感染微生物学监测制度
为了合理规范我院消毒灭菌效果、环境卫生学监测工作，提高监测结果的准确性、真实性、可靠性，特作如下规定及要求：
一、按规定开展环境微生物学监测项目，严格遵守规定的监测时限，真实规范采样，完整填写监测报告单，每月25号前报感染管理科，科室监测登记备案保存3年。
二、严格执行无菌技术操作原则，操作前衣帽整洁，戴口罩，洗手，必要时戴手套。
三、严格执行医疗机构消毒技术规范，培养基制作间使用前严格进行环境消毒，空气紫外线照射消毒时间不少于60分钟，开灯5-7分钟开始计时，物表消毒配置500mg/L含氯消毒液进行擦拭消毒，拖布、抹布、消毒桶固定使用，标记清楚，不准混用。
四、严格执行手卫生规范，制作培养基和采样操作前严格洗手和手消毒，培养基制作间配备手消毒液，手消开瓶使用期限为1个月。
五、细菌室每月对采样试管、培养皿做无菌试验，按要求做到培养时限准确、中和剂添加正确、报告结果规范。
六、监测中对不合格项目要认真进行原因分析，排除制作和操作中污染的可能性，并对不合格项目如实上报。
七、重点科室、重点部位每月进行监测，其它科室不定期进行抽查，如有感染可能性随时配合医院进行监测调查。
八、各科室（部门）监测项目、监测时限、采样方法、评价（合格）标准，详见附件。附件：
A.4 手和皮肤消毒效果监测 A.4.1手的消毒效果监测 应遵循WS/T 313的要求 A.4.2 皮肤的消毒效果监测 A.4.2.1 采样时间
按照产品使用说明规定的作用时间，达到消毒效果后及时采样。A.4.2.2 采样方法
用5cmx5cm的灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，及时送检，不规则的皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。A.4.2.3 检测方法
将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0mL待检样品按种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18 ml ,边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36℃±1℃温箱培养48h，计数菌落数。
细菌菌落总数计算方法见式（A.1）：
细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数x稀释倍数 采样面积（cm2）…（A.1）A.4.2.4 结果判定
皮肤消毒效果的判定标准遵循WS/T 313中外科手消毒卫生标准。A.4.2.5 注意事项
采样皮肤表面不足5cmx5cm，可用相应面积的规格板采样。
A.5 物体表面的消毒效果监测 A.5.1 采样时间
在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。A.5.2 采样方法
用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采面积≥100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。A.5.3 检测方法
充分震荡采样管后，取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml～20ml，36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。A.5.4 结果计算 A.5.4.1 规则物体表面
物体表面菌落总数计算方法见式（A.2）：
物体表面菌落总数（cfu/ cm2）=平均每皿菌落数X洗脱液稀释倍数 采样面积（cm2)……（A.2）
A.5.4.2 小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。A.5.5 结果判定
A.5.5.1 洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/ cm2。
A.5.5.2 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/ cm2。
A.6 空气的消毒效果监测
A.6.1 采样时间
采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；或怀疑与医院感染暴发有关时采样。A.6.2 监测方法
A.6.2.1洁净手术部（室）及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB 50333要求进行监测。浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。房间面积＞10m2者，每增加10m2增设一个采样点。
A.6.2.2 未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。A.6.2.3 将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数。若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。A.6.3 结果计算
A.6.3.1 沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿．暴露时间）A.6.3.2 浮游菌法计算公式见式（A.3）：
空气中菌落总数（cfu/m3）=采样器各平皿菌落数之和（cfu)采样速率（L/min）x采样时间（min）× 1000 ……（A.3）A．６．４ 结果判定
A．６．４．１洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循ＧＢ５０３3３．
A．６．４．２非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直径９ｃｍ平皿）。
A．６．４．３儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)。A．６．5 注意事项
采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。
A．7 消毒液的监测
A．7．1 常用消毒液有效成分含量测定
库存消毒剂的有效成分含量依照产品企业标准进行检测；使用中消毒液的有效浓度测定可用上述方法，也可使用经国家卫生行政部门批准的消毒剂浓度纸（卡）进行监测。
A．7．2 使用中消毒液染菌量测定
A．7．2．1.1 用无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀。醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和，含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂，醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂，含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。
A．7．2.1.2 用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1.0mL接种平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20 mL,36℃±1℃恒温箱培养72h,计数菌落数；怀疑与医院感染爆发有关时，进行目标微生物的检测。消毒液染菌量计算见式（A.4）：
消毒液染菌量（cfu/ml）=平均每皿菌落数×10×稀释倍数………（A.4）A．7．2．2 结果判断
使用中灭菌用消毒液：无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10cfu/ml，其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml。A．7．3 注意事项
采样后4h内检测。A8 清洁用品的消毒效果监测
A．8．1 采样时间 消毒后、使用前进行采样。
A．8．2 采样方法 布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入5ml含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。
A．8．3 检测方法 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。
A．8．4 结果判定 未检出致病菌为消毒合格。A．9 致病菌的检测
当怀疑被某致病菌污染时，或怀疑医院感染与某致病菌有关时，致病菌的检测依据污染情况进行相应指标菌的检测。检测方法参考相关标准。
附 录 B
（资料性附录）
消毒试验用试剂和培养基配方
B．1 磷酸盐缓冲液（PBS.0.03mol/L.pH7.2）
无水磷酸氢二钠 2.83g 磷酸二氢钾 1.36g 蒸馏水加至 1000mL
将各成分加入到1000mL蒸馏水中，待完全溶解后，调pH至7.2～7.4，于121℃压力蒸气灭菌20min备用。B．2 无菌检验用洗脱液
吐温―80 1g 蛋白胨 10g 氯化钠 8.5g 蒸馏水 1000mL 将各成分加入到1000mL0.03mol/L PBS液中，加热溶解后调pH至7.2～7.4，与121℃压力蒸汽灭菌20min备用。
B．3 营养琼脂培养基 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 氯化钠 5g 琼脂 15g 蒸馏水 1000mL
除琼脂外其他成分溶解于蒸馏水中，调pH至7.2～7.4，加入琼脂，加热溶解，分装，于121℃压力蒸气灭菌20min备用。B．4 溴甲酚紫蛋白胨培养液
蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 可溶性淀粉 1g
溴甲酚紫乙醇溶液 10mL 蒸馏水 1000mL
将蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸馏水中，调pH至7.0～7.2，加入1%溴甲酚紫酒精溶液，摇匀后，分装，每管5mL，于115℃压力蒸汽灭菌30min。置4℃冰箱备用。
B.5 营养肉汤培养基
蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000ml
将各成分溶解于蒸馏水中，调 pH 至 7.2～7.4，分装，于 121℃ 压力蒸汽灭菌 20min备用。
B.6 嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基
蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 可溶性淀粉 1g 葡萄糖 1g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml 以上各成分蒸馏水溶解，调pH 至7.0～7.2，装瓶，经115℃压力蒸汽灭菌30min后使用。
B.7 0.5% 葡萄糖肉汤培养基
蛋白胨 10g 氯化钠 5g 葡萄糖 5g 肉浸液 1000ml
取蛋白胨与氯化钠加入肉浸液内，微温溶解后，调 pH 至弱碱性，煮沸、加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调 pH 至7.0～7.4，分装，于 115℃ 压力蒸汽灭菌 30min。
B.8 稀释液：胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS）。
胰蛋白胨 1.0g 氯化钠 8.5g
先用900ml以上蒸馏水溶解，并调节pH值在7.0±0.2（20℃），最终用蒸馏水加至1000ml，分装后，经121℃压力蒸汽灭菌后使用。B.9 需氧-厌氧菌琼脂培养基
酪胨(胰酶水解)15g 牛肉膏 3g 葡萄糖 5g 氯化钠 2.5g L-胱氨酸 0.5g 硫乙醇酸钠 0.5g 酵母浸出粉 5g
新鲜配制的 0.1% 刃天青溶液 1.0ml(或新配制的 0.2% 亚甲蓝溶液 0.5ml 琼 脂 0.5g～0.7g 蒸馏水 1000ml
除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成份加入蒸馏水中，微温溶解后，调 pH 至弱碱性，煮沸、滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调 pH 至 6.9～7.3，分装于 115℃压力蒸汽灭菌 30min。B.10 无菌试验用真菌培养基
磷酸二氢钾(KH2PO4)1g 硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.5g 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 蒸馏水 1000ml
除葡萄糖外，上述各成分加入蒸馏水内，微温溶解后，调节pH 约6.8，煮沸，加葡萄糖溶解后，摇匀滤清，调pH 使灭菌后为6.4±0.2，分装，115℃压力蒸汽灭菌 20min备用。B.11 血琼脂培养基
营养琼脂 100 ml
脱纤维羊血(或兔血)10 ml
将营养琼脂加热熔化待冷至 50℃ 左右，以无菌操作将 10ml 脱纤维血加入后摇匀，倒平皿置冰箱备用。B.12 注意事项
配制培养基注意事项如下：
a)配制培养基的容器不宜用铜锅或铁锅，以免影响细菌生长；
b)培养基用的试管口和锥形烧瓶口应用普通棉花制成的棉塞，再用牛皮纸包好；
c)试剂与培养基配制好后应置清洁处保存，常温下不超过 1 个月。附件：
1空气消毒效果的监测
采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。(1)采样方法
1)布点方法；室内面积≤30cm2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁IM处；室内面积>30cm2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁lm处。
2)平板暴露法：将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8m～1.5m，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即
送检。
3)检测方法：将送检的平板置37℃温箱培养48h，计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。
(2)结果判定Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域：细菌总数≤200 cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域：细菌总数≤500 cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格。注意事项：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟后进行采样。
2物品和环境表面消毒效果监测采样时间：在消毒处理后进行采样。
(1)采样方法：用5cm×5cmd 标准灭菌规格板，放在被检问题表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个，用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含有相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
(2)结果判定Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5CFU/cm3并未检出致病菌为消毒合格。Ⅲ类区域：细菌总数≤10CFU/cm3并未检出致病菌为消毒合格。Ⅳ类区域：细菌总数≤15CFU/cm3 并未检出致病菌为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏3手的消毒效果监测采样时间:在消毒后立即采样。
（1）采样方法1）手的采样：被检人五指并拢，用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30 cm3），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含有相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。2）结果判定Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤5CFU/cm3，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格。Ⅲ类区域工作人员：细菌总数≤10CFU/cm 3并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。Ⅳ类区域工作人员：细菌总数≤15CFU/cm3 并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。4 压力蒸汽灭菌效果监测方法
（1）化学监测法1)化学指示卡(管)监测方法：将既能指示温度，又能指示温度持续时间的化学指示管(卡)放人每一待灭菌的物品包中央，经一个灭菌周期后，取出指示管(卡)，根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。2)化学指示胶带监测法：将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的改变，以指示是否经过灭菌处理。3)结果判定：检测时，所放置的指示管(卡)的性状或颜色均变至规定的条件，可认为该包灭菌合格。4)注意事项：监测所用化学指示剂须经卫生部批准，并在有效期内使用。(2)生物监测法1)指示菌株：指示菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31株)，菌片含菌量为5.0X105-5.0x106cfu/片，在121℃±0.5℃条件下，D值为13-1.9min，杀灭时间(KT 值)≤19min，存活时间(ST值)为≥3.9min。2)培养基：试验用培养基为溴甲酚紫蛋白胨水培养基。
（3)检测方法：将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装人灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。灭菌柜室内,排气口上方放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣，4块小手
术巾，2块中手术巾，1块大手术中，3O块10cm x 10cm8层纱布敷料包裹成25cm X 30cm x 30cm大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm x 13cm x 6cm)代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投人溴甲酚紫蛋白胨水培养基中，经56℃培养7天(自含式生物指示物按说明书执行)，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。
(4)结果判定：每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌不合格。(5)注意事项：监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。紫外线消毒效果的监测(1)紫外线灯管辐照度值的测定1)检测方法：开启紫外线灯5min 后，将测定波长为254nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m的中央处，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯管的辐照度值。2)结果判定：普通30w。直管型紫外线灯，新灯辐照强度≥90Uw/cm2为合格；使用中紫外线灯辐照强度≥70Uw/cm2对为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度≥180 Uw/cm2行为合格。3)注意事项：测定时电压 220v土5v，温度20一25℃，相对湿度<60%，紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用。医疗器械灭菌效果的监测
(1)采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。常规监测
1)检测方法：用无菌的方法将拟检缝合针、针头、手术刀片等小件医疗器械各5支，分别投人5ml的无茵洗脱液中；注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次；手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下取2份以上用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。将采样管用力振打80次，用无菌吸管吸取lml待检样品放于灭菌平皿内，加人已熔化的45℃-48℃的营养琼脂15-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置37℃温箱培养48h，计数菌落数。
第四篇：金相检验操作规程
金相检验操作规程
取样－粗磨－细磨－抛光－腐蚀－显微观察评级
1、取样，取样要具有代表性，试样尺寸尽量12-20mm范围内，截取过程中应防止组织发生变化（要求截取试样过程中试样受热、受外力作用都能尽量小）通常用于切割试样的有砂轮切割机、原材料检测试样：a)试样的金相检测面要平行于轧制方向；
2、细磨细磨一般在金相砂纸上对粗磨好的试样进一步磨制，为抛光作好准备。细磨一般要由粗到细依次经过240＃400＃800＃金相砂纸。每更换一道砂纸，试样转动90°角，以观察上道砂纸划痕是否全部磨掉。细磨后，将试样和双手冲洗干净。
3抛光 抛光的目的是除去试样磨面上磨痕，使其呈光亮无痕的镜面。抛光在涂有金刚石研磨膏的专用抛光机上进行，并在抛光机上沿半径方向往复移动或转动，以防产生抛光道痕或拖尾。抛光好的试样冲洗干净，并迅速用吹风机吹干。
3.2.5试样的腐蚀 为进行显微组织检验，须对抛光好的金属试样进行腐蚀，以显示其真实，清晰的组织结构。腐蚀试剂4%硝酸酒精溶液腐蚀金相显微组织：一般过程：冲洗抛光试样－酒精擦洗－吹干－腐蚀－冲洗－酒精擦洗－吹干。
根据所需放大倍数选择物镜及目镜。试样的显微组织检验包括腐蚀前的检验和腐蚀后的检验。腐蚀前主要检验试样中的夹杂物、裂纹、孔隙等及发现磨制过程中所引起的缺陷。腐蚀后主要检验试样的显微组织。
第五篇：超声波检验操作规程
超声波检测操作规程
UT检测岗位职责
1、负责按相关产品标准和方法标准，对钢管焊缝进行超声检测及判定。
2、负责超声波设备的各项技术指标和校准及设备维护。
3、负责超声检测对比试样及工艺参数的校准。
4、负责擦伤记录的填写及质量信息的反馈。操作方法和步骤
1、接通电源：开启面板上的电源开关，可听到仪器内部发出频率约2KHZ 的微弱音响，表示仪器的直流变换器工作正常。约1分钏后，荧光屏上即会出现扫描基线。
2、调节面板上的聚焦旋钮，使波形聚焦至最清晰为止。
3、调节扫描速度：采用水平调节法，CSK-IA试块调节，将探头对准R50、R100调节仪器，使B1、B2分别对准水平刻度L1、L2。当使用K2探头时，L1=44.7、L2=89.4；当使用K3探头时，L1=47.4,L2=94.8，这时水平距离扫描速度为1：1.4、调节探伤灵敏度：采用对比试块，调整仪器灵敏度。当采用￠1.6通孔对比试样时，合格极限信号为100%；当采用￠3.2通孔对比试样时，合格极限信号为33.3%。
5、探伤准备：清理焊缝两侧，不允许有锈蚀、斑点、氧化层、油漆和飞溅等污物。
6、用毛刷在焊缝两侧各50mm范围内刷耦合剂（浆糊）。探头应垂直于焊缝表面旋转50mm处。用一、二次波在焊缝单面双侧进行锯齿形招查，每次前进齿距不得超过探头晶片直径。当发现缺欠产生的信号大于给定的灵敏度合格极限信号时，则该缺欠应视为缺陷，应在该部位用石笔做出标记。
5.1控伤完毕后应及时关闭尿布，并做好探伤记录，并将不合格信息及时反馈给补焊工。
